以免疫球蛋白为载体的抗O型口蹄疫病毒基因工程疫苗的构建

以自体免疫球蛋白作为外源抗原的载体来研制疫苗是一条研制安全、高效疫苗的新途径。将猪IgGH链基因中的CDR3区缺失 ,剩余的两个片段分别连接到pBluescriptⅡSK(+)和 pBluescriptⅡKS(+)上 ,其中一片段再与编码FMDVVP1两个拷贝的 141～ 16 0位氨基酸残基和一个拷贝的 2 0 0～ 2 13位氨基酸残基构成的串联片段2 0AA～ 14AA～ 2 0AA的核苷酸片段相连。然后将它们切下与质粒表达载体 pET2 8b相连 ,构建出融合表达质粒pET2 8b FH ,经限制酶酶解及DNA序列分析证明该融合基因各连接点及读框正确。转入大肠杆菌BL2 1(DE3) plysS表达出一分子量为 6 4kD的蛋白质。经ELISA检验证明 ,大肠杆菌细胞中表达的融合蛋白有O型FMDV抗原活性。将该融合蛋白肌肉注射免疫豚鼠和猪 ,攻毒实验表明 ,疫苗pET2 8b FH对豚鼠产生了保护作用 ,保护率为 6 6 % ,对猪也有保护作用。

我国猪口蹄疫O型基因工程疫苗研制成功

复旦大学、上海市农业科学院、浙江省农业科学院和中国农科院兰州兽医研究所合作完成的“猪口蹄疫O基因工程疫苗”成果鉴定会近日召开。该猪口蹄疫O型基因工程疫苗刚刚获得农业部授予的二类新兽药注册证书，标志着该疫苗制品已达到进行工业化生产的质量标准。该疫苗也是国际上第一个可登÷兰苎生产的口蹄疫基因工程疫苗。

我国猪口蹄疫O型基因工程疫苗研制成功

据报道，复旦大学、上海市农业科学院、浙江省农业科学院和中国农科院兰州兽医研究所合作完成的“猪口蹄疫O型基因工程疫苗”成果鉴定会近日召开。该猪口蹄疫O型基因工程疫苗刚刚获得农业部授予的一类新兽药注册证书，标志着该疫苗制品已达到进行工业化生产的质量标准。该疫苗也是国际上第一个可以工业化生产的口蹄疫基因工程疫苗。实验数据同时表明，接种过该疫苗的猪肉对人体无害。

猪0型口蹄疫基因工程疫苗候选株的构建及其免疫原性分析

近年来．O型口蹄疫病毒已演化出多种谱系。目前应用的疫苗已不能有效保护多谱系口蹄疫的流行，这给我国猪口蹄疫的防控带来了极大的困难。为了进一步发展免疫原性好、抗原谱广的猪O型口蹄疫疫苗候选株．本研究以O／HN／93现用疫苗毒株的感染性克隆为骨架，构建了含VP3（58位）和VPl（43、48、137、139、140、141和142位）氨基酸改造的全长克隆。线性化的全长cDNA和盯RNA聚合酶质粒共转染BHK细胞后获得拯救病毒。RTPCR和乳鼠致病性试验表明拯救病毒遗传稳定，具有与亲本病毒相似的致病性。用拯救的基因工程病毒灭活疫苗免疫猪28d后分别用中国谱系、泛亚谱系和缅甸98谱系猪源毒的流行毒攻击，结果均获得了完全保护（16／16）。O／HN／93灭活疫苗免疫猪能完全保护泛亚谱系和缅甸98谱系猪源病毒的攻击（16／16）。但不能完全保护（12116）中国谱系猪源病毒的攻击。结果表明基因工程病毒制备的灭活疫苗提高了对中国型猪源谱系病毒的免疫保护，拓展了抗原谱，是具有良好开发前景的疫苗候选株。

O型口蹄疫病毒P1-2A3C基因在家蚕杆状病毒表达系统中的表达

口蹄疫是一种严重危害畜牧业生产的烈性传染病。为了促进O型口蹄疫病毒(FMDV)基因工程活载体疫苗的研制,选取O型FMDV编码序列中的衣壳蛋白前体P1-2A基因和蛋白酶3C基因,插入家蚕杆状病毒转移载体pVL1393中,构建重组载体pVL-P1-2A3C,并与线性化病毒Bm-BacPAK6 DNA共转染家蚕BmN细胞,获得重组病毒Bm-P1-2A3C。将重组病毒感染家蚕5龄幼虫,以双抗体夹心ELISA法和间接血凝方法检测血淋巴中的表达产物:目的蛋白在感染病毒后120 h的蚕血淋巴中表达量最高,抗原表达呈阳性的最大稀释倍数为1∶128。结果显示O型FMDV的P1-2A3C基因已在家蚕体内获得表达。

藏猪和长白猪对口蹄疫疫苗免疫应答特性的比较

本试验旨在比较藏猪和长白猪接种口蹄疫O型灭活疫苗后免疫应答特性的差异。分别用猪口蹄疫O型灭活疫苗免疫接种8日龄藏猪和长白猪,在免疫前和免疫后的6、8、12和16周分别采集抗凝血,采用血常规计数血液中免疫细胞的变化情况,ELISA法测定血清中抗猪口蹄疫O型病毒特异性抗体的含量,定量RT-PCR检测与免疫应答调控相关基因的表达水平。结果显示:藏猪的体液免疫应答水平和Th等免疫细胞数量显著高于长白猪,且TLR7、CCR7、CD62L和CD4基因的表达水平也明显升高,而长白猪IL-10的表达水平显著高于藏猪。

抗口蹄疫苗问世

复旦大学生命科学院郑兆鑫教授、上海农业科学院徐泉兴研究员等科研人员于近日宣布：经过18年潜心攻关，已成功研制出抗口蹄疫基因工程疫苗——“抗猪O型口蹄疫基因工程疫苗”这种疫苗不带任何感染性病毒，因此既不会引起感染，也无副作用。

我国猪口蹄疫O型基因工程疫苗研制成功

据报道．复旦大学、上海市农业科学院、浙江省农业科学院和中国农科院兰州兽医研究所合作完成的“猪口蹄疫O型基因工程疫苗”成果鉴定会近日召开。该猪口蹄疫O型基因工程疫苗刚刚获得农业部授予的一类新兽药注册证书．标志着该疫苗制品已达到进行工业化生产的质量标准。该疫苗也是国际上第一个可以工业化生产的口蹄疫基因工程疫苗。实验数据同时表明，接种过该疫苗的猪肉对人体无害。