3种亚抑菌浓度抗生素对耐药基因水平传播的影响

目的揭示在不同种类的亚抑菌浓度抗生素作用下,细菌耐药基因水平传播的一般规律。方法选择四种不同抑菌机制的抗生素(氨苄西林、环丙沙星、红霉素和链霉素),在亚抑菌浓度条件下,将供体菌和受体菌共培养,通过PCR法和整合效率的测定,研究了整合酶对耐药基因整合效率的变化规律,并使用了不同耐药基因进行验证。结果除红霉素外,在低于50%MIC浓度抗生素的作用下,随着抗生素作用剂量的提高,整合酶整合效率有增高的趋势。结论亚抑菌浓度的抗生素作用下,提高了整合酶的整合效率,能够促进耐药基因的水平传播。

亚抑菌浓度抗生素对细菌生物膜形成的影响

细菌生物膜是临床持续性感染的主要原因之一。多项研究显示抗生素在亚抑菌浓度下可抑制细菌生物膜的形成,亚抑菌浓度抗生素对细菌生物膜的作用已受到临床和基础研究者的关注。事实上,亚抑菌浓度抗生素对生物膜的调控作用仍不清楚,常因抗生素和菌株的不同表现各异,有时甚至诱导生物膜生成,因此亚抑菌浓度抗生素的临床应用尚需大量的证据。

不同种类亚抑菌浓度抗生素对细菌释放内毒素的影响

研究不同种类亚抑菌浓度抗生素与细菌释放内毒素的关系。实验选择临床常用的六种抗生素(哌拉西林、亚胺培南 /西司他丁、头孢他啶、环丙沙星、阿米卡星和头孢哌酮 /舒巴坦 ) ,以 0 .5×MIC药物浓度分别作用于铜绿假单胞菌 PA10 3和大肠埃希氏菌 V5 17。检验抗生素作用后细菌菌量、形态学变化及培养液中游离内毒素水平。结果不同种类抗生素作用后能使细菌形态发生改变 ,同时能不同程度引发细菌释放内毒素。其中哌拉西林、环丙沙星和头孢他啶引发细菌释放的内毒素最多 ,其次为阿米卡星 ,亚胺培南 /西司他丁和头孢哌酮 /舒巴坦引发细菌释放的内毒素最少。结论 :不同种类抗生素可以引发细菌释放内毒素。提示临床应用抗生素 ,除考虑药敏外 ,还应考虑抗生素引发细菌释放内毒素的能力 ,抗生素处于亚抑菌浓度时尤需引起重视。

亚抑菌浓度的抗生素对金黄色葡萄球菌杀白细胞素表达及释放的影响

目的：观察亚抑菌浓度抗生素对金黄色葡萄球菌（金葡菌）杀白细胞素（PVL）表达的影响。方法利用 PCR筛选出8株 PVL 阳性金葡菌。常量稀释法测定克林霉素、替加环素、利奈唑胺和万古霉素最低抑菌浓度值（MIC）；荧光定量 PCR 测定前3种抗生素对 PVL 阳性金葡菌在1/8、1/4、1/2 MIC 作用下 PVL mRNA 相对变化。 ELISA 法测定4种抗生素1/4、1/2 MIC 时 PVL 蛋白含量。结果克林霉素、利奈唑胺和替加环素在1/8、1/4、1/2 MIC 时均可降低 PVL表达。 PVL mRNA 在3种抗生素作用下分别降低17%～82%、8%～85%和11%～78%；PVL 蛋白水平在1/4、1/2 MIC 克林霉素和利奈唑胺作用下，分别下降了65%和83%、40%和61%，替加环素仅1/2 MIC 时降低较明显，达64%。万古霉素不影响 PVL 表达。结论不同抗生素亚抑菌浓度时对 PVL 表达影响不同。克林霉素和利奈唑胺可明显降低PVL 表达，且呈剂量依赖性，替加环素只在较高浓度时抑制PVL 表达，万古霉素对 PVL 表达无影响。

亚抑菌浓度抗生素对细菌耐药性和毒力影响的研究进展

细菌的耐药性和毒力是决定抗生素治疗成败的关键。近年来研究表明亚抑菌浓度抗生素可以诱导细菌耐药并影响细菌的毒力。本文介绍了亚抑菌浓度抗生素产生的来源;阐述了亚抑菌浓度抗生素对细菌耐药性和毒力的影响。亚抑菌浓度抗生素对细菌耐药性的影响涉及了细菌的耐药选择性、生物被膜和持留菌的形成、基因突变、水平基因转移和基因表达;对细菌毒力的影响主要包括细菌的黏附性、运动性和其它毒力因子。以期为畜牧生产中减少和避免亚抑菌浓度抗菌药的产生,减缓和克服细菌耐药性,降低致病菌的毒力提供参考。

亚抑菌浓度抗生素对高毒力肺炎克雷伯菌毒力基因表达的影响

目的探究在亚抑菌浓度抗生素作用下,高毒力肺炎克雷伯菌毒力基因表达水平的变化。方法采用纸片扩散法、Vitek-2 compact法测定菌株对临床常见抗菌药物的敏感性,并用微量肉汤稀释法检测菌株对头孢西丁和阿米卡星的MIC值。聚合酶链式反应(PCR)对荚膜血清型(K1、K2、K5、K20、K54、K57)及毒力相关基因(rmpA、aerobactin、kfu、alls、magA、wcaG、fimH、mrkD)进行检测。根据菌株对两种药物的MIC值,配制1/2MIC、1/4MIC、1/8MIC亚抑菌浓度抗生素梯度。运用qRT-PCR检测1/2MIC、1/4MIC、1/8MIC浓度头孢西丁、阿米卡星对菌株处理后毒力基因相对表达量的改变,SPSS软件16.0版本对其差异进行比较分析,通过基质辅助激光解吸电离飞行质谱(MALDI-TOF MS)及ERIC-PCR检测菌株之间的同源性。结果共收集57株高毒力肺炎克雷伯菌,对大多数临床常用抗生素保持敏感,PCR结果显示K1型有17株,K2型21株,K20型2株,K57型8株,有9株未检出血清型。rmpA、aerobactin基因检测全部阳性,wcaG、kfu、magA 3个基因分别检出17株、21株、16株。fimH、mrkD全部阳性。亚抑菌浓度头孢西丁及阿米卡星作用下,与对照组相比,3种浓度(1/2MIC、1/4MIC、1/8MIC)的2个抗生素对2种毒力基因均有明显的抑制作用(P<0.05),头孢西丁的抑制程度最高。3种浓度抑制程度相比,以1/2MIC抗生素抑制效果最强。结论高毒力肺炎克雷伯菌对临床常用抗生素有较高的敏感性,血清型K1、K2是高毒力肺炎克雷伯菌的常见血清型,在亚抑菌浓度头孢西丁、阿米卡星作用下,rmpA、aerobactin毒力基因表达下降。

亚抑菌浓度美罗培南对多重耐药鲍曼不动杆菌生物膜作用的研究

目的:探讨亚抑菌浓度美罗培南对多重耐药鲍曼不动杆菌(MDR-Ab)生物膜作用的影响。方法:采用微量肉汤稀释法测定某三甲医院从临床血液标本中分离的6株碳青霉烯类耐药的多重耐药鲍曼不动杆菌(MDR-AB)对美罗培南的最低抑菌浓度(MIC),结晶紫半定量法测定菌株生物膜形成能力。A组实验用96孔聚苯乙烯板体外构建MDR-AB生物膜的模型,用亚抑菌浓度美罗培南作用于成熟生物膜;B组实验用96孔聚苯乙烯板将MDR-AB浮游菌液与亚抑菌浓度美罗培南共培养。通过结晶紫半定量染色法对生物膜进行染色,再用多功能酶标仪测生物膜在560 nm波长处的OD值。结果:A组a、b、c中所形成生物膜OD值与对照组d组比较,48 h结果有统计学意义(P<0.05),而96h无统计学意义(P>0.05);B组X、Y、Z的生物膜形成过程中,48 h和96 h后OD值与对照组W有统计学意义(P<0.05)。结论:MDR-Ab有形成生物膜的能力;亚抑菌浓度美罗培南具有破坏成熟生物膜的能力,且其破坏能力随着浓度的升高而增强;1/2 MIC、MIC浓度的美罗培南可能抑制MDR-Ab生物膜形成,而1/4 MIC浓度的美罗培南则可能诱导MDR-Ab生物膜形成。

恩诺沙星和环丙沙星对金葡菌的抗菌后效应及抗菌后亚抑菌浓度效应

报告了抗菌后效应 (postantibiotic effect,PAE)、抗菌后亚抑菌浓度效应 (postantibiotic sub- MIC effect,PASME)、亚抑菌浓度效应 (sub- MIC effect,SME)研究的方法学和恩诺沙星、环丙沙星对金葡菌抗菌后效应及抗菌后亚抑菌浓度效应的研究结果。试验表明 :2、4MIC的恩诺沙星对金葡菌的 PAE为 1.0 3、1.5 0 h,1/2、1、2、4MIC的环丙沙星的 PAE为 0 .5 1、0 .88、1.47、1.92 h;1/8、1/4、1/2 MIC的恩诺沙星对经 4MIC药物诱导 1h的金葡菌可产生0 .38、1.15、>12 .31h的 PASME,1/8、1/4、1/2 MIC的环丙沙星的 PASME为 2 .6 9、>10 .17、>13.17h;1/8、1/4、1/2 MIC的恩诺沙星和环丙沙星对金葡菌产生的 SME分别为 0 .40、0 .91、>9.44 h和 0 .42、1.14、>9.0 2 h。上述结果说明 ,PAE、PASME和 SME的大小与药物浓度呈正相关 。

22种抗生素对肺炎克雷伯菌肺炎亚种抑菌浓度的研究

用ＡＭＳ法测定２２种抗生素对１０５株ＫＰＰ的抑菌浓度，结果显示ＣＩＰ的抑菌浓度为０．６４ｍｇ／Ｌ，ＧＥＮ、ＴＯＢ、ＡＭＩ、ＣＦＸ、ＩＭＩ、ＣＦＴ、ＣＦＳ、ＣＦＵ、ＣＥＴ、ＴＥＰ、ＣＦＺ、ＣＦＰ为１．０８～９．９５ｍｇ／Ｌ，ＡＺＴ、ＣＦＡ、ＰＩＰ、ＴＩＡ、ＡＭＰ、ＭＥＺ为１０．１７～３７．０５ｍｇ／Ｌ，ＮＩＴ为９０．９６ｍｇ／Ｌ，ＴＩＣ为１５８．１９ｍｇ／Ｌ，ＣＡＲ为３５５．８６ｍｇ／Ｌ。在痰液与粪便分离的ＫＰＰ中，ＭＥＺ、ＮＩＴ、ＴＩＣ对痰液分离菌的抑菌浓度明显高于粪便分离菌（Ｐ＜０．０５），其他１９种抗生素无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。

氨苄西林的体外抗菌后效应及抗菌后亚抑菌浓度效应研究

采用菌落计数法测定了氨苄西林对4株细菌的体外抗菌后效应(PAE),以及对2株细菌的体外抗菌后亚抑菌浓度效应(PASME)。结果显示,氨苄西林在0.5,1,2,4×MIC浓度时,对金黄色葡萄球菌C26112的PAE值分别为1.14±3.05,1.62±2.11,1.87±1.70和2.45±1.31h,对金黄色葡萄球菌临床分离株的PAE值分别为1.05±1.84,1.38±1.25,1.56±1.35和2.29±2.04h;对大肠杆菌ATCC25922和临床分离株的PAE很小甚至没有;在1/8,1/4,1/2×MIC时对金黄色葡萄球菌C26112及临床分离株的PASME值分别为3.61±1.38,4.75±2.18,6.8±1.51h和3.01±2.5,4.2±1.21,5.9±1.23h;氨苄西林对金黄色葡萄球菌的PAE(0.5～4×MIC)及PASME(1/8～1/2MIC)与浓度在一定范围内呈剂量依赖性,并且在亚抑菌浓度下也具有PAE,当药物浓度达4×MIC时,PAE明显延长(P<0.05),且所测得的PASME较PAE长。所有结果提示:在临床设计给药方案时,对金黄色葡萄球菌敏感株引起的临床感染,除了考虑药代动力学和MIC指标外,还应考虑PAE和PASME因素,可适当延长给药间隔时间;而对PAE无意义的大肠杆菌敏感株引起的临床感染,宜持续给药或缩短给药间隔,也可达到较好的治疗效果。

多种抗生素最小抑菌浓度测定药盒的临床应用及评价

首先在国内常规使用自行研制的多种抗生素最小抑菌浓度测定药盒对住院感染病人的致病菌随时进行检测,结果证明该方法简单易行,省时省力,尤适于临床感染重症病人抗生素的选择及应用。在检测的107株致病菌中,发现45株医院内感染及62株医院外感染菌中的革兰氏阴性杆菌(绿脓杆菌除外)对氨苄青霉素及庆大霉素的耐药较为严重,可能与这两种药物使用广泛有关。5株医院内感染金葡球菌中有2株耐苯唑青霉素(简称ORSA),其中1株对万古霉素耐药。全部医院内感染绿脓杆菌耐妥布拉霉素。医院外感染金葡球菌及绿脓杆菌则分别对苯唑青霉素和妥布拉霉素极度敏感,说明金葡球菌和绿脓杆菌对苯唑青霉素和妥布拉霉素耐药性的获得可能是在医院内发生的。耐万古霉素ORSA的出现,使得ORSA感染的治疗更加困难,值得引起重视。

亚抑菌浓度抗菌药物影响金黄色葡萄球菌生物膜形成的研究进展

金黄色葡萄球菌(SA)是引起医院获得性感染的常见病原体之一,极易黏附在导管或植入物表面形成生物膜导致耐药性增加,给临床治疗带来极大挑战。近年研究表明,抗菌药物处于亚抑菌浓度时可影响SA生物膜形成。因此,本文阐述SA生物膜的形成过程及基因调控,不同抗菌药物在亚抑菌浓度下对SA生物膜形成的影响及其作用机制,以期为有效控制及治疗SA生物膜相关感染提供一定依据。

双黄连粉针与几种抗生素伍用的体外最低抑菌浓度研究

目的:探讨双黄连粉针与抗生素联合使用的临床意义。方法:用试管稀释法测定几种抗生素单用及与双黄连伍用对细菌的体外最低抑茵浓度(MIC)。结果:双黄连粉针与青霉素、头孢唑啉及红霉素配伍后对金黄色葡萄球菌的体外抑菌效果明显增强(P<0.05);头孢噻肟和头孢唑啉与双黄连配伍后对肺炎克雷伯菌的体外抑菌效果有不同程度的增强(P<0.05)。结论:对于不同的细菌感染,选用对其敏感的抗生素与双黄连配伍使用具有积极的临床意义。

亚抑菌浓度万古霉素对质粒接合转移的促进作用

为了分析亚抑菌浓度万古霉素对质粒接合转移的影响,本试验建立了以大肠杆菌(E.coli)J53作为受体菌,携带RP4-7质粒的E.coli DH5α和携带mcr-1阳性IncI2质粒的临床菌株E.coli LD67-1为供体菌的接合转移模型,测定亚抑菌浓度的万古霉素对接合转移的影响,并通过细胞膜通透性检测、扫描电子显微镜观察、活性氧(ROS)检测和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法探究其内在机制。结果显示,与空白对照组相比,亚抑菌浓度万古霉素可显著提高RP4-7质粒和mcr-1阳性IncI2质粒的接合转移频率(P<0.05);N-苯基-1-萘胺(NPN)和碘化丙啶(PI)探针检测显示,亚抑菌浓度万古霉素可使受体菌细胞内、外膜通透性增加,供体菌细胞外膜通透性增加;扫描电子显微镜观察显示,经1/4最小抑菌浓度(MIC)万古霉素处理后接合细菌细胞膜发生损伤;ROS检测结果显示,与空白对照组相比,虽然经1/4 MIC万古霉素处理的受体菌的ROS表达水平显著上调(P<0.05),但1/8 MIC万古霉素处理后,供体菌和受体菌的ROS水平均无显著变化(P>0.05);RT-qPCR结果显示,与空白对照组相比,亚抑菌浓度万古霉素显著上调了供体菌和受体菌的孔蛋白基因ompF和ompC的mRNA表达水平(P<0.05),极显著上调了trbBp基因(调控细菌间形成“连接桥”)的mRNA表达水平(P<0.01),显著上调了细菌SOS响应(SOS response)相关基因recA、recN、ruvA和lexA的mRNA表达水平(P<0.05)。结果表明,亚抑菌浓度的万古霉素可能通过提高细菌细胞膜通透性,触发SOS响应,促进接合转移“连接桥”形成等方式促进RP4-7质粒和mcr-1阳性IncI2质粒的接合转移过程。

兽用氟喹诺酮类的抗菌后效应、抗菌后亚抑制浓度效应、亚抑制浓度效应

5种兽医专用氟喹诺酮类抗菌药在体外对猪链球菌、大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌均具有不同程度的 PAE,最长者可达 3.2 3h。其中对猪大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌的 PAE略长于对猪链球菌的 PAE。各抗菌药对 3种细菌同时也具有较 PAE更长的抗菌后亚抑制浓度效应 ( PA- SME) ,并受诱导 PAE的药物浓度、亚抑菌药物浓度 ( Sub- MIC)及细菌种类的影响。一定接种量细菌暴露于各 Sub- MIC的药物中也表现出一定的亚抑制浓度效应 ( SME) ,且随 Sub-

11种β－内酰胺类抗生素对肺炎克雷伯菌肺炎亚种最低抑菌浓度的分析

１１种β－内酰胺类抗生素对肺炎克雷伯菌肺炎亚种最低抑菌浓度的分析深圳市人民医院（５１８０２０）卢月梅，何林，吴劲松，李勇，张立军，梁宝铎肺炎克雷伯菌肺炎亚种（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅｓｕｂｓｐ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ，Ｋｐｐ）是临床常见...

五种抗生素对猪肺炎支原体的最小抑菌浓度试验

猪支原体肺炎（mycoplasmalpneumoniaofswine，MPS）又称猪喘气病，是由猪肺炎支原体（Mycoplasmahyopneumoniae，Mhp）引起的一种高发病率、低死亡率的慢性呼吸道传染病。猪肺炎支原体和其他肺部病原体（如猪繁殖与呼吸综合征病毒、多杀性巴氏杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、猪流感病毒、猪圆环病毒2型等）共存的情况下，产生猪呼吸综合征，

抗生素及防腐剂在油茶组织培养中的抑菌效应研究

针对油茶组织培养过程中的细菌污染问题,在继代培养基中分别添加不同种类和质量浓度的抗生素和防腐剂,结果表明:(1)培养基中添加链霉素20 mg/L抑菌效果最佳,污染率为0,其次为青霉素G钠盐、青霉素G钠盐+四环素、四环素,多粘菌素B抑菌效果最差;(2)采用苯甲酸钠、山梨酸钾作为抑菌剂,污染率均在92%以上;(3)以添加抗生素链霉素20 mg/L的培养基苗木生长状况最佳,增殖系数为3.69,叶片数为3.73,苗木生长量为2.20 cm。

细菌对抗生素最低抑菌浓度不确定性的研究

用绿脓杆菌波动潜生体，羧苄西林诱导潜生体和繁殖体进行抗生素最小抑菌浓度（ＭＩＣ）试验。将奇异变形杆菌和大肠杆菌ｐＨＢ１０１接种于含氨苄西林（ＡＭＰ）的波动培养基上，动态测定培养基中ＡＭＰ变化。观察绿脓杆菌波动生长和奇异变形杆菌寄宿波动中细菌对抗生素ＭＩＣ的不确定性现象并探讨其产生机制。结果表明：绿脓杆菌波动潜生体、羧苄西林诱导潜生体的ＭＩＣ值比繁殖体高８～１６倍。在寄宿波动中，奇异变形杆菌能在高于自己ＭＩＣ值的ＡＭＰ波动培养基上向外扩散，波动出两环。因此，细菌由于经历不同，生理状态也不同，因而对抗生素的ＭＩＣ值表现出不确定性。

解脲支原体抗生素最小抑菌浓度测定

应用酶标板对３５株解脲支原体的抗生素敏感性进行了微量最小抑菌浓度（ＭＩＣ）测定。结果表明，３５株解脲支原体对强力霉素、氯霉素、红霉素敏感，其中强力霉素的抑菌效果最为理想（ＭＩＣ９０＜０．３９μｇ／ｍｌ），而对四环素全部耐药（ＭＩＣ９０＞１２５μｇ／ｍｌ）。