化学发光微粒子免疫检测法定量检测开封市从业人员抗甲型肝炎病毒IgG抗体含量

目的探讨化学发光微粒子酶免疫分析法定量检测开封市区从业人员抗HAV-IgG含量的临床应用价值。方法分别采用化学发光微粒子免疫法和ELISA法对664份血清进行抗HAV-IgG定性检测,对598份抗HAV-IgG阳性样本使用化学发光微粒子免疫法定量检测。结果化学发光微粒子酶免疫分析法阳性率为90.06%,ELISA法阳性率为83.73%,化学发光微粒子酶免疫分析法阳性率高于ELISA法,差异有统计学意义(P<0.01)。从业人员抗HAVIgG S/CO值随着年龄的增长逐渐升高,女性的S/CO值高于男性。结论相较于传统的ELISA法,化学发光微粒子免疫检测法检测阳性率更高,结果更精确,值得临床推广应用。

2015~2019年湖北省临床实验室抗甲型肝炎病毒抗体IgM能力验证(EQA)结果回顾分析

目的分析湖北省二级以上不同类型临床实验室采用不同检测方法检测抗甲型肝炎病毒抗体IgM(HAV-IgM)检测能力,为实验室进一步提高HAV-IgM检测能力提供参考依据。方法对全省2015~2019年HAV-IgM能力验证(EQA)检测结果从参加实验室的类型、对不同浓度及采用不同方法的检测能力进行分析。结果2015~2019年分别有260,262,262,272和262家实验室参加此项能力验证活动,合格率分别为96.9%,98.1%,95.4%,97.4%和95.4%,均在95%以上。但通过分析,发现有三个方面的问题:一是基层中医院检测的平均合格率相对较低(93.5%,其中二级中医院占84.6%);二是对低浓度能力验证物品检测的平均合格率相对较低(94.7%);三是采用免疫渗滤层析法检测的合格率较低(近5年的平均合格率仅为74.6%)。结论湖北省临床实验室HAV-IgM检测的总体水平较高,但基层中医院对低浓度样本的检测能力有待通过加强人员培训,选择合适的检测方法,做好全程质量控制等方面进一步提高。

慢性乙型肝炎患者相关自身抗体与血清乙型肝炎病毒DNA含量的相关性研究

近年研究发现,慢性乙型肝炎时可出现如抗核抗体（ANA）、抗线粒体抗体（AMA）和抗平滑肌抗体（SMA）等多种非特异性自身抗体[1,2],研究乙型肝炎病毒（HBV）感染与自身免疫的关系,将有助于探讨HBV发病机制,对于慢性乙型肝炎的治疗具有重要的意义。本实验通过对慢性乙型肝炎患者血清中ANA、AMA、SMA的检测,

丙型肝炎病毒IgG抗体阳性患者血清抗HCV IgM、ALT及HCV RNA的对比分析

目的:探讨丙型肝炎(H C V)IgG阳性患者的血清抗-H C V IgM、丙氨酸转移酶(A LT)水平与H C V R N A之间的关系。方法:通过第三代E IA试剂盒检测抗-H C V IgG、抗-H C V IgM,全自动生化分析仪检测丙型肝炎患者A LT水平,荧光定量逆转录聚合酶链反应(R T-PC R)方法检测H C V R N A,并进行比较。结果:在丙型肝炎IgG阳性患者中,抗-H C V IgM阳性率为8.3%,H C V R N A阳性率为41.7%。H C V R N A的检出在A LT异常情况下较正常明显高(P<0.05),但A LT水平与H C V R N A含量无线性相关性(r=0.346,P>0.05)。结论:抗-H C V IgM不能反映病毒复制,A LT异常情况下H C V R N A检出率高,但A LT水平与H C V R N A含量无线性相关性,H C V R N A仍是反映H C V复制的可靠指标。

抗EB病毒衣壳抗原IgG抗体亲合力诊断儿童传染性单核细胞增多症的价值及患儿免疫状态的变化

目的探讨抗EB病毒衣壳抗原(EBV-CA)IgG抗体亲合力对EB病毒(EBV)感染传染性单核细胞增多症(IM)的诊断价值及患儿免疫状态的变化。方法选取行抗EBV-CAIgG抗体亲合力及抗EBV-CAIgM抗体检测的儿童5882例,其中IM500例、非IM5382例,检测抗EBV-CAIgG抗体亲合力、抗EBV-CAIgM抗体、EBVDNA载量、外周血异型淋巴细胞(简称异淋)比例和外周血淋巴细胞亚群。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价抗EBV-CAIgG抗体亲合力、抗EBV-CAIgM抗体、异淋比例和EBVDNA单项及联合检测诊断IM的效能,并观察IM患儿的免疫状态。另选取临床诊断为IM并检测EBVDNA和淋巴细胞亚群的患儿502例,探讨EBVDNA阳性及阴性IM患儿的细胞免疫状况。结果在5882例儿童中,抗EBV-CAIgG抗体亲合力、抗EBV-CAIgM抗体、EBVDNA和异淋比例4项指标任意1项阳性的患儿为1031例(17.53%),其中IM的发生率最高(38.1%)。ROC曲线分析结果显示,抗EBV-CAIgG抗体亲合力、抗EBV-CAIgM抗体、异淋比例和EBVDNA诊断IM的曲线下面积(AUC)分别为0.883、0.729、0.788和0.664,4项指标联合检测的AUC为0.847。依据年龄将1031例患儿分为婴儿组(<1岁)、幼儿组(1~3岁)、学龄前期组(4~6岁)和学龄期组(7~17岁)。除婴儿组外,其他3组中的IM患儿CD3-CD16+CD56+自然杀伤(NK)细胞比例、CD3-CD19+B细胞比例、CD3+CD4+T细胞比例及CD4+/CD8+比值显著低于非IM患儿(P<0.01),CD3+T细胞比例、CD3+CD8+T细胞比例显著高于非IM患儿(P<0.01)。婴儿组中的IM患儿CD3-CD19+B细胞比例显著低于非IM患儿(P<0.01),CD3+T细胞、CD3+CD8+T细胞比例显著高于非IM患儿(P<0.01),而CD3-CD16+CD56+自然杀伤(NK)细胞比例、CD3+CD4+T细胞比例、CD4+/CD8+比值IM患儿与非IM患儿之间差异无统计学意义(P>0.05)。EBVDNA阳性IM患儿与阴性IM患儿比较,上述变化更明显。结论抗EBV-CAIgG抗体亲合力对IM的诊断价值优于异淋比例、抗EBV-CAIgM抗体和EBVDNA。IM患儿细胞免疫功能明显紊乱,EBVDNA阳性的IM患儿紊乱程度更严重。

入伍新兵人群甲型病毒性肝炎血清抗体水平监测

目的了解入伍新兵人群中甲型病毒性肝炎(甲肝)病毒IgG抗体的分布情况。方法采用回顾性血清流行病学调查方法,利用酶联免疫吸附试验技术,对近4年来自6个省市的325名入伍新兵血清进行了甲肝病毒IgG抗体检测,统计分析其阳性率。结果发现各年间入伍新兵血清甲肝病毒IgG抗体差别不显著,为31.87%～41.76%,平均37.85%;地区间差别较大,湖北省(49.21%)和河南省(40.00%)较高,山西省最低(26.67%);新兵入伍前学历和工作与否与其甲肝病毒IgG抗体阳性率差异无统计学意义。结论入伍新兵人群中甲肝病毒IgG抗体阳性率有地区差异,阳性率明显低于70%警戒线,应引起高度重视。

人抗乙脑病毒IgG抗体检测试剂盒的研制和应用

乙脑病毒SA14-14-2株疫苗原液经β丙内酯灭活Sepharose 4FF纯化后作为包被抗原，制备阳性替代品，应用间接ELISA法检测人血清中乙脑病毒抗体。建立内部质量控制血清标准，比较蚀斑减少中和试验（PRNT）与ELISA的相关性。检测46份乙脑相关血清的结果与国内同类试剂进行比较，阳性符合率为93．1％，阴性符合率为89．5％。在成安地区3万多名2—14岁人群中进行乙脑病毒IgG抗体水平普查，阳性率22．5％，与国内同类试剂的符合率为95．7％，使用效果很好。

抗核抗体和疱疹病毒IgG类抗体间的相关性

用ＥＬＩＳＡ间接法检测了人血清中的ＣＭＶ和ＨＳＶⅠＩｇＧ类抗体，４８份间接荧光免疫技术检测的ＡＮＡ阳性血清和５７份ＡＮＡ阴性血清，ＣＭＶＩｇＧ类抗体阳性率分别为６９％和３９％。３１份免疫印迹法检测的ＥＮＡ抗体阳性血清和６２份ＥＮＡ阴性血清，ＣＭＶＩｇＧ类抗体阳性率分别为７１％和４２％，两类抗核抗体阳性组和阴性组间ＣＭＶＩｇＧ类抗体阳性率有显著性差异，但ＨＳＶⅠＩｇＧ类抗体水平在这些抗核抗体阴性、阳性组间的差异不具显著性。

用反向被动血凝抑制试验进行乙型肝炎病毒表面抗原单克隆抗体的位阻分析

本文报告获得28株分泌抗HBsAg单克隆抗体的杂交瘤细胞系,均为抗HBsAg“a”决定簇抗体。产生鼠IgM抗体的有一个细胞系;IgG1 18个系;IgG 2a 1个系;IgG 2b 6个系;IgG 3两个系。采用反向被动血凝抑制法测定了其中24种McAb的交互抑制现象。24种McAb可分为10个不同的抑制群。并对这种简单易行的位阻分析方法在实用中的价值做了讨论。

应用双抗体夹心ELISA法定量检测人源破伤风毒素单克隆抗体中的IgG含量

采用山羊抗人IgG作为包被抗体 ,辣根过氧化物酶标记的山羊抗人IgG作为标记抗体 ,建立一种双抗体夹心法用于定量检测人源破伤风毒素单克隆抗体的IgG含量。以纯化的IgG作标准 ,用平行线法测得亲和层析纯化的人源破伤风毒素单克隆抗体G2的含量为 0 .5 12 μg/ml,与分光光度法测得的结果基本一致。因而样品检测采用纯化G2作参考标准 ,制作标准曲线 ,测定了已知样品和未知样品的抗体含量。结果表明本法重复性好 ,特异性强 。

乙型肝炎病毒核糖核酸酶H(HBV-RNaseH)蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及初步鉴定

目的建立能稳定分泌抗乙型肝炎病毒核糖核酸酶H1及H2(HBVRNaseH1及H2)重组蛋白单克隆抗体(McAb),并对其生物学活性进行实验室鉴定。方法用重组HBVRNaseH1及H2蛋白为抗原免疫BALB/c/小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,经有限稀释克隆3次后制备分泌McAb的杂交瘤细胞株,并用酶免疫(EIA)法对其分泌抗体进行初步鉴定。结果融合后的阳性克隆中筛选出4株能稳定分泌McAb的杂交瘤细胞株,命名为H1C6、D3;H2E2、F4。这4株McAb与HBVRNaseH1及H2重组抗原均有良好的反应性,杂交瘤培养上清的EIA抗体滴度为1∶100～1∶200,其中2株诱生的同系小鼠腹水滴度为1∶800,1∶1000。这4株McAb均为IgG1亚型。结论该McAb的制备,可为HBV感染者血清和肝组织中抗原检测方法的建立和生物工程药物的研制创造条件。

斑点免疫金渗滤试验检测血清中抗登革病毒IgG抗体的研究

建立用斑点免疫金渗滤试验检测登革病毒感染中IgG抗体的方法，并与IFAT作了比较，结果两者符合率为94．7％．该法简便、快速，整个操作只需10min左右，适于在各级实验室推广应用。

不同人群抗SARS冠状病毒特异性抗体血清学检测与分析

目的 :探索不同人群中抗SARS冠状病毒特异性抗体的发生、发展及分布规律 ;评价间接ELISA方法检测SARS冠状病毒IgG、IgM特异性抗体试剂盒及改进方法。 方法 :分别获取SARS流行前无偿献血者标本 3990份 ,一线抗SARS医务人员标本 397份和临床确诊的SARS患者标本 15 7份 ,采用ELISA方法进行SARS冠状病毒特异性抗体检测。结果 :SARS流行前无偿献血者标本 3990份共检出IgG抗体阳性标本 16份 ,阳性率为 0 .4 0 % ;IgM抗体阳性标本 0份 ,阳性率为 0 %。一线抗SARS医务人员标本 397份 ,共检出IgG抗体阳性标本 2份 ,阳性率为 0 .5 0 % ;IgM抗体均为阴性。临床确诊的SARS患者标本 15 7份 ,共检出IgG抗体阳性标本 119份 ,阳性率为 75 .79% ;IgM阳性标本 6 8份 ,阳性率为 4 3.31%。结论 :一线抗SARS医务人员与SARS流行前无偿献血者IgG、IgM抗体阳性率无显著差异 (P =0 .76 >0 .0 5 ) ;采用该SARS冠状病毒 (变异株 )IgG抗体试剂盒检测SARS流行前无偿献血者人群存在一定的阳性率 ,说明该试剂盒包被的抗原与其它免疫球蛋白 (IgG)有交叉反应 。

不同ELISA试剂与1种假病毒中和试验检测COVID-19康复者恢复期血浆抗体结果分析

目的了解不同的严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)ELISA抗体试剂应用于核酸检测确诊新型冠状病毒肺炎(COVID-19)康复者恢复期血浆抗体检测的结果差异性。方法应用3种SARS-CoV-2 ELISA抗体试剂(代以ELISA试剂1、2、3)和1种假病毒中和试验(ppNAT),于2020年9月检测深圳地区30(人)份COVID-19康复者恢复期血浆,同时取32(人)份2019年2月冻存的健康献血者血浆作为实验对照组。以实时荧光RT-PCR检测新型冠状病毒核酸检测为参考标准,分析3种ELISA试剂对COVID-19康复者恢复期血浆病毒抗体的检出效能及不同免疫学试剂检测结果与康复者年龄、性别、住院时间、病情严重程度相关性。结果ppNAT和3种ELISA的IgG试剂在恢复期献浆者中检出率整体高于IgM试剂,ELISA(试剂)1、2、3和ppNAT的SARS-CoV-2 IgG抗体阳性检出率分别为100%(30/30)、93.33%(28/30)、96.67%(29/30),阴性对照组检出率均为0;SARS-CoV-2 IgM抗体阳性检出率分别为93.33%(28/30)、70%(21/30)、46.67%(14/30);阴性对照组中,IgM、IgG抗体检出率0。Pearson相关性分析:ELISA2 IgG抗体检测结果与ELISA3 IgG抗体检测结果相关系数(r)0.765(P<0.01),ppNAT检测结果、ELISA3 IgG抗体检测结果与康复者年龄的r值分别为0.422,0.385(P<0.05);住院时间、病情严重程度、性别与3种ELISA试剂SARS-CoV-2抗体检测值与Cut off比值(S/CO)无明显相关性(P>0.05)。结论不同ELISA试剂检测COVID-19康复者恢复期血浆,SARS-CoV-2 IgM抗体检出率差异较大;年龄一定程度影响抗体生成。

肺炎链球菌荚膜多糖特异性IgG抗体定量ELISA检测及质量控制要求

检测肺炎链球菌荚膜多糖(PPS)特异性抗体的酶联免疫吸附试验多年来经历了两次主要改进。介绍了WHO推荐的人血清抗肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)荚膜多糖抗体IgG定量ELISA(Pn PS ELISA)检测方法、关键试剂、局限性以及方法验证等内容。ELISA定量检测法,为预防肺炎链球菌的婴幼儿侵袭性疾病提供准确的抗体水平,并对肺炎链球菌疫苗的临床评价提供血清学证据。人血清中肺炎链球菌荚膜多糖抗体IgG是判断肺炎链球菌疫苗效力的重要指标。

恒河猴猴群中甲型肝炎病毒(HAV)血清学调查

用ELISA法对 183份来自不同饲养条件下各年龄阶段的自繁猴血清进行了甲型肝炎病毒抗体 (HAVIgG)的检测 ,阳性率为 6 8.9% ,其中单笼猴抗 -HAV阳性率明显低于大笼猴及群养猴 ,并随年龄的增长而升高。同时对 4 1只野生猴进行检测 ,阳性率为 19.5% ,明显低于自繁猴 ,这一结果为恒河猴的饲养管理提供依据。

自身免疫性肝炎临床误诊分析

目的探讨自身免疫性肝炎(AIH)的诊治措施及误诊原因、防范措施。方法回顾性分析2020年1月—2022年5月收治的AIH误诊为病毒性肝炎21例的临床资料。结果21例主要症状为食欲缺乏、乏力、黄疸、发热,伴腹胀12例,恶心5例,胸闷和胸痛4例,呕吐及关节痛各3例。体形消瘦,巩膜及皮肤黏膜黄染明显。查血丙氨酸转氨酶和天冬氨酸转氨酶升高;7例γ-谷氨酰转肽酶升高,碱性磷酸酶和总胆红素升高各6例。腹部B超检查示肝大18例,肝内回声不均。初期外院诊断为病毒性肝炎,予相应治疗15 d无好转,遂转我院。查血抗平滑肌抗体(SMA)、抗核抗体(ANA)阳性,血γ-球蛋白、IgG升高,结合肝炎病毒血清学检测阴性及相关病史,遂明确诊断为AIH。误诊时间18~21 d。确诊后,18例予泼尼松单独治疗,3例予泼尼松联合硫唑嘌呤治疗。治疗1年后随访,患者病情稳定,无复发。结论AIH发病较隐匿,以年轻女性高发,临床表现多样且无特异性,易误诊为病毒性肝炎,行肝炎病毒血清学检查及ANA、SMA、抗肝肾微粒体、免疫球蛋白或肝组织病理检查可区分二者,确诊后应及时予有效治疗,以改善患者预后。

抗猪瘟病毒IgG的研制

用驴制备抗猪瘟病毒 (HCV)免疫球蛋白 ,预防和治疗猪HCV感染。制备HCV抗原复合物 ,通过免疫驴 ,用纯化方法从驴血清中提取特异性抗体 (IgG) ,经过理化学检定、血清学、动物效力实验。免疫驴均可产生特异IgG ,Dot ELISA效价大于 1∶640 (IgG浓缩浓度为 60mg/mL) ;可保护猪免受HCV攻击 ;室温保存半年 ,4℃两年效价不变。已成功地应用HCV免疫驴制备出高效价特异性抗HCV IgG。

一株高滴度广谱抗HFRS病毒单克隆抗体的建立

本文用抗原上有些不同的肾综合征出血热(HFRS)病毒湖北毒株HA1018免疫BALB／c小鼠，与Sp2／0细胞融合，获得分泌抗HFRS单克隆抗体(MCAb)的杂交瘤E5细胞株。McAbE5为IgG1亚类，间接免疫荧光(IFA)测定腹水抗体滴度可达1：100万。

甲型肝炎病毒隐性感染和病人不同隔离方式的效果观察

甲型肝炎(甲肝)抗-HAV IgM抗体检测方法的建立,为甲肝早期诊断提供了依据。本文就甲肝流行期间,通过对甲肝病人家庭成员抗-HAV IgM抗体,抗-HAV IgG抗体的检测,以了解甲肝病毒隐性感染状况,并对甲肝病人不同隔离方式的效果进行了观察。对象与方法 1.观察对象 1988年1月下旬至4月宁波市发生一次介毛蚶传播的甲肝暴发流行,发病率达971.9/10万。