抗白介素-9单克隆抗体治疗支气管哮喘的研究进展

支气管哮喘是涉及多种细胞及细胞因子的慢性气道炎症性疾病。目前吸入型糖皮质激素、β_2受体激动剂、茶碱和白三烯受体拮抗剂等多种哮喘治疗药物均在临床广泛使用,但部分患者的哮喘症状仍不能得到良好控制。白介素(IL)-9参与哮喘的发生发展,抗IL-9单克隆抗体有望成为一种新的哮喘治疗药物。

抗白细胞介素-5单克隆抗体治疗哮喘效果的Meta分析

目的:系统评价抗白细胞介素-5(IL-5)单克隆抗体治疗哮喘的临床效果。方法:在PubMed、Embase和Cochrane对照试验中央注册中心检索有关抗IL-5单克隆抗体治疗哮喘的随机对照试验文献,检索时间为截至2024年3月,对数据采用CMA 2.0软件进行Meta分析。结果:纳入21篇文献,共8717例患者,试验组4593例,对照组4124例。Meta分析结果显示,在第1秒用力呼气容积(FEV1)、哮喘生活质量问卷评分、不良事件发生情况方面,试验组优于对照组。结论:抗IL-5单克隆抗体治疗哮喘的临床效果较好,可改善患者FEV1、生活质量,且安全性较高。

单克隆抗体-白介素2融合蛋白一级结构的确证

建立单克隆抗体-白介素2融合蛋白一级结构确证的方法。用基质辅助激光解吸飞行时间质谱测定单克隆抗体-白介素2融合蛋白的精确相对分子质量,毛细管等电聚焦方法测定其等电点,通过N_末端氨基酸序列的测定以及肽图分析,证实了抗体-白介素2融合蛋白一级结构表达的正确性,同时为单克隆抗体-白介素2融合蛋白的质量标准研究奠定了基础。

抗人白介素-28A单克隆抗体的制备与鉴定

目的制备抗人白介素-28A(hIL-28A)单克隆抗体(mAb)。方法以hIL-28A融合蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备抗hIL-28A mAb。采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定mAb的Ig亚类,通过ELISA、Western blot、免疫组化染色法、流式细胞分析、激光共聚焦显微镜技术鉴定mAb的特异性。结果获得2株稳定分泌抗hIL-28A mAb的杂交瘤细胞,但2株mAb均与hIL-29有弱交叉反应。2株mAb的类别均为IgM。Western blot分析表明,此mAb所识别的靶分子的相对分子质量(Mr)约为19 000。免疫组化染色表明,mAb与包皮和肺组织中的上皮细胞、结肠组织中的疑似巨噬细胞呈阳性反应。流式细胞仪分析显示,2株mAb与人脐静脉内皮细胞系HUVEC细胞的反应均呈阳性。激光共聚焦扫描显微镜观察到荧光标记的阳性反应物主要位于HUVEC细胞胞浆内。结论成功地制备抗hIL-28A mAb,为病毒感染性疾病、肿瘤和其他疾病的研究提供新的手段。

窄谱中波紫外线联合白介素8单克隆抗体乳膏治疗寻常型银屑病

目的 观察窄谱中波紫外线照射联合外用白介素8单克隆抗体乳膏治疗寻常型银屑病的疗效。方法对应用不同疗法的两组患者在不同治疗阶段的治疗效果采用PASI评分指标进行对比分析。结果两治疗组第8周时PASI评分均较治疗前明显降低,实验组第8周的PASI评分较对照组明显降低(P均<0.05)。结论窄谱中波紫外线联合白介素-8单克隆抗体乳膏治疗寻常型银屑病安全有效,且疗效优于单纯光疗法。

重组人源化抗白介素-6受体单克隆抗体对类风湿关节炎临床疗效及骨代谢的影响

目的:探讨重组人源化抗白介素-6受体单克隆抗体对类风湿关节炎(RA)临床疗效及骨代谢的影响。方法:选取2019年8月—2022年3月于萍乡市人民医院就诊并确诊RA患者60例,按随机数字表法将患者分为治疗组和对照组,各30例。治疗组采用重组人源化抗白介素-6受体单克隆抗体+甲氨蝶呤+稳定剂量泼尼松治疗,对照组采用甲氨蝶呤+稳定剂量泼尼松治疗。于治疗前和治疗3、6个月检测两组患者机体的C反应蛋白、类风湿因子、血沉、骨钙素(OC)、骨密度,评估两组患者的视觉模拟评分法(VAS)评分、Sharp评分及安全性。结果:两组治疗3、6个月的C反应蛋白、类风湿因子、血沉、VAS评分均明显低于治疗前(P<0.05),且治疗组治疗3、6个月上述指标均明显低于对照组(P<0.05)。两组治疗3、6个月的OC均高于治疗前(P<0.05),且治疗组治疗3、6个月OC均高于对照组(P<0.05);两组治疗前后股骨颈骨密度组间和组内比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。两组治疗3、6个月的Sharp评分均低于治疗前(P<0.05),且治疗组治疗3、6个月的Sharp评分均低于对照组(P<0.05)。治疗组不良事件发生率虽高于对照组,但两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:重组人源化抗白介素-6受体单克隆抗体可有效降低RA患者的C反应蛋白、类风湿因子及血沉水平,缓解其疼痛,升高OC,降低Sharp评分,且不会增加不良事件的发生,安全性较高。

抗白介素-9抗体对BALB/c哮喘小鼠T细胞功能的影响

目的通过比较不同干预措施对小鼠哮喘模型的影响情况,研究其对免疫系统中CD4+T辅助细胞2型(Th2细胞)活性的影响,旨在了解外源性抗白介素(IL)-9抗体(Anti-IL-9 Ab)在哮喘中的潜在治疗价值。方法 30只BALB/c小鼠随机均分为阳性对照组、Anti-IL-9 Ab组和地塞米松(Dex)组,建立小鼠哮喘模型,采取不同干预措施。比较各组血清、脾和骨髓细胞培养上清液细胞因子的含量。结果 Anti-IL-9 Ab组小鼠血清中 TH2细胞因子较阳性对照组明显降低(P<0．01),Dex组小鼠血清和脾细胞培养上清液中Th2、Th1细胞因子均较阳性对照组明显降低(P<0．01),两组骨髓细胞培养上清液细胞因子的含量较阳性对照组均无明显变化。结论 Anti-IL-9 Ab和Dex均能明显减轻哮喘小鼠的肺部炎症,在气道建立起新的Th1／Th2平衡。与Dex相比,应用Anti-IL-9 Ab建立的新平衡不会造成因细胞免疫功能受抑引起的一系列不良反应。

白介素1β单克隆抗体对癫痫致大鼠海马组织炎症反应的影响

目的观察白介素1β(IL-1β)单克隆抗体对氯化锂-匹罗卡品诱导的癫痫大鼠海马组织炎症反应的影响。方法将大鼠随机分为对照组、生理盐水+癫痫模型组(模型组)、IL-1β抗体治疗+癫痫模型组(单抗组),以氯化锂-匹罗卡品建立癫痫动物模型。采用蛋白质印记法检测海马组织中治疗抗体的浓度,RT-PCR检测海马组织中IL-1β、NF-κB mRNA表达水平,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中S100B水平,免疫荧光法检测海马区胶质细胞活化情况及尼氏染色检测神经元凋亡情况。结果 IL-1β单克隆抗体在海马组织中浓度>3.00μg Ab/g;与模型组比较,治疗组IL-1β、NF-κB表达水平均低于模型组(均P<0.01),血清中S100B蛋白水平明显下降(P<0.01),海马CA3区锥体细胞、神经元缺失情况、胶质细胞活化情况显著减轻(P<0.05)。结论 IL-1β单克隆抗体可能对癫痫导致炎症反应有抑制作用,其机制可能通过中和IL-1β、抑制IL-1β介导炎症信号转导通路而减轻炎症反应,这可能是IL-1β单克隆抗体减轻癫痫所致的神经损伤的机制之一。

定量检测重组抗白介素6受体人源化单克隆抗体HS628的ELISA方法的建立及确证

目的：建立一种灵敏、特异、快速、经济的ELISA方法,用于检测食蟹猴血清中重组抗白介素6受体人源化单克隆抗体HS628的含量。方法：对ELISA与生物素-亲和素ELISA（BA-ELISA）方法进行比较,最终采用BA-ELISA法对HS628进行定量。包被抗体为羊抗人Ig G单抗,以生物素标记的重组白介素6受体作为检测抗原,以HRP标记的链霉亲和素作为放大剂,最终用单组分显色液（TMB）显色。结果：建立了特异性检测HS628的ELISA方法并完成方法学确证,该方法的线性范围为1.64~400 ng/m L,灵敏度为1.64 ng/m L,精密度、准确度、回收率及稳定性符合要求,与对照品校正标准曲线吻合。结论：用建立的ELISA方法测定猴血清中HS628的含量能满足新生物制药临床前药代动力学研究指导原则要求,可用于HS628的检测。

抗人CA19-9单克隆抗体的制备和鉴定及化学发光检测体系的建立

目的制备抗人糖抗原19-9（CA19-9）单克隆抗体（mAb）,建立双抗体夹心检测CA19-9化学发光体系。方法 CA19-9免疫小鼠后,通过细胞融合技术,获得抗CA19-9的mAb。鉴定其抗体的纯度、效价、特异性和配对,建立双抗体夹心化学发光体系。在包被缓冲液、包被浓度及加样模式上优化化学发光体系,对该体系进行准确度、最低检测限、线性、重复性评估以及血清样本的检测。结果获得4株名称为#1-1、#2-1、#3-1和#4-1的mAb。抗体效价均大于10^-8,与CA125、CA15-3、CA72-4均无交叉反应。其中#3-1 mAb与#2-1-HRP建立的双抗体夹心体系经优化后,其检测范围为0~1 000 U/mL;最低检测限为2.0 U/mL;线性相关系数为0.9999。与罗氏试剂检测结果对比,Kappa系数大于0.75;相关系数大于0.9。结论成功制备了抗人CA19-9 mAb,建立了双抗体夹心检测CA19-9化学发光体系。

抗白细胞介素-8单克隆抗体乳膏治疗寻常型银屑病的临床研究

目的:观察新型抗白介素-8单克隆抗体乳膏外用治疗银屑病的疗效和安全性。方法:选取84例寻常型银屑病患者外用抗白介素-8单克隆抗体乳膏治疗8周,观察不良反应及皮损大小、颜色、肥厚、鳞屑等变化,以判断安全性和疗效。结果:治疗8周后,11例基本痊愈,41例显著改善,痊愈率和有效率分别为13.1%和61.9%;其中点滴型的痊愈率和混合状的有效率最高,而进行期的痊愈率和有效率均高于静止期;其中只有1例出现轻度不良反应。结论:抗白介素-8单克隆抗体乳膏治疗寻常型银屑病有较好的临床疗效和安全性。

白介素-17和抗-CCP抗体联合检测对类风湿关节炎活动度及骨侵蚀的预测价值

目的探讨联合检测白介素(IL)-17和抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体对类风湿关节炎(RA)活动度及骨侵蚀的预测价值。方法收集80例RA患者和30例健康体检者(健康对照组)的血液样本,应用ELISA检测血清IL-17和抗-CCP抗体,结合双手X线分期,分析RA患者与健康对照者之间,及RA早期与非早期,RA活动期与缓解期,RA骨侵蚀与非骨侵蚀之间IL-17、抗-CCP抗体的差异。结果 (1)RA患者的IL-17、抗-CCP抗体高于健康对照者,差异有统计学意义(P<0.05);(2)早期RA组与非早期RA组之间比较,IL-17、抗CCP抗体水平差异无统计学意义(P>0.05),RA活动组高于缓解组、骨侵蚀组高于非骨侵蚀组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 IL-17、抗-CCP抗体联合检测对类风湿关节炎活动度及骨侵蚀具有预测价值。

吉兰-巴雷综合征患者外周血清白介素2、干扰素α及抗体水平的检测

目的探讨白介素2(IL-2)、抗白介素2抗体(IL-2Ab)、干扰素α(IFN-α)和抗干扰素α抗体(IFN-αAb)在吉兰-巴雷综合征(GBS)患者病理免疫机制中的作用和意义.方法采用ELISA检测了50例GBS病人和30名健康人血清IL-2I、L-2Ab、IFN-α和IFN-αAb,并进行比较.结果GBS患者血清IL-2I、L-2Ab、IFN-α和IFN-αAb均比正常对照组明显升高.结论IL-2、IFN-α及其相应抗体可能参与了GBS的免疫病理过程,IL-2Ab和IFN-αAb可能作为中和性抗体对IL-2和IFN-α起负调节作用,且可能与疾病的自限有关.

白介素-6、核周型抗中性粒细胞胞浆抗体与抗酿酒酵母抗体在克罗恩病中的临床价值

目的探讨白介素-6(IL-6)、核周型抗中性粒细胞胞浆抗体(p ANCA)与抗酿酒酵母抗体(ASCA)在克罗恩病(Crohn’s disease,CD)中的诊断价值。方法共有CD患者67例,健康对照者30名。分别用间接免疫荧光法(IIF)测定p ANCA,酶联免疫吸附法(ELISA)测定IL-6和ASCA,计算各项指标在CD及其亚型中的灵敏度、特异度及阳性预测值,并进行统计学分析。结果 CD活动期患者血清IL-6水平显著高于缓解期及健康对照组,且与病情严重程度呈正相关。p ANCA在CD组与健康对照组中灵敏度差异无统计学意义(P>0.05)。ASCA、ASCA Ig A和ASCA Ig G在两组中阳性率差异均有统计学意义(χ2=16.58、5.69、14.09,P均<0.05),单项检测ASCA Ig A、ASCA Ig G,两种方法间差异无统计学意义(P>0.05)。联合检测IL-6、p ANCA和ASCA可以提高CD诊断的灵敏度、特异度和阳性预测值,对阳性率影响不大。CD各亚型中p ANCA、ASCA灵敏度组间差异均无统计学意义(P>0.05),两种抗体与病情严重程度无明显相关。结论促炎因子IL-6与CD病情进展相关,对CD的诊断和临床评估具有重要意义。ASCA可以作为CD诊断的一个重要血清学指标,而p ANCA对CD的诊断价值相对较小。

MMP-9单克隆抗体超微超顺磁性氧化铁粒子的合成并行ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化7.0 T MR成像的研究

目的:通过化学合成方法制作基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)单克隆抗体超微超顺磁性氧化铁(ultrasmall superparamagnetic iron oxide,USPIO)粒子MR分子探针,并探讨其作为MR特异性分子探针示踪剂使动脉粥样硬化成像的可行性。方法:采用EDC(1-ethyl-3-[3-dimethylaminopropyl]carbodiimide hydrochloride)化学连接剂将MMP-9单克隆抗体与DMSA[meso-2,3-dimercaptosuccinic acid,(HOOCCH(SH)-CH(SH)-COOH)]修饰的USPIO相结合,形成具有免疫学活性的MR分子探针。通过间接酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测其免疫活性及生物稳定性。采用高脂饲料喂养ApoE-/-小鼠结合机械损伤的方法,建立小鼠左侧颈动脉粥样硬化模型。将MR磁性粒子探针(Ab-MMP-9-USPIO)经小鼠尾静脉注射(45 mgFe.kg-1),分别于0、4、6、24、48 h对小鼠颈部行7.0 TMR扫描检查。结果:向0.05 mg的USPIO溶液中加入不同质量的单克隆抗体,ELISA试验所得的生成物MMP-9单克隆抗体超微超顺磁性纳米颗粒(Ab-MMP-9-USPIO)吸光度值随抗体含量增加而增大,与阴性对照USPIO组(未加单克隆抗体)相比较差异有统计学意义(P<0.05),分别间隔3 d及100 d后再次测量,100μg及200μg单抗组吸光度值降低(P<0.05)。经小鼠尾静脉注射磁性粒子探针后6 h,损伤侧颈动脉斑块管壁信号于T2WI像上降低最显著,管腔呈"假性扩大样"改变。结论:EDC化学方法可制备出单克隆抗体USPIO粒子,同时仍具有抗体的免疫学活性及生物稳定性。该合成物可以作为MR分子探针在体显像小鼠颈动脉粥样硬化斑块,为动脉粥样硬化斑块的分子成像提供了实验依据。

糖尿病周围神经病变患者血清抗神经节苷脂抗体与白介素-1、肿瘤坏死因子〆的关系

目的 :探讨 2型糖尿病周围神经病变 (DPN)血清抗神经节苷脂抗体 (anti- GS- ab)与细胞免疫之间的关系。方法 :受试者分为三组 :糖尿病无神经病变组 (DM组 ) ,DPN组 ,正常对照组 (N组 ) ,每组 30例。采用美国 Nicolet Viking 型肌电图仪测定神经传导速度 ,固相酶联免疫吸附法测定各组 anti- GS- Ig M- ab、anti- GS- Ig G- ab,同时观察白介素 - 1β(IL - 1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、一氧化碳 (NO)。结果 :DPN组 anti- GS Ig M- ab阳性率明显高于 N组和 DM组 ;IL - 1β、TNF- α水平显著增高。相关分析 ,DPN组 anti- GS Ig M- ab与 DPN的临床分级 (DPNC) ,IL- 1β、TNF- α和 NO呈显著正相关。结论 :anti- GS- ab的检测可作为一项了解 DPN自身免疫状况的免疫学指标 ,对 DPN的早期诊断 。

鸡β-防御素-9的融合表达及其多克隆抗体的制备与鉴定

为制备鸡β-防御素-9(AvBD9)多克隆抗体,本试验将AvBD9基因插入pGEX-6 P-1载体,构建重组基因pGEX6 P-AvBD9大肠杆菌表达质粒。将通过切胶纯化获得的表达产物包涵体谷胱甘肽转移酶-AvBD9(GST-AvBD9)融合蛋白免疫新西兰大白兔,制备抗AvBD9血清,并检测抗体效价。结果表明,经间接酶联免疫分析(ELISA)及蛋白质免疫印迹(Western blot)方法证实,获得的融合蛋白免疫新西兰大白兔得到了特异性的多克隆抗体,抗体效价为1∶38 400。

用单克隆抗体检测肿瘤标记CA19-9的临床研究

用单克隆抗体(MeAb)技术在医学各个领域的广泛应用，使肿瘤的免疫学诊断和病情监测出现新的飞跃，同时也发现一些新的肿瘤标记。本文综述用McAb检测近年来发现的肿瘤标记CA19-9的临床研究。