抗白色念珠菌鸡卵黄抗体(IgY)的研制

目的 观察鸡蛋黄中抗体的产量、纯度、来源及稳定性。方法 应用白色念珠菌作为抗原免疫 2 5周龄Leghorn鸡 ,通过改良水溶法 (WD)提取蛋黄中抗体IgY ,双紫外光测定抗体含量 ,SDS PAGE电泳检测抗体纯度 ,Westernblot免疫印迹法测定该抗体来源 ,ELISA检测热处理后的抗体活性。结果 抗体含量 13mg/ml蛋黄液 ,抗体纯度达到 95 % ,Westernblot免疫印迹证明该抗体与鸡血清中的IgG具有相同的分子量和抗原性。ELISA检测热处理后的抗体活性 ,其具有良好的热稳定性。结论 鸡蛋黄内含有丰富的抗体 ,通过WD水溶提取法可得到高产量 ,高纯度的特异性抗体IgY ,证明其来源于鸡血清中的IgG 。

抗白念珠菌鸡卵黄抗体的制备及温度对其效价的影响

目的:制备抗白念珠菌鸡卵黄抗体(IgY)并检测其生物学性能。方法:白念珠菌标准菌株10231灭活后作为抗原免疫25周龄产蛋海蓝鸡,从水溶法提取鸡卵黄IgY抗体。用考马斯亮蓝染色法测定IgY抗体提取液的蛋白浓度。用Tris-tric ine电泳测定提取蛋白的相对分子质量、纯度,W estern b lot确定蛋白来源。以免疫组织化学检验抗白念珠菌IgY抗体与白念珠菌结合的特异性。ELISA测定抗白念珠菌IgY抗体的抗菌效价。结果:IgY抗体液中蛋白浓度为7.9 g/L,IgY抗体的纯度达到91.5%。提取的IgY抗体与鸡血清和正常鸡IgY抗体具有同源性。提取的IgY抗体可与白念珠菌发生特异性结合。ELISA测定抗白念珠菌IgY抗体的效价达到1∶12 000。结论:研究得到的IgY,产量和纯度高,效价好,体温条件下48 h效价没有降低。在体外能够特异性地与白念珠菌结合。

抗鸡念珠菌卵黄抗体的研制及应用

本试验以龙岩某肉鸡场发病鸡嗉囔中分离得到的念珠菌作为免疫抗原,免疫25周龄产蛋鸡.经效力检验合格后,试制成抗鸡念珠菌卵黄抗体液.抑菌活性试验表明:效价为5 log2以上的高免卵黄表现出明显的抑菌活性,完全抑制了念珠菌的生长和繁殖.用抗鸡念珠菌卵黄抗体液分别喂服20日龄肉鸡和100日龄孔雀.结果表明:试验组鸡群嗉囔和咽喉念珠菌检出率较对照组显著降低(P<0.05);平均日采食量和日增重较对照组分别提高了80%和400%,死亡率则下降了7%.对孔雀的治疗效果与常规药物CuSO4相当.

卵黄抗体对鸽毛滴虫与白色念珠菌感染的治疗效果

旨在研究鸽毛滴虫与白色念珠菌二联卵黄抗体制备方法和评价其临床效果。利用临床分离的白色念珠菌与毛滴虫制备二联灭活疫苗,免疫产蛋母鸡获得高水平抗体,采取低温冻干技术制备成卵黄抗体粉。建立ELISA抗体检测法测定卵黄抗体水平,确保质量可控;以分离的肉鸽毛滴虫、白色念珠菌制备发病模型,评价卵黄抗体的保护效果。结果表明:二次免疫后,卵黄中毛滴虫抗体和白色念珠菌抗体OD值达到高峰,分别为0.90和0.66,抗体维持时间达到2个月。卵黄抗体按1 g·只^(-1)口服饲喂5 d后,肉鸽口腔和嗉囊病变评分与感染对照组相比显著降低(P<0.05),与甲硝唑、制霉菌素无差异;此外,毛滴虫、白色念珠菌病原载量极显著降低(P<0.01)。研制的鸽毛滴虫与白色念珠菌二联卵黄抗体可以替代甲硝唑和制霉菌素,为肉鸽的健康养殖提供一种新的抗菌素替代产品。

抗白色念珠菌IgY的稳定性与应用研究

目的 观察抗白色念珠菌鸡蛋黄抗体IgY的稳定性与体外生物学效应。方法 用水溶法从免疫鸡蛋黄中提取抗白色念珠菌抗体IgY ,ELISA法检测抗体耐热、耐酸、耐碱的稳定性 ,观察IgY抑制白色念珠菌生长和抑制白色念珠菌粘附肠上皮细胞(IEC 6)。结果 IgY在巴氏消毒后活性为对照的 61 % ,在pH 7 0至 3 0酸性环境中活性改变不显著 ,在pH 7 9,37℃作用 1 50min活性仍为对照的 60 %。IgY在 1 0mg/ml时能明显抑制白色念珠菌生长和对肠上皮细胞的粘附 ,明显降低细胞上清二胺氧化酶(DAO)释放。结论 鸡蛋黄抗体IgY具有高度稳定性和良好的体外生物学效应。

鸡抗鸭病毒性肝炎(DVH)高免卵黄抗体的研制

应用雏鸭肝炎病毒 (DHV)鸡胚化弱毒株 (BAU株 )和DVH油乳剂苗免疫鸡制备了高免卵黄抗体。通过实验室试验及临床应用 ,表明卵黄抗体治DVH的疗效取决于卵黄抗体的中和效价及治疗的时间。卵黄抗体的中和效价应达2 8.5以上 ,并且在感染DHV 2 4h以内对雏鸭进行肌肉注射 。

鸡抗内毒素卵黄抗体IgY的制备

目的 研究分别应用内毒素 (LPS)、类脂A(LipidA)和大肠杆菌突变株J5免疫鸡后其蛋黄中抗内毒素抗体IgY的产量、纯度、效价并筛选最佳免疫抗原。方法 分别应用内毒素 (LPS)、类脂A(LipidA)和大肠杆菌J5突变株作为抗原免疫 2 5周龄Leghorn鸡 ,水溶法 (WD)提取蛋黄中抗体IgY ,双紫外光测定抗体含量 ,SDS PSGE电泳检测抗体纯度 ,细菌酶联染色和ELISA检测抗体特异性、效价及筛选最佳免疫抗原。结果 3种抗内毒素IgY含量和效价分别为 14 4mg ml和 1∶12 80 0 (J5 )、10 61mg ml和 1∶12 80 0(LPS)、9 2 6mg ml和 1∶3 2 0 0 (LipidA) ,抗体纯度均为 95 %左右。结论 大肠杆菌突变株J5和内毒素 (LPS)为最佳免疫抗原 ,免疫鸡后其蛋黄中抗内毒素抗体IgY的产量和效价最高。

鸡抗鸭病毒性肝炎高免卵黄抗体的研制及应用

应用雏鸭病毒性肝炎病毒(DHV)弱毒疫苗和DHV油乳剂灭活苗多次免疫产蛋鸡,制备鸡抗鸭病毒性肝炎高免卵黄抗体,自制鸭病毒性肝炎病毒高免卵黄抗体的疗效取决于卵黄抗体的中和效价及治疗的时间。实验室试验及临床应用结果表明,卵黄抗体的中和效价应达28以上,并且在感染DHV24h以内对雏鸭进行肌肉注射,治疗效果最为理想。

外源卵黄抗体在鸡血清中衰减规律的研究

自发现卵黄抗体以来,鉴于其来源便捷,提取简单,许多学者在生物领域进行了广泛的研究应用,其优点也得到了充分的肯定。随着人民生活水平的提高,对食品安全的要求越来越严格。多年来兽药使用不规范导致的药物残留和耐药性问题迫使人们重新审视如何有效合理的防治动物疾病。国内外抗病毒药物及抗生素的限制使用范围逐步扩大，抗病毒药物替代品的研究日益受到重视，成为亟待解决的问题…。卵黄抗体的生产成本低、产量大、绿色无残留污染等优点为畜牧业的绿色生产带来了希望。市场上鸡法氏囊卵黄抗体和鹅小鹅瘟卵黄抗体都取得较好疗效心’，为临床治疗、动物保健、饲料添加剂等提供了新的解决途径。资料显示针对卵黄抗体的研究多集中在提取方法和临床效果方面，而对于注射卵黄抗体后在体内的衰减规律未见报道。因此，本研究在注射卵黄抗体后不同时间测定血清抗体效价，揭示抗体的衰减规律，为临床更好地利用卵黄抗体治疗疾病提供理论依据。

鸡抗猪大肠杆菌血清抗体和卵黄抗体消长规律及其相互关系的探讨

用猪源大肠杆菌单价(K88)与三价(K88、K99、987P)灭活疫苗分别免疫产蛋母鸡,定期检测母鸡血清和卵黄的抗体效价。结果表明,两种疫苗免疫母鸡的卵黄抗体和血清抗体的消长规律基本一致,但前者比后者上升和下降期有所滞后;血清抗体水平比卵黄抗体水平平均约高21 8以上,两者间的差异极显著(P<0 01)。

抗白色念珠菌特异性免疫

白色念珠菌是常见的条件致病菌 ,辅助性T淋巴细胞激活亚群类型决定机体抗白色念珠菌的特异性细胞免疫 ,当Th1细胞激活 ,机体对白色念珠菌有抵抗力 ,而当Th2细胞激活 ,机体对白色念珠菌易感。IFN γ、IL 2、IL 12等细胞因子增强机体对白色念珠菌的抵抗力 ;而IL 4、IL 10等细胞因子则相反。

鸡抗猪产肠毒素性大肠杆菌卵黄抗体的应用

产肠毒素性大肠杆菌与仔猪腹泻的致病过程密切相关。卵黄抗体具有价格便宜、制作简单等优点,能降低腹泻的发生率和严重程度,是防治仔猪大肠杆菌性腹泻的一种新方法。本文就国内外鸡抗猪产肠毒素性大肠杆菌卵黄抗体的应用作了简要介绍。

特异性抗白色念珠菌IgY泡腾片

本发明公开了一种特异性抗白色念珠菌IgY泡腾片。即应用特异性抗白色念珠菌IgY（抗体效价〉1：2600）制备一种起效迅速、生物利用度高、局部抗菌效果好．且携带使用方便的阴道泡腾片。

IgY防治SPF小鼠白色念珠菌感染的研究

目的 :观察自制的抗白色念珠菌鸡蛋黄抗体IgY体内生物学效应。方法 :建立SPF小鼠烧伤后口服白色念珠菌(白念菌 )感染模型 ,应用活菌计数方法检测其回肠膜粘附白念菌量、盲肠内容物白念菌量 ,应用ELISA检测血浆肿瘤坏死因子 (TNFα)和二胺氧化酶 (DAO)含量。结果 :烧伤SPF小鼠喂服IgY后 ,能明显抑制肠道内白念菌生长和白念菌粘附肠上皮细胞 ;明显降低小鼠血浆中DAO和TNFα含量。结论

抗HLA-A~*0201重链卵黄抗体的制备及初步鉴定

目的制备高效价特异性鸡卵黄免疫球蛋白(Yolk immunoglobulin,IgY)抗体。方法用纯化HLA-A*0201重链抗原加完全福氏佐剂免疫岭南黄鸡,经水稀释法初步纯化浓缩后,用ELISA鉴定其免疫学活性,测定纯化后蛋白含量,并用SDS-PAGE进行分析鉴定。结果获得ELISA效价为1×106的抗重链IgY抗体,蛋白含量为9.77 mg/ml。经SDS-PAGE分析,出现2条蛋白带,纯度达90%以上。结论用重链抗原加福氏佐剂免疫种鸡制备的IgY抗体产量多、效价高,为结合HLA-A*0201复合体诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞活化奠定了基础。

卵黄抗体用于大山区血吸虫病诊断的可行性

目的评价卵黄抗体(anti-SEA chicken egg yolk antibody,IgY)用于血吸虫病诊断在大山区型血吸虫病流行现场的应用效果。方法对大山区血吸虫病流行区的506位居民进行粪检,同时用IgY(以IgY作为捕捉抗体,以酶标NP28-5B为检测抗体)和血吸虫抗体ELISA检测试剂盒(SEA-ELISA)分别对其血清进行检测,评价anti-SEA IgY的敏感性,分析其用于大山区血吸虫病诊断的可行性;同时检测非流行区的200份血清确定其特异性。结果 IgY和SEA-ELISA的粪检阳性符合率分别为92.68%(152/164)和89.02%(146/164);两者的特异性分别为99%(198/200)和95%(190/200),差异无显著性(P均>0.05),但在粪孵阴性人群血清样本中,IgY和SEA-ELISA的检出率分别为31.00%(106/342)和83.63%(286/342),差异有显著性(P<0.05)。结论 anti-SEA IgY可用于大山区血吸虫病诊断。