小檗碱抗白血病的药理作用及其机制研究进展

小檗碱具有抗炎、抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗高血压、降血糖等广泛的药理作用。此前,小檗碱的抗肿瘤研究主要集中在抗肝癌、抗泌尿系统肿瘤、抗妇科肿瘤等方面,鲜少有人整理小檗碱的抗白血病作用及其药理机制。本文主要以小檗碱对K562细胞、HL-60细胞、Jurkat细胞、Molt-4细胞、U937细胞、THP-1细胞的药理作用及其机制为切入点,综述和分析了小檗碱的抗白血病作用及其机制。

树突状细胞介导的抗白血病效应的临床研究

肿瘤的免疫治疗作为恶性肿瘤综合治疗的重要组成部分,近年来受到了广泛的关注。树突状细胞(DC)是已知的功能最强的抗原呈递细胞,不仅能够激活自体的抗肿瘤免疫,同样能够提高异体免疫组织的抗肿瘤效应。为了探讨外周血来源的DC体外培养扩增和临床治疗的可行性和安全性,分析DC免疫治疗对于急性非淋巴细胞白血病自体骨髓移植患者长期生存的影响,利用CS3000Plus采集13例急性非淋巴细胞白血病自体骨髓移植后的病人的外周血单个核细胞,经过2周的体外培养后行DC免疫治疗,治疗后长期随访观察其无病生存时间。结果表明,无一例发现有与DC免疫治疗相关的严重不良反应;KaplanMeier生存分析结果为:DC组5年生存率为75.52%,非DC组5年生存率为45.71%,DC组在累计生存率上明显优于非DC组。结论:外周血来源的DC体外培养和临床治疗是安全可行的,急性非淋巴细胞白血病病人在自体骨髓移植术后应用DC免疫治疗延长了其无病生存时间,提高了长期生存率。

抗白血病中药及天然药物的研究现状

抗白血病中药及天然药物的研究现状陈婷梅，祝彼得迄今用于白血病临床的化疗药物包括烷化基、抗代谢药、抗生素及激素和杂类等，这些药物副作用较强，且对起重要防御作用的淋巴细胞、骨髓造血细胞的破坏较大，使机体对癌、感染失去抵抗力，临床上白血病患者死于肺炎、败血...

新会柑皮中抗白血病主要成分的鉴定

本实验采用ＧＣ／ＭＳ分离、鉴定新会柑皮抗小鼠髓性单核细胞性白血病提取物中的５种成分，即化合物I为４'，５，６，７，８－五甲氧基黄酮，化合物Ⅱ为４'，５，７，８－四甲氧基黄酮，化合物Ⅲ为５－羟基，３’，４’，６，７，８－五甲氧基黄酮，化合物Ⅳ为３’，４’，５，６，７，８－六甲氧基黄酮，化合物Ｖ为３’，４’，５，７，８－五甲氧基黄酮。这与ＰＭＲ谱和ＵＶ谱分析相符。其中化合物Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ抑制白细胞生长 ５０％所需的浓度分别为 ２．９，２．５，２．８ ｍｇ／Ｌ。

白介素21对树突状细胞诱导的CTL抗白血病作用的影响

本研究探讨白介素21(IL-21)对树突状细胞(DC)诱导的CTL抗白血病的体外作用。以不同细胞因子诱导培养急性白血病(AL)患者缓解期外周血单个核细胞产生DC,自体AL细胞RNA作为抗原负载DC,与自体T淋巴细胞共培养诱导白血病特异性CTL产生;用LDH释放法检测CTL杀伤自体AL细胞的作用,并检测CTL产生IFN-γ和TNF-α的变化。实验共分2组:实验组,在DC-CTL共培养过程中加用IL-21(200ng/ml);对照组,不加IL-21。同时对IL-21单独作用培养后成熟DC,检测其表面抗原表达变化以及诱导同种混合淋巴细胞反应能力。结果表明:对照组和实验组的CTL产生率分别为:(56.73±10.21)%,(73.43±18.01)%(p<0.01);培养上清中IFN-γ和TNF-α分别为:(154.91±67.20)ng/L,(310.62±141.15)ng/L(p<0.01)和(8.77±5.09)μg/L,(15.25±6.56)μg/L(p<0.01)。在效靶比为20∶1时,两组对自体AL细胞的杀伤作用分别为(50.22±5.07)%,(75.38±9.47)%(p<0.01);IL-21作用后的成熟DC的CD1a、CD83、CD86、CD80和HLA-DR表达没有明显变化;诱导同种混合淋巴细胞反应能力亦没有明显不同。结论:IL-21可促进DC诱导的CTL增殖、增加IFN-γ和TNF-α产生从而增强其抗白血病作用;IL-21对成熟DC表面抗原表达及其免疫功能无明显影响;提示IL-21在白血病免疫治疗中发挥一定的作用,具有潜在的临床应用价值。

黄芩提取化合物单体SBX抗白血病效应及机制研究

本研究探讨黄芩提取化合物单体成分SBX对不同人白血病细胞株的抗白血病效应及其可能的相关机制。体外培养人HL-60、NB4、U937、K562、Jurkat细胞,应用CellTiter-Glo发光法进行细胞活力检测,筛选出敏感细胞株,应用流式细胞术检测SBX对敏感细胞细胞周期的影响,应用蛋白Pathway Array技术检测SBX对敏感细胞蛋白表达的影响。结果显示,SBX(10-200μmol/L,72 h)对各种类型的人白血病细胞均有抑制作用,并呈浓度依赖性(r值分别为0.86,0.88,0.95,0.94,0.96),对HL-60细胞抑制作用最强。流式细胞术显示SBX(50,100μmol/L,48h)对HL-60细胞周期的影响主要是引起G0/G1期阻滞。蛋白Pathway Array技术分析SBX(50μmol/L,48 h)对HL-60蛋白表达的影响显示,p-PKCα/βⅡ、p-p38、Cdc25B、XIAP蛋白表达水平上调,而p-AKT、p-SAPK/JNK、cyclin E、Notch4、Cdk4、Cdc2、Akt、Bcl-2、Bax、cdc42、TNF-α、p27、CaMKKa蛋白表达水平下调。结论:SBX能够抑制各种类型人白血病细胞的增殖,其中敏感细胞株为HL-60。SBX主要影响HL-60的EGFR、Ras/Raf/MAPK和Notch信号传导通路,并通过这些信号传导通路影响细胞周期相关蛋白表达的水平,导致细胞周期G0/G1期阻滞。

金针菇多糖对小鼠抗肿瘤及抗白血病效应的实验研究

目的 研究金针菇多糖 (FVP)对荷瘤小鼠的抑瘤率和对白血病小鼠生存期的影响 ,并探讨其抗肿瘤机理。方法 以小鼠肉瘤 (S180 )、小鼠肝癌 (H2 2 )瘤株及小鼠网状细胞白血病 (L615)瘤株造模 ,设空白对照、正常对照、给药 (高、低剂量 ) 4组 ,分别考察金针菇多糖对各组小鼠抑瘤率和生存期的影响。结果 金针菇多糖对S180 、H2 2 小鼠的抑瘤率分别为 5 0 .6 9%、4 1.4 6 %以上 ;对L615白血病小鼠生命延长率达到 5 3.2 4 %以上。结论 金针菇多糖是抗肿瘤、抗白血病的有效物质 ,可干扰肿瘤细胞的有丝分裂过程和提高机体免疫力。

Survivin致敏的树突状细胞疫苗激活抗白血病T细胞的实验研究

为研究survivin致敏树突状细胞 (DC)疫苗对特异性T细胞的激活影响及对白血病细胞生长抑制作用 ,采用共聚焦显微镜及免疫沉淀 Western印迹等方法检测急性白血病细胞survivin表达 ;外周血单个核细胞体外培养 ,诱导DC细胞的形成 ;体外进行survivin抗原负载 ,制备survivinDC疫苗 ;survivinDC激发同基因型T细胞 ,用流式细胞术进一步分析T细胞表型 ;3H TdR法测定刺激指数 (SI) ;并用51 Cr释放法测定特异性的抗白血病CTL细胞毒活性。结果表明 ,检测 19例初治急性白血病患者survivin的表达率为 84 .2 % ;其荧光分布均在细胞胞浆内 ;免疫沉淀 Western印迹进一步分析证实其survivin蛋白表达 ;外周血单个核细胞体外诱导形成的DC细胞具有典型DC的形态学特征 ;survivinDC可显著刺激T细胞的活化增殖 ;survivinDC激活的T细胞中 ,CD4 + TH 比例显著较DC组高 ,DC激发的T细胞则以表达CD8和CD5 6为主 ;同时survivinDC显著抑制白血病细胞的生长。结论 :急性白血病细胞表达survivin抗原 ,利用survivinDC疫苗可有效地抑制白血病细胞的生长 。

中药有效成分抗白血病机制研究进展

白血病是国内十大高发恶性肿瘤之一,其恶性程度高,进展快,预后差。目前尚无特异性治疗方法,化疗能有效缓解症状,延长生存期,但存在＂敌我不分＂的情况,常引起较大的不良反应且耐药现象时有发生。靶向药物如伊马替尼治疗BCR/ABL融合基因阳性的慢性粒细胞白血病有显效,但尚无证据显示其可缩短患者发展至加速期的时间,且昂贵的价格给病患家庭和社会带来沉重的负担,故寻找新的更有效的治疗方法和药物已成为当前白血病治疗研究的当务之急。

G-CSF诱导移植物抗白血病效应治疗异基因造血干细胞移植后复发白血病的临床研究

目的探讨粒细胞集落刺激因子（G-CSF）诱导移植物抗白血病效应治疗异基因造血干细胞移植后复发白血病的临床有效性和安全性。方法选取2011年7月至2013年2月在北京军区总医院血液科行异基因造血干细胞移植后复发的白血病患者40例,其中急性淋巴细胞白血病二次缓解10例、急性髓系白血病二次缓解16例、急性髓系白血病三次缓解4例、混合细胞白血病6例,加速期慢性髓系白血病4例,予G-CSF动员后,供者外周血单个核细胞输注,每次输注细胞量逐级增加,每次输注间隔4周。观察供者输注外周血单个核细胞的疗效,并随访并发症情况。结果再次完全缓解24例,未缓解16例。输注后,发生Ⅰ--Ⅱ度急性移植物抗宿主病6例,慢性移植物抗宿主病29例,未发生并发症5例。结论 G-CSF诱导移植物抗白血病效应治疗对白血病复发有较好的疗效,不良反应小。

去甲斑蝥素抗白血病作用──细胞毒作用

用体外细胞培养技术和３Ｈ－胸腺嘧啶核苷（３Ｈ－ＴｄＲ）释放法检测去甲斑蝥素对人早幼粒白血病细胞林ＨＬ－６０的细胞毒作用。结果显示，去甲斑骛素对ＨＬ—６０细胞的细胞毒作用存在着浓度、时间依赖关系。

多药耐药K562/A02和敏感K562细胞来源的树突状细胞介导抗白血病效应对比研究

本研究探讨多药耐药(MDR)白血病K562/A02细胞和敏感K562细胞诱导树突状细胞(DC)分化及介导的抗白血病效应。采用慢性粒细胞白血病(CML)P170糖蛋白(Pgp)高表达的MDRK562/A02细胞、敏感K562细胞在含细胞因子GMCSF(1000U/ml)、IL4(500U/ml)和TNFα(100ng/ml)的RPMI1640完全培养液中诱导分化成DC,以光镜观察细胞形态、流式细胞术检测细胞表型,异基因混合淋巴细胞反应(alloMLR)检测T细胞增殖活性,MTT法测定细胞毒作用。结果表明:培养14天的K562/A02细胞和K562细胞均出现典型的DC形态特征,表达DC的相关分化抗原及共刺激分子CD1a、CD83、HLADR、CD80、CD86。alloMLR检测中,K562/A02DC较K562DC具有更强的刺激异基因T细胞增殖能力(P<0.05)。两种DC激活的CTL分别对K562/A02和K562细胞较HL60细胞具有显著的杀伤活性(P<0.01);更重要的是,K562/A02DC较K562DC激活的CTL对Pgp高表达的MDRK562/A02细胞、HL60/VCR细胞具有更强的细胞毒作用,杀伤活性分别为(40.7±1.3)%、(28.4±0.9)%(P<0.01)和(24.9±1.1)%、(8.2±0.7)%(P<0.01)。结论:Pgp高表达的MDR白血病细胞K562/A02和敏感K562细胞都可在GMCSF、IL4和TNFα作用下诱导分化为成熟DC,均可活化CTL产生特异的抗白血病效应;尤其K562/A02细胞来源的DC可介导针对Pgp高表达的多药耐药白血病的特异细胞毒作用。

CD14^+单核细胞系白血病细胞来源树突细胞体外刺激特异抗白血病T细胞应答(英文)

背景与目的:白血病细胞能在体外分化为树突细胞(dendriticcells,DCs),从而有希望用于白血病的免疫治疗。本研究旨在探讨CD14高表达的单核细胞系白血病(M4、M5)细胞分化而来的DCs体外诱导抗白血病T细胞应答的能力。方法:取5例初诊CD14高表达的M4或M5型白血病患者的骨髓标本,分离单个核细胞(bonemarrowmononuclearcells,BMMNCs),将白血病细胞分为3组:贴壁白血病细胞组、非贴壁白血病细胞组及总白血病细胞组。流式细胞术(flowcytometry,FCM)比较3组细胞的CD14表达。用含GM-CSF、IL-4和TNF-α或不含细胞因子的培养液培养细胞7～10天后,通过细胞形态学观察及FCM检测细胞表型,鉴定单核白血病细胞来源的DCs(monocyticleukemiacell-deriveddendriticcells,Mo-LDCs);采用异基因混合淋巴细胞反应(allogeneicmixedlymphocytereaction,Allo-MLR)以及细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxicTlymphocytes,CTL)抗白血病细胞毒分析检测Mo-LDCs的免疫功能,染色体核型分析结合异常表面抗原确定Mo-LDCs的白血病来源。结果:3组中贴壁白血病细胞的CD14含量最高,在细胞因子联合诱导下,可分化为大量CD83+成熟DCs。在同一病例的3组细胞以及不同病例的总单核细胞组间,培养前CD14的表达率与诱导后CD83+DCs的产率成正相关(r=0.967,P=0.007)。Mo-LDCs具有典型的成熟DCs的形态及表型特征,在Allo-MLR中能刺激同种T细胞明显增殖,并能刺激扩增特异性抗白血病CTL。同时,Mo-LDCs持续存在所起源白血病的核型异常和异常表达的髓系抗原。结论:在细胞因子组合诱导下,M4、M5亚型AML的CD14+细胞可分化为具有免疫功能的Mo-LDCs,单核系白血病细胞的CD14表达高低可能预示其DCs分化能力。Mo-LDCs具有经典的DCs的表型及功能,还具有白血病的克隆异常,可用于M4、M5患者的免疫治疗。

FasL基因修饰树突状细胞的抗白血病作用及其机制

目的:选择性去除骨髓移植物中异基因反应性淋巴细胞,特异性抑制移植物抗宿主病(graft versus host disease,GVHD)并保留移植物的抗白血病(graft versus leukemia,GVL)作用。方法:分别把未经处理的、溶T淋巴细胞处理的和以FasL基因修饰树突状细胞(FasL-DC)处理的3组小鼠骨髓细胞移植物移植给已经接种P815肿瘤细胞的BALB/c受体小鼠,然后观察比较各组小鼠存活情况,并用51Cr释放法检测移植后2个月受体小鼠T淋巴细胞的CTL活性。结果:致死剂量(9Gy)照射的白血病受体鼠在接受经FasL-DC处理的供体骨髓细胞移植后,生存期显著延长,2个月时生存率为40%,对照组在1个月内全部死亡。51Cr释放法检测证实,FasL-DC处理组的T淋巴细胞对P815细胞保持较强的杀伤活性。结论:转染FasL基因的DC可有效去除骨髓移植物中异基因反应性T淋巴细胞,移植用该方法处理过的骨髓,不但能够有效抑制GVHD的发生,同时也可以保留移植物的抗肿瘤作用。

姜黄素抗白血病作用及其机制的研究进展

姜黄素是从姜科姜黄属植物姜黄中提取的一种多酚类化合物,具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等药理作用,因具有效果显著、安全性高等特点,正受到国内外广泛关注,本文综述了近年来姜黄素的抗白血病作用及其机制。

不成熟CD8α^+ DC经同种白血病抗原冲击后移植物抗白血病效应的体外研究

目的:观察不成熟CD8α+树突状细胞(DC)体外经同种异基因白血病细胞全抗原冲击后的移植物抗白血病(GVL)效应。方法:C57BL/6(H-2b)小鼠的骨髓细胞以GM-CSF+IL-4+SCF+Flt3L体外诱导不成熟CD8α+DC,第3 d加入0 mg/L、2.5 mg/L、5 mg/L、10 mg/L和20 mg/L BALB/c(H-2d)小鼠来源的同种异基因EL9611红白血病细胞抗原冲击,冲击后DC与同系(H-2b)T细胞按DC/T 1∶1、2∶1、4∶1比例共培养,MTT法观察T细胞增殖情况,ELISA法检测上清中IFN-γ和IL-10的含量,LDH释放法检测T细胞对EL9611细胞的杀伤活性。以成熟DC为对照,观察同种异基因不成熟CD8α+DC体外对EL9611白血病细胞的GVL效应。结果:同种红白血病全抗原冲击后不成熟CD8α+DC可有效刺激同系T细胞增殖,作用随DC/T比例增加而增加,增殖效应在小剂量抗原(≤5 mg/L)冲击时更明显(P<0.05);Ag冲击后不成熟CD8α+DC刺激T细胞分泌IFN-γ和IL-10明显增高(P<0.05),IL-10的分泌与不成熟CD8α+DC发挥GVL效应存在一定的负相关关系,Ag冲击浓度较低而IL-10分泌少时,T细胞增殖活性较强。杀伤实验结果显示,白血病特异性T细胞对EL9611靶细胞的杀伤活性随抗原冲击浓度的增加而升高,浓度为2.5 mg/L时,杀伤率即可达90%,非特异性杀伤实验显示白血病特异性T细胞对同种异基因正常脾细胞的杀伤活性低于对照组(P<0.05),表明杀伤作用为抗原特异性杀伤,对正常细胞无明显杀伤。结论:经同种异基因白血病抗原冲击后不成熟CD8α+DC体外能刺激同系T细胞产生一定的GVL效应。

DC细胞刺激γδT细胞的抗白血病作用

目的研究γδT细胞的体外生存期和抗白血病活性。 方法对外周血采集物用GM -CSF +IL -4进行培养 ,使其分化和扩增为树突状细胞 (dendriticcells,DC) ;然后用DC和细胞因子IL - 2刺激其CD4 + T细胞扩增后 ,协同DC共同刺激γδT细胞扩增 ,再与多种白血病细胞株进行混合培养 ,进而用MTT比色法研究抗白血病能力。 结果γδT细胞能在体外长期大量扩增。扩增的γδT细胞对多种白血病细胞株具有杀伤作用。