红花水煎液内服对硬皮病小鼠皮肤RORγt表达的影响

目的:观察红花水煎液对硬皮病小鼠皮肤RORγt表达的影响,探讨红花抗SSc皮肤纤维化的免疫机制。方法:将32只BALB/C小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、醋酸泼尼松组、红花组,每组8只。除空白对照组外,其余3组注射博来霉素缓冲液诱导硬皮病模型,同时予生理盐水(空白对照组和模型对照组)、醋酸泼尼松(醋酸泼尼松组)、红花水煎液(红花组)灌胃处理28 d。取小鼠皮肤,苏木素-伊红染色测真皮厚度及评价皮肤炎症程度;免疫组化法、蛋白质印迹法检测皮肤RORγt的蛋白表达水平。结果:各造模组小鼠皮肤均有不同程度增厚,炎性细胞浸润,炎症评分、RORγt蛋白表达均不同程度升高,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型对照组比较,醋酸泼尼松组和红花组小鼠真皮厚度及皮肤炎症评分、RORγt蛋白表达下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。与醋酸泼尼松组比较,红花组真皮厚度降低,差异有统计学意义(P<0.05),皮肤炎症评分及RORγt蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:红花水煎液能降低硬皮病小鼠皮肤RORγt蛋白表达,抑制免疫炎症反应而具有抗皮肤纤维化的治疗作用。

加味阳和汤对硬皮病小鼠皮肤β-Catenin表达的影响

目的观察加味阳和汤抗硬皮病皮肤损伤的可能机制。方法雌性BALB/c小鼠40只,随机分为正常组、空白组各8只,造模组24只。正常组不注射,空白组予背部皮下注射生理盐水0.1 mL,造模组小鼠皮下注射浓度为500μg/mL的博莱霉素0.1 mL/d,连续4周,制备硬皮病模型。造模成功后随机分为模型组、阳和汤组、地塞米松组各8只。各组分别予生理盐水(空白组和模型组)、加味阳和汤(阳和汤组)、地塞米松(地塞米松组)灌胃,4周后取皮肤组织,行HE染色,PCR和Western blot分别检测小鼠皮肤β-Catenin的m RNA及蛋白表达量。结果治疗后,小鼠皮肤HE染色与正常组比较:空白组无明显差异;模型组真皮层增厚,排列紊乱,皮下脂肪层变薄;阳和汤组真皮层稍变薄,胶原纤维束排列较疏松,皮下脂肪层稍变薄。与正常组比较,模型组β-Catenin m RNA及蛋白表达水平上调,P-β-Catenin蛋白表达水平下调(P<0.05);与模型组比较,阳和汤组和地塞米松组β-Catenin m RNA及蛋白表达水平下调,P-β-Catenin蛋白表达水平上调(P<0.05)。结论加味阳和汤能降低硬皮病小鼠皮肤β-Catenin m RNA及蛋白表达,从而起到抗皮肤纤维化的治疗作用。