四烯类抗真菌抗生素效价测定方法的改进

目的对四烯类抗真菌抗生素的效价含量测定方法进行改进,提高方法的可靠性与可操作性。方法管碟法。改进培养基pH 6.0~6.2;pH 6.0磷酸盐缓冲液;检定菌为啤酒酵母菌(ATCC9763);培养温度为30℃±2℃;培养时间为(20±2)h;抗生素浓度范围为10~50 U/mL;可信限率(FL%)为不得大于5%。结果抑菌圈大小符合规定,边缘清晰可以使用仪器进行测量;制霉菌素、制霉素分别在9.45~56.34 U/mL和8.43~50.23 U/mL浓度范围内线性良好,回归方程分别为y=0.08854x+1.31343(R2=0.99978)和y=0.10454x+1.28875(R2=0.99843);重现性与重复性好[日内精密度分别为1.95%(n=6)和1.95%(n=6),日间精密度分别为1.83%(n=12)和1.84%(n=12)]。结论改进方法可以作为四烯类抗真菌抗生素及其制剂的常规质量控制方法。

抗真菌抗生素高产菌株的推理选育及其发酵调控研究

探讨海洋霉菌Ｍ１８２菌株对自身次生代谢产物－抗真菌抗生素Ｍ１８２Ａ抗性与该抗生素产量的关系；通过亚硝基胍、亚硝基胍加紫外线复合处理，选育到对该抗生素抗性有明显提高和抗生素发酵相对效价提高到２４４％的高产突变菌株．稳定性实验表明该突变株遗传稳定性良好．在液体发酵中，利用天然有机营养物质发酵效果优于合成化合物．

金属离子对黄柄曲霉生长和抗真菌抗生素合成的影响

不同的金属离子对兼性海洋霉菌黄柄曲霉 1 79的生长有不同的影响。在 0 0 0 2mol/L的浓度下 ,Hg2 +、Ag+和Cr3+能强烈抑制该菌的生长 ,Pb2 +、Sr2 +、Co2 +、Al3+对其生长有一定的抑制 ,生长量低于对照 ;Mn2 +、Ba2 +、Zn2 +对其生长没有明显影响 ;Cu2 +对该菌的生长有微弱的促进作用 ,菌体生物量略高于对照 ;不同的金属离子对曲霉 1 79抗真菌抗生素 1 79M合成有不同的影响。与对照相比 ,Ba2 +对其产量没有影响 ;Al3+、Zn2 +、Sr2 +有一定的抑制作用 ,其发酵相对效价分别为对照的 81 4%、 5 5 5 %和 6 5 %;0 0 0 2mol/L的Mn2 +和Pb2 +能强烈抑制此抗生素的合成 ,在添加 0 0 0 2mol/LMn2 +和Pb2 +的培养基中 ,虽然菌体生长良好 ,但无 1 79M产生 ;Co2 +和Cu2 +则有明显的促进作用 ,当培养基中添加0 0 0 2mol/L的Co2 +时其发酵相对效价提高到 2 6 1 4%;当培养基中添加 0 0 0 3mol/L的Cu2 +时其发酵相对效价提高到 3 5 0 2 %。Co2 +和Cu2 +对发酵的促进效应是相互拮抗的。

微生物来源的抗真菌抗生素研究进展

新的微生物来源的抗真菌抗生素不断涌现。本文就近 2年来研究及开发或进行临床试验的化合物 ,依据它们作用的靶向部位不同 ,按真菌细胞膜、细胞壁以及蛋白质合成

多轮复合诱变选育抗真菌抗生素高产菌株及其发酵条件研究

对抗真菌抗生素 Terreic acid- 179M(简称 179M)产生菌黄柄曲霉 ( Aspergillusf lavipes) 进行紫外线、亚硝基胍、紫外线加亚硝基胍多轮复合诱变 ,以对自身次生代谢产物抗性作为筛选策略 ,选育到对自身抗生素抗性提高且发酵相对效价提高到 383%的高产菌株。菌落形态观察发现在 Sabauraud( SBD)培养基上产孢子丰富且形成黄色孢子和黄色菌丝的 179M产量较高。179M最佳发酵温度为 2 8℃ ,培养基最适起始 p H值为

微生物来源的抗真菌抗生素的研究进展

近年来,随着真菌感染性问题的日趋严重,研究开发安全、新型和有效的抗真菌药物显得尤为重要。抗真菌药物根据其作用靶位分为抑制真菌细胞膜、细胞壁、蛋白质和核酸合成及抑制电子传递等5种类型。现从这5个方面对微生物来源的抗真菌抗生素研究进展作一概述。

海洋放线菌S-216菌株鉴定及其抗真菌抗生素合成条件研究

海洋放线菌Ｓ－２１６系从厦门杏林湾海泥中分离获得，根据该菌株在高氏合成一号培养基上的生长特征，列入链霉菌属（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）黄色类群；其形态、培养特征、生理生化特性与微白黄链霉菌（Ｓ．ａｌｂｉｄｏｆｌａｖｕｓ）相似，但又有明显区别；该菌全细胞水解液中含ｌ－二氨基庚二酸、甘氮酸、丙氨酸、无门冬氨酸．菌体含有特征性半乳糖、葡萄糖和核糖，ＤＮＡ中的Ｇ＋Ｃ克分子含量为７５．２ｍｏｌ．该菌株能产生专一性较强的抗真菌抗生素，对白色念珠菌（Ｃａｎｄｉｄａａｌｂｉｃａｎｓ）、新型隐球酵母（Ｃｒｙｐ－ｔｏｃｏｃｃｕｓｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ）、烟曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｕｓｆｕｍｉｇａｔｕｓ）等十多种真菌都具有不同程度的抑制作用，但对细菌无效；能产生几丁质酶．故认为是微白黄链霉菌一新变种，定名为微白黄链霉菌海洋变种（Ｓ．ａｌｂｉｂｏｆｌａｖｕｓＶａｒ．ｍａｒｉｎａ，）在发酵培养基Ａ．接种量１０％，发酵时间９６ｈ，为合成抗生素最佳条件．

抗真菌抗生素和免疫抑制剂

微生物来源的具免疫抑制活性的抗真菌抗生素如环孢素、他克莫司(FK506)、雷帕霉素和霉酚酸已被开发为器官移植抗排斥药物和自身免疫性疾病的治疗药物。笔者介绍了这些药物的抗真菌和免疫抑制活性以及作用机制等,还介绍了一些从抗真菌抗生素中开发的和从微生物中分郭得到的具有抗真菌活性的新免疫抑制剂。抗真菌抗生素和免疫抑制剂之间似乎有存在着一定的关系,对发现新的抗真菌抗生素和免疫抑制剂具有一定的意义。

金属离子对海洋青霉HN89产抗真菌抗生素的影响

讨论了不同浓度金属离子Zn2+,Ba2+Al3+对海洋青霉HN89菌株产抗真菌抗生素(HN89A)的影响。本文采用二剂量法测定抗生素的相对效价,结果表明:单一金属离子Zn2+、Ba2、Al3+在适宜用量时对HN89菌株产抗生素有促进作用,金属离子浓度为0.004mol/L时,对HN89菌株产抗生素促进作用较大;当Ba2+和Al3+浓度分别为0.006mol/L时,对HN89菌株产抗生素有抑制作用。复合金属离子浓度配比Zn2+为0.004mol/L、Al3+为0.001mol/L、Ba2+为0.004mol/L以内对其产抗生素有一定的促进作用。假设性检验实验结果表明,复合金属离子对海洋青霉HN89菌株产抗真菌抗生素的促进作用较显著。

一种抗真菌抗生素发酵工艺优化及稳定性研究

镜检观察菌株菌落及细胞形态,用正交试验设计法确定菌株最佳发酵条件。结果表明,该菌株与链霉菌形态类似,革兰氏染色呈阳性,最佳发酵条件为葡萄糖15 g/L,酵母液40 g/L,装液量30 mL/250 mL,发酵时间72h。所产抗生素对高温(95℃)具有较高的稳定性,在酸性和中性环境中比较稳定。

新颖β-1,3-葡聚糖合成酶抑制剂类抗真菌抗生素

本文概述了β-1,3-葡聚糖合成酶抑制剂———一类新抗真菌抗生素的研究进展,详细介绍了其中的FR901469及其结构优化衍生物的体内外抗菌活性和溶血活性,同时叙述了FR901469的来源、理化特性、构效关系、抗菌活性、作用机制、药代动力学和临床研究进展。

新型抗真菌抗生素CA-SD07高产菌株的诱变育种初探

目的拟通过紫外线诱变结合耐高浓度磷酸盐筛选广谱抗真菌抗生素CA-SD07的高产菌株。方法采用两种育种方式:紫外线诱变(UV),紫外线诱变后进行高浓度磷酸盐抗性筛选(UV+Pi)。筛选方法采用抑菌圈法、摇瓶发酵和小型发酵罐发酵。结果经过摇瓶初筛和复筛,从UV组和UV+Pi组共筛选到6株抗生素相对产量比原始菌株提高100%以上的高产菌。通过发酵罐发酵试验,选出1株抗生素相对产量稳定提高100%以上,且发酵周期缩短约24h的突变菌株。结论 UV+Pi与UV组育种效果接近,抗磷酸盐筛选并没有明显提高抗生素产量的作用,提示利用抗磷酸盐筛选高产菌株,需要在现行方法上进行改进才有可能实现。

β1，3—葡聚糖合成酶抑制剂类抗真菌抗生素

本文概述了β1，3—葡聚糖合成酶抑制剂——一类新抗真菌抗生素的研究进展，详细介绍了其中的FR901469及其结构优化衍生物的体内外抗菌活性和溶血活性，同时叙述了FR901469的来源、理化特性、构效关系、抗菌活性、作用机制、药代动力学和临床研究进展。

微生物来源的抗真菌抗生素SIPI-763-1的研究

寻找新型的抗真菌药物仍然是微生物新药研究方向之一。本实验室在筛选微生物来源的抗真菌抗生素的过程中,从数千株链霉菌中发现十几株阳性菌株,其中SIPI-763菌株展示出较强的抗真菌活性。通过培养基优化、大规模发酵、发酵液乙酸乙酯萃取、硅胶柱分离,从SIPI-763菌株的发酵液中获得化合物SIP-I-763-1。经理化性质、UV、NMR等图谱数据的分析,确定其化学结构与文献报道的丰加霉素(toyocamycin)结构一致。生物学活性研究发现,化合物SIPI-763-1不仅具有抗真菌活性,还具有抗耐药菌的新活性。

抗真菌抗生素产生菌UEZC的^(60)Co-γ射线诱变育种

为筛选高产抗真菌抗生素菌株,用出发菌株UEZC经60Co-γ射线辐射诱变,以拮抗菌对峙法初筛,琼脂块法、管碟法复筛,筛选到高产突变株MUE-4,其抑菌活性较UEZC菌株提高了近1倍,遗传稳定性良好。

β-1,3-葡聚糖合成酶的提取及在抗真菌抗生素筛选中的应用

真菌病,尤其是有致命危险的深部感染真菌病随着易感染患者的增加而越来越多。一些条件致病菌,在机体免疫能力下降时,也成为重要的病原,但是,治疗真菌病至今没有理想的药物。真菌细胞壁结构和组成的特点,为筛选抗真菌药物提供了理想的靶位。真菌细胞壁主要由多糖构成,约占干重的80％,蛋白约占3％～20％,还有少量的脂、色素和无机盐。多糖是骨架,主要包括几丁质、葡聚糖和甘露聚糖,其含量和比例因菌不同而异。临床上的重要条件致病菌白色念珠菌(C.albicans)的细胞壁主要由葡聚糖和甘露聚糖构成,兼有少量几丁质,葡聚糖又以β—1,3—葡聚糖为主,这为以葡聚糖合成酶作为筛选真菌细胞壁合成抑制剂的靶酶提供了理论依据。

壳聚糖对嘧啶核苷类新型抗真菌抗生素发酵液絮凝除菌作用的研究

利用天然高分子聚合物壳聚糖为絮凝剂去除抗生素发酵液中的菌体,结果表明:发酵液pH值、絮凝剂用量是影响絮凝效果的主要因素。最佳絮凝条件为pH7.0,絮凝剂用量0.4g/L,温度30℃,此时菌体絮凝率(FR%)可达70%以上。经絮凝预处理后,滤速为处理前的2.5倍,发酵液的效价由700 U/mL提高到860 U/mL。

利用液泵型生物反应器合成新型抗真菌抗生素的研究

筛选得到一株不吸水链霉菌,能产生一种新的嘧啶核苷类抗生素。实验确定了其最佳发酵条件:pH 6.5,接种量10%,30℃下摇瓶发酵72 h。分别使用通气搅拌发酵罐和喷射式液泵型发酵罐进行发酵试验,发现在相同的容积传氧系数(KLa)值下,后者的发酵液抗生素效价明显高于前者,电镜照片显示其菌丝体生长也更优。

抗真菌抗生素

就抗真菌抗生素的作用机制进行简要的阐述 ,最后阐明研究开发高效安全抗真菌抗生素的必要性。