将抗真菌病基因导入马铃薯的研究

实验采用微束激光穿刺技术和农杆菌介导方法 ,将携带有 型烟草β 1 ,3葡聚糖酶基因和 型菜豆几丁质酶基因的 p BLGC质粒导入马铃薯 ( Solanum tuberosum L .)品种“津引 8号”。微束激光穿刺技术转化中 ,获得了 7株卡那霉素抗性再生苗 ,分子检测证明 ,其中有 1株为菜豆几丁质酶基因单基因转化植株。在农杆菌介导方法中得到了 1 3株卡那霉素抗性再生苗 ,其中有 3株为烟草β 1 ,3葡聚糖酶基因单基因转化植株。实验证明 ,同常规农杆菌介导方法相比 ,微束激光穿刺技术更为简便有效 ,细胞损伤小 ,为马铃薯遗传转化提供了一个外源基因直接导入的新途径。

含多种抗真菌病基因植物表达载体的构建

含有大麦核糖体失活蛋白（ＢＲＩＰ） 编码序列的质粒ｐＲＣ２４／ＢＲＩＰ改造后， 依次与含有水稻碱性几丁质酶基因ＲＣＨ１０ 和水稻酸性几丁质酶基因ＲＡＣ２２ 编码序列的质粒ｐＡＢＣ２ 以及含有苜蓿β１ ， ３葡聚糖酶编码序列的质粒ｐＡＡＧ８９ 连接， 得到了中间载体ｐＲＡＳ１０ ．ｐＲＡＳ１０再与根癌农杆菌双元载体ｐＣＡＭＢＩＡ１３００ 连接， 得到了适合水稻转化的双元载体ｐＲＡＳ１３００ ． 利用冻融法将此表达载体导入根癌农杆菌ＬＢＡ４４０４ 中， 并准备将ｐＲＡＳ１３００ 转入水稻，