乳杆菌L2抗突变活性物质组成分析及部分理化性质研究

本文对分离纯化的乳杆菌L2的抗突变活性物质的化学组成进行了研究,用苯酚-硫酸法测糖含量,用BCAProteinassaykit测蛋白含量,用氨基酸分析仪测各氨基酸组成。结果表明,该糖蛋白糖含量为41.3μg/ml,蛋白含量约为872μg/ml,两者的含量比约为1:20,总氨基酸含量为35.91%,其中含量较高的氨基酸为苯丙氨酸(Phe),其次为精氨酸。然后对该糖蛋白部分理化特性进行了研究,该物质分子量约10kDa,作用温度范围为20～60℃,作用pH范围是5～9,10～50mmol/L的K+对糖蛋白活性基本无影响,对活性影响最大的是Fe3+。

应用Ames试验对氟化物诱发突变和抗突变活性的研究

应用Ames鼠伤寒沙门氏菌/微粒体酶技术研究了氟化钠(NaF)对TA98和TA100两个组氨酸缺陷型菌株的致突变和抗突变活性。结果表明,NaF对所试微生物缺乏致突变活性,且在中毒浓度下(>2000μg·皿-1)降低了试验菌株的回复突变频率;NaF对已知的阳性致突变物也未显示抗突变效应。

乳酸菌抗突变活性的研究进展

根据近年来国内外报道,对乳酸菌抗突变活性的研究进展进行了综述,并介绍了乳酸菌抗突变活性物质的分离、纯化及其研究方法。

抗突变乳酸菌的筛选及其活性物质的分离纯化

采用HPLC法及Ames法对实验室分离和保藏的36株乳酸菌进行筛选,其中乳杆菌L2发酵上清液对阳性物NQO及NPD具有较强的抗突变活性,并且36h的培养物活性最强。将L2发酵上清液进行DEAE-Spharose离子交换层析,收集样品中在A280处有吸收峰共16管,然后用截留分子量为3ku的超滤管进一步纯化脱盐,分别用HPLC法及Ames法对其抗突变活性进行鉴定。结果表明,其中3管具有较强活性,将它们进行PAGE,用考马斯亮蓝R250染色,各管在同一位置出现均一条带,并成功地染上了PAS试剂,因此可初步证明该物质为一种糖蛋白。

产紫青霉G59的两株突变株新产抗肿瘤活性产物研究

目的阐明无活性真菌产紫青霉G59的两株抗肿瘤活性突变株2-2-3和PDN-f-2新产活性产物。方法采用与原始菌样品直接对照和活性跟踪分离的实验模式,利用液液萃取、柱层析、重结晶等方法分离纯化活性产物。利用现代波谱技术鉴定化合物结构。用MTT法测试样品对K562细胞的抑制活性。结果从2-2-3和PDN-f-2发酵物中分别分离鉴定了ergone(1)和citrinin(2)。化合物1和2抑制K562细胞的IC50分别为7.4和48.0μg/ml。结论化合物1和2均为产紫青霉产物中未见报道的G59的两株突变株新产活性产物。将无活性真菌野生株转化成活性突变株并研究其新产活性产物,将有可能成为拓展药源真菌活性菌株新资源的很好途径。

3株抗生素抗性放线菌活性突变株新产代谢产物及其抗肿瘤活性初步测试

从无活性海洋来源放线菌M15的3株抗生素抗性抗肿瘤活性突变株发酵物中分离鉴定了9个原始菌M15发酵物中没有的代谢产物,其化学结构分别鉴定为1,9-二甲酯-吩嗪(1)、过氧化麦角甾醇(2)、对-甲胺基苯甲酸(3)、染料木素(4)、大豆黄素(5)、N-(2-羟基苯基)-乙酰胺(6)、邻二羟基苯甲酸(7)、尿嘧啶(8)和2-吡咯酸(9)。在初步预试活性测试中,化合物1,2,4,5,7,8对K562细胞示有一定抑制作用,相关活性有待进一步详细测评。

八种民间药在鼠伤寒沙门氏菌株TA98中的抗苯并芘致突变活性

从植物药中寻找抗致突变物质已有报道。1987年我们对常用的“扶正固本”中草药进行抗致突变活性的调查,发现一些补益药如赤芍、玉竹、女贞子、锁阳、淫羊藿。

突变人CD59分子糖基化前后抗补体活性的变化

目的探讨2种突变CD59分子(HM3、HM4)糖基化前后抗补体活性的变化,为糖尿病血管增殖的发生机制提供理论基础。方法采用重组聚合酶链反应定点诱变技术在CD59易于糖基化的位点“41位赖氨酸—44位组氨酸”将44位的组氨酸基因位置改变,构建2种不同的CD59突变基因,克隆入真核表达质粒pALTER-MAX。利用阳离子脂质体将重组质粒和pcDNA3共转染中国仓鼠卵巢细胞。G418筛选稳定转染细胞克隆,免疫标记技术检测筛选突变CD59基因蛋白高表达株。染料释放实验检测突变CD59分子糖基化前后抗补体活性。结果序列测定及酶切鉴定均证实成功构建了pALTER-突变CD59重组真核表达载体系统。经酶免疫组织化学、荧光免疫组织化学和流式细胞术鉴定出较高表达突变CD59分子的阳性细胞克隆。免疫印迹技术检测出阳性细胞克隆裂解液中有1条相对分子质量约20 000的CD59蛋白表达带。染料释放实验初步证实突变CD59分子具有抗补体活性,糖基化后抗补体活性明显降低。结论2种突变CD59分子均具有抗补体活性,高糖环境下易被糖基化,糖基化后抗补体活性明显降低,为进一步研究糖尿病血管增殖的发生机制提供了线索。

韩国产炒紫苏子甲醇提取物的体外抗氧化及抗突变效果

目的:探讨三种韩国产炒紫苏子甲醇提取物(PSE)的体外抗氧化能力及抗突变能力。方法:以DPPH自由基、羟基自由基清除实验结合亚铁离子螯合实验,总还原力及亚油酸自氧化抑制实验评价三种PSE的体外抗氧化能力。鼠伤寒沙门氏菌突变回复Ames法评价体外抗突变能力。结果:三种PSE均具有较好的体外自由基清除能力和金属离子螯合能力,但其对DPPH自由基和羟基自由基的清除能力均弱于标准抗氧化剂叔丁基羟基茴香醚(BHA)。同时,三种PSE的总还原力和亚油酸自氧化抑制能力均强于BHA。此外,三种PSE中均含有较为丰富的多酚,黄酮和抗坏血酸;且对致突变剂N-甲基-N'-硝基-亚硝基胍(MNNG)诱发沙门氏菌TA100突变的抑制能力呈浓度依赖关系。结论:三种韩国产炒紫苏子具有的较强抗氧化能力和抗突变能力。三种韩国产紫苏子所具有的抗氧化能力和抗突变能力可能与其所含丰富的抗氧化物质有关。

植物药中原花青素的抗氧化作用

分别对原花青素的化学结构、植物资源。