梅毒螺旋体抗体酶联免疫吸附试验作为初筛方法的梅毒逆向筛查程序的可行性分析

目的:探讨TP-ELISA作为初筛方法的梅毒逆向筛查程序的可行性分析。方法:选择2016年1月至2017年6月在大连大学附属中山医院各门诊及病房就诊的梅毒筛查者,并收集其标本15378份,采用梅毒螺旋体抗体酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)与甲苯胺红不加热血清学试验(TRUST)筛选分析。以TPPA为标准,比较各种方法的特异性、灵敏度以及总符合率,统计TP-ELISA的S/CO值与TPPA阳性结果的相关性。结果:TPPA筛查阳性率为3. 57%,TP-ELISA筛查阳性率为3. 83%,TRUST筛查阳性率为2. 38%。TP-ELISA的灵敏度(98. 9%)明显优于TRUST(64. 3%),差异具有统计学意义(P <0. 01)。TP-ELISA与TRUST特异性与符合率差异无统计学意义(P> 0. 05)。梅毒筛查时,TP-ELISA与TPPA在梅毒筛查时有较好的一致性(K=0. 945),TRUST与TPPA一致性不明显(K=0. 639)。根据梅毒抗体检测的特点以及实验室TP-ELISA的检测方法,当≤1. 0时,S/CO为阳性,> 1. 0时S/CO为阳性。TP-ELISA检测结果的假阳性样本率为75. 00%(54/72),其主要是发生在S/CO值1. 0～2. 99之间。随着TP-ELISA的S/CO的数值增高,TPPA的符合率也依次增加,S/CO> 5. 0时,TPPA的阳性率为100%。TRUST的检测阳性样本有13例,患者主要有妇产科正常妊娠8例,口腔科牙周炎3例,心内、呼吸2例。TP-ELISA假阴性6例,其中分布为泌尿科患者3例,骨科患者1例,妇产科患者2例,其被疑为梅毒早期。TP-ELISA假阳性患者72例。结论:TP-ELISA的灵敏度和特异性显著优于TRUST,有利于梅毒筛查效果,值得临床上大样本筛查。

间接免疫荧光法与酶联免疫吸附试验检测抗核抗体对比分析

目的:应用间接免疫荧光法(indirect immunofluoreseent assay,IF)与酶联免疫吸附试验(enzymelinked immunosorbent assay,ELISA)检测临床疑似自身免疫疾病患者血清抗核抗体并进行相关性及对比分析。方法:IF法按说明书操作,在荧光显微镜下观察到特异的荧光核型为阳性;ELISA法按说明书操作,浓度≥18U/mL为阳性,12～18U/mL为可疑,≤12U/mL为阴性。结果:检测临床疑似自身免疫患者血清138份,IF法阳性50份,阴性88份,阳性率36.23%,ELISA法阳性78份,阴性60份,阳性率56.52%。经卡方检验P<0.01。其中IF法样本血清稀释倍数与ELISA法检测浓度的Spearman相关系数为0.499。结论:两种方法检测抗核抗体差异有显著性,ELISA法敏感度明显高于IF法。同时,IF法样本血清抗核抗体血清稀释倍数与ELISA法的浓度呈一定相关性。

精子抗原肽的合成及其在酶联免疫吸附法检测抗精子抗体中的应用价值

目的:以合成精子抗原肽为抗原建立酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测抗精子抗体(AsAb)。方法:通过PS3全自动合成仪合成精子肽P10G、YLPl2和SP17抗原肽,经反相高效液相色谱(HPLC)纯化和质谱鉴定,分别包板制备ELISA试剂盒,并检测血清标本。结果:成功合成3种目的肽,质谱分析结果主峰分子量与理论值基本一致,HPLC结果显示其纯度为97.5%、97.78%和95.5%。以3种合成肽为抗原建立ELISA检测AsAb,与商品化试剂盒比较,均显示极好的一致性(Kappa值>0.75)。结论:全自动固相多肽合成技术可用于高纯度的精子抗原肽合成,所合成的P10G、YLPl2和SP17抗原肽均具有较好的抗原活性,可作为ELISA的包被抗原用于AsAb检测。

酶联免疫吸附试验检测梅毒患者血清中抗苍白螺旋体IgM抗体

目的 评价抗苍白螺旋体IgM抗体检测对梅毒的临床意义。方法 用酶联免疫吸附试验 (ELISA)对 72例梅毒患者检测了特异性IgM抗体 ,并与快速血浆反应素环状卡片试验 (RPR)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)的检测结果进行比较分析。结果 血清抗苍白螺旋体IgM抗体在一期梅毒的阳性率为 73 3% (11/ 15 ) ,在二期梅毒的阳性率为 88 9% (16 / 18) ,二者差异无显著的统计学意义 (χ2 =1 6 36 3,P >0 10 )。在潜伏梅毒 ,IgM抗体阳性率为 2 6 1% (6 / 2 3) ,非常显著地低于早期显性梅毒 (χ2 =17 6 189,P <0 0 0 5 )。在一期、二期和潜伏梅毒 ,RPR和TPPA的阳性率均为 10 0 %。入组前 2～ 2 4个月已经正规抗梅治疗的梅毒 16例 ,其中IgM抗体阳性2例。结论 ELISA法检测特异性IgM抗体诊断一期梅毒并不优于RPR和TPPA。IgM抗体在潜伏梅毒敏感性低 ,其诊断应依靠RPR和TPPA。目前不推荐单独检测抗梅毒IgM抗体来监测病情和判断疗效。

电化学发光免疫测定与酶联免疫吸附试验检测抗环瓜氨酸多肽抗体比较

目的分析酶联免疫吸附试验(ELISA)和电化学发光免疫测定(ECLIA)检测抗环瓜氨酸多肽抗体(抗CCP抗体)的结果,并评价两种方法检测结果的一致性。方法应用ELISA和ECLIA同时检测145例类风湿关节炎(RA)患者(含25例早期RA患者)、155例其他风湿免疫性疾病患者(包括50例骨性关节炎、35例强直性脊柱炎、30例干燥综合征、20例系统性红斑狼疮、10例原发性胆汁性肝硬化和10例系统性硬化症)、50例其他疾病患者和50例健康对照者共400例血清样本的抗CCP抗体含量。用SPSS13.0统计软件对结果进行一致性、敏感性及特异性分析,并分别对3例ECLIA检测高浓度抗CCP抗体血清样本做1∶20、1∶30、1∶40、1∶80和1∶160稀释后进行线性分析。结果 ELISA和ECLIA检测400例血清样本抗CCP抗体的一致性极好;两种方法检测RA患者抗CCP抗体的敏感性和特异性近似,ECLIA分别为77.24%和98.00%,ELISA分别为76.55%和98.00%。3例ECLIA检测高浓度抗CCP抗体血清样本线性回归分析结果显示,样本浓度稀释至1∶160,线性R2值均>0.9。结论 ECLIA和ELISA检测抗CCP抗体具有较好的一致性,且ECLIA线性范围较宽,ECLIA检测抗CCP抗体具有良好的应用前景。

酶联免疫吸附法测定血清抗精子抗体

将酶联免疫吸附技术用于人血清抗精子抗体的检测,126例,临床检查结果所得,平均批内变异系数为6.5%,平均批间变异系数为7.1%,证实该法稳定性、重复性良好。44例正常供血者标本得正常值为 O.D(?)0.355。将其与目前临床上应用较广的精子浅盘凝集试验(TAT)结果比较,两者符合率达87.3%。

血清抗精子抗体的酶联免疫吸附定量测定

目的:研究抗精子抗体(AsAb)的酶联免疫吸附试验(ELISA)定量测定方法。方法:对ELISA—SPC310试剂盒的线性、回收率、重复性、批内变异值(CV)及最终颜色产物的呈色稳定性进行测定,并用试剂盒对42例不育夫妇进行了血清抗精子抗体的定量测定。结果:抗精子抗体总抗体(TIg)、IgG、IgA的浓度在250 U/ml以下具有良好的线性;回收率在96.5％～98.7％之间;CV值在6.7％～9.3％之间;在自然光条件下,最终颜色产物在20min内吸光度减退8.2％。不育夫妇血清中TIg浓度超过参考值上限的比例,男性为25.9％,女性为33.3％。结论:ELISA-SPC310试剂盒是一种可靠的定量测定AsAb的方法。

酶联免疫吸附试验检测血清抗中性粒细胞胞质抗体方法的建立与临床应用

目的建立总抗原酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)的方法,初步探讨其在ANCA相关血管炎中的表达及临床应用价值。方法从人的中性粒细胞中提取总抗原,用棋盘滴定法选择ELISA测定的最佳条件,确定临界值。测定系统性红斑狼疮(SLE)、肾病、血管炎、类风湿关节炎(RA)等患者血清总ANCA,并与间接免疫荧光(IIF)法、特异性髓过氧化物酶(MPO)-ANCA及蛋白酶3(PR3)-ANCA进行分析比较。结果总抗原ELISA与IIF法检测肾病、SLE、血管炎及RA患者血清ANCA阳性率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。抗原特异性ELISA、IIF法检测肾病、血管炎、RA患者血清ANCA阳性率比较差异均无统计学意义(P>0.05),而SLE差异有统计学意义(P<0.05)。结论ELISA检测ANCA可行且具有广泛的推广应用前景。

一种国产抗环瓜氨酸肽抗体酶联免疫吸附试验检测试剂盒的评价

近年来，国内外均有研究报道抗核周因子（APF）、抗角蛋白抗体（AKA）和抗聚角蛋白微丝蛋白抗体（AFA）的共同抗原决定簇环瓜氨酸肽（CCP）对类风湿关节炎（RA）具有较高的特异性和敏感性，这对早期诊断RA具有重要意义，被视为RA新的血清学指标。目前，开展抗CCP抗体检测项目的国内医院用的都是国外产品，因国外产品价格偏高。限制了其广泛使用。

酶联免疫吸附试验和间接荧光免疫法检测抗双链DNA抗体的评价

系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）属于全身性自身免疫病，病变一般累及身体的系统器官、关节以及脏器，并且各种自身抗体出现于血清内，在表现形式上，临床上具有多样性，并且非活动期与活动期相互交替出现是该疾病的典型特点[1]。SLE这一类疾病好发于女性[2]，然而迄今为止对其发病机制尚不清楚，本研究应用酶联免疫吸附试验（ELISA）法及间接荧光免疫法（IIF）检测SLE患者和对照组血清的抗双链DNA（dsDNA）抗体，以评价2种检测方法在SLE诊断中的临床价值。

抗-HCV酶联免疫吸附试验试剂的评价

目的评价国内外11种抗-HCV酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂的质量。方法采用艾滋病参比实验室基础血清盘、BBI阳转血清盘、美国CAP特性血清盘,对国产和进口的试剂进行质量测评。评价指标包括敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值等。结果11种抗-HCV ELISA检测试剂的敏感性均为100%,多数试剂特异性>90%。阳转血清盘评价显示5种试剂平均延长天数<2d,大多数试剂未检出抗-NS3。所有试剂均检测能出抗核心区抗体。美国CAP特性血清盘评价显示所有试剂检测结果与标准结果一致率均为100%。结论11种抗-HCV酶联免疫吸附试验试剂有较高的敏感性,特异性有差异。由于ELISA抗-HCV试剂敏感性高,实用性强,适合于我国一般人群的筛查检测。

酶联免疫吸附法和间接免疫荧光法检测抗dsDNA抗体方法的比较

目的比较酶联免疫吸附法（ELISA）和间接免疫荧光法（IIF）检测抗dsDNA抗体的检出情况及符合率。方法用酶联免疫吸附法和间接免疫荧光法同时检测286份临床疑为系统性红斑狼疮（SLE）的病人血清。结果286份样本中ELISA法捡出31例抗dsDNA抗体阳性，255例抗dsDNA抗体阴性，而在ELISA法检出31例抗dsDNA抗体阳性中IIF法检测仅有13例阳性，阳性符合率仅为41．94％。ELISA法检出的255例抗dsDNA抗体阴性标本中IIF法检测有255例阴性，职性符合率100％。ELISA法和IIF法检测抗dsDNA抗体的阳性检出率有显著性差异。结论ELISA法和IIF法检测抗dsDNA抗体的阳性检出率差异有统计学显著性意义（P〈0．05），ELISA法检测抗dsDNA抗体简便、快速、设备要求不高，可以用于大批量的抗dsDNA筛壹，但因为特异性不高，假阳性较多，因此有条件的实验室最好采用IIF法对阳性结果进行复检确认。

酶联免疫吸附抗原板LAT1HD与LAT1240检测抗HLA Ⅰ类抗体的对比分析

目的分析基于酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immune absorbentassay,ELISA)的莱姆德抗原板(LAT1240)与单一抗原检测板(LAT1HD)在肾移植受者抗HLAⅠ类抗体检测中的异同和应用价值。方法采用基于ELISA的用LAT1240与LAT1HD分别检测73例已经莱姆德酶标混合抗原板(LATM)确定抗HLAⅠ类抗体阳性的等待肾移植的患者血清样本。比较两种抗原板的平均阳性反应强度、阳性率、抗体特异性分析等方面的异同。结果两种抗原板的平均阳性反应强度差异无统计学意义(P>0.05)。LAT1HD所测出的抗HLA抗体阳性率较LAT1240低,差异有统计学意义(P<0.05)。两种抗原板分辨出的抗HLA抗体特异性完全相同18例(25%),1例完全不同,其余54例结果存在部分差异。5例样本用LAT1240分辨出包含抗Cw抗原的抗体,而用LAT1HD分辨出用LAT1240未能检出的抗HLA-A或B抗体。用LAT1240检测为高度致敏(群体反应性抗体>60%)的样本中,有9例经群体反应性抗体分析软件不能分析出抗HLA抗体的特异性,但可以由LAT1HD分辨出来。共有21例致敏患者接受了肾移植手术,随访1年以上,人/肾存活率达100%。其中6例发生急性排斥反应,使用抗胸腺细胞球蛋白或甲泼尼龙冲击治疗,5例受者逆转,1例效果不佳。结论与使用LAT1240检测的结果比较,用LAT1HD检测出的特异性抗体更为准确,更适用于临床。

化学发光免疫分析与酶联免疫吸附试验检测抗磷脂抗体的价值对比

抗磷脂综合征属于自身免疫性疾病,常见于女性,主要表现为血小板减少、血栓形成等,是由于炎症反应导致抗磷脂抗体的大量生成,促使机体产生一系列的病理改变,以心肺、肾、脑血管等的病变为主,需早诊断、早治疗[1]。临床常选择酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗磷脂抗体,此方案简便,以检测出抗磷脂抗体的靶抗原,但由于试验过程中常受到吸附因素、标准化缺乏等的影响,同时需手工行实验对照,造成抗磷脂抗体的检出效果不高[2]。化学发光免疫分析(CLIA)主要将所取的样本置入试剂盒中,检测后根据试剂盒本身附带的标准结果进行对比,试验具有简便、自动化等特点,降低人工操作过程中出现的误差[3],但将其用于抗磷脂综合征患者检测抗磷脂抗体的效果并未明确,基于此,本研究将探讨CLIA法与ELISA法检测抗磷脂抗体的价值,结果如下.

探讨酶联免疫吸附试验检测乙肝核心抗体假阴性的问题

目的:了解用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙肝二对半核心抗体(抗-HBc)的假阴性。方法:留取用ELISA检测HBsAg阳性、HBeAg阳性、抗-HBc阴性血清标本201份,分别用美国雅培AXSYM免疫发光仪微粒子酶免疫技术(MEIA)定量检测抗HBc、ELISA进行原倍和生理盐水15倍稀释测定。结果:MEIA法定量检测抗-HBc阳性166份,阳性检出率为82. 6%;阴性(S/Co>1 0)35份,与ELISA一步法相比阴性符合率为19 .9%,生理盐水15倍稀释阳性33份,阳性检出率为19 4%,原倍血清100% 阳性。结论:MEIA法定量检测的阳性率远远高于ELISA法检测, 15倍稀释测定结果阳性率比30倍稀释有所提高,原倍血清仅作为流行病学调查结果。

操作时差对竞争酶联免疫吸附试验法检测抗-HBc结果的影响

本研究采用操作时差对竞争酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测抗-HBc结果影响的探讨,现将结果报告如下。 1材料与方法 1.1材料来源：66份血清标本随机采自2006年12月我院住院、门诊患者和健康体检者,干管抽静脉血3～5mL,37℃水浴箱放置15min后3000r／min离心15min，充分分离血清，-80℃低温冰箱冻存备检。

间接免疫荧光法和酶联免疫吸附试验对抗中性粒细胞胞质抗体检测方法的结果比较

目的探讨临床间接免疫荧光法和临床酶联免疫吸附试验对抗中性粒细胞胞质抗体临床检测方法的结果比较。方法选取2018年1月至2019年1月在沈阳金域医学检验所有限公司实验室诊断部的抗中性粒细胞胞质抗体临床检测样本200例,并进行临床间接免疫荧光法(IIF)和临床酶联免疫吸附法(ELISA)检测抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)的临床一致性比较。结果两种临床方法的一致性较好且差异具有临床统计学意义(P<0.05)。结论临床间接免疫荧光法和临床酶联免疫吸附试验法单独检测抗中性粒细胞胞质抗体均有漏检,临床联合检测的效果最佳,值得在临床上进一步推广。

酶联免疫吸附试验法测定抗结核菌抗原的IgG抗体在诊断肺结核中的意义

本文以酶联免疫吸附试验法对痰菌阳性肺结核、痰阴性肺结核、矽肺合并活动性肺结核患者和正常健康组血中抗结核菌抗原的IgG抗体进行测定。阳性率分别为94．4％、90．8％、89．5％和6％。结果表明，该抗体的测定对肺结核的诊断具有一定的临床意义。对矽肺和合并结核具有鉴别和诊断性的意义。