抗人精浆蛋白单克隆抗体轻、重链可变区基因的克隆及序列分析

目的：获得鼠抗人精浆蛋白（γ－Sm）单抗可变区基因，为单链抗体的构建及表达奠定基础．方法：从分泌抗人精浆蛋白单克隆抗体（γ-Sm－McAb）的杂交瘤细胞系E4B7中提取总RNA，经反转录、PCR分离获得了γ－Sm－McAb轻链可变区（VL）基因和重链可变区（VH）基因，分别克隆人pUC19质粒中，用全自动荧光DNA序列分析仪对VH，VL基因序列进行了分析．结果：E4B7VH基因由358bp组成，编码119个氨基酸，E4B7VL基因由326bp组成，编码108个氨基酸；从推导出的氨基酸序列分析证实E4B7VH，VL序列均符合小鼠Ig可变区的氨基酸序列特征．结论：所克隆基因与Internet中基因文库的所有已知基因比较，未查到相同基因，与小鼠免疫球蛋白可变区基因同源性最高．