水稻二化螟抗约性研究初报

二化螟（Chilo Suppresscalis Walker）是水稻的重要害虫,长期以来一直使用六六六、甲基对硫磷、敌百虫及其混剂“甲六粉”进行防治,1983年我国六六六停产以后,全国大部分地区均改用杀虫双等取代六六六防治二化螟。 长期使用化学药剂而导致的害虫抗药性问题,早已引起国外的极大关注,国内自1964年以来龚元坤等已先后报导棉蚜对内吸磷、乐果等有机磷杀虫剂产生抗性的情况;1977年上海昆虫所报导三化螟已对六六六和对硫磷产生了抗性,日本,朝鲜及我国台湾等地从60年代开始先后报导了二化螟对六六六和对硫磷、甲基对硫磷、敌百虫等多种有机磷杀虫剂的抗性。近年来我国大面积使用杀虫双防治水稻害虫。

淡色库蚊CYP6F1基因的克隆及表达差异的鉴定

目的克隆淡色库蚊细胞色素P450(CYP6F1)基因并进行表达差异的鉴定。方法采用RT-PCR技术和RACE策略,从淡色库蚊对溴氰菊酯抗性品系Ⅳ龄幼虫中克隆细胞色素P450基因(CYP6F1),用相应的软件进行生物信息学分析,并用实时定量PCR和RT-PCR技术分析敏感、抗性品系蚊的CYP6F1表达水平及对蚊各期CYP6F1进行表达鉴定。结果成功克隆出CYP6F1基因,基因全长1639bp,开放阅读框为1527bp,编码508个氨基酸(GenBank登录号:AY662654)。序列分析显示该基因与已克隆的日本致倦库蚊细胞色素P450基因(CYP6F1)有99%的同源性,并具有所有的细胞色素P450基因的保守性特征,一个膜锚定信号、两个还原酶结合位点、一个的典型的血红素蛋白结合位点和ETLR基序等。实时定量PCR和半定量RT-PCR结果表明,CYP6F1在淡色库蚊对溴氰菊酯抗性品系中表达水平高于敏感品系,且CYP6F1基因在淡色库蚊各个发育阶段有不同的表达。结论CYP6F1基因可能与杀虫剂抗药性相关,并且在各个发育阶段有不同的表达。