312例抗核抗体与抗细胞核细胞浆抗体谱检测结果的分析

目的回顾分析抗核抗体(ANA)与抗细胞核细胞浆抗体谱(ANA谱)在本实验室的应用状况,以及在自身免疫性疾病诊断上的价值。方法ANA用间接免疫荧光法检测,ANA谱用欧蒙印迹法检测。结果312例临床标本中,ANA阳性数为123例,阳性率为39.9%(123/312),核型种类主要为核细颗粒型、均质型和核仁型等,滴度各有不同。312例标本同时做ANA谱检测,阳性数为88例,阳性率为25%(88/312)。阳性抗体出现次数较多的是抗SSA、Ro52、SSB、CENPB(着丝点B蛋白)和Histone(组蛋白)等,基本上与荧光法测定ANA核型的结果相符。只是当ANA为低滴度(起始滴度1:100)时,ANA谱为阴性结果的可能性较高。结论用间接免疫荧光法筛查ANA,再用ANA谱作确认分型,可以更准确地确定ANA靶抗原的类型,ANA谱可检测15种针对细胞核和细胞浆的抗体,同传统的抗ENA抗体六项相比,扩大了检测范围,增强了对ANA的分型能力,具有较高的应用价值。

抗中性粒细胞胞浆抗体与抗核抗体谱联合检测对系统性红斑狼疮的临床意义

目的探讨系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者抗核抗体谱(antinuclear antibody spectrum,ANAs)与抗中性粒细胞胞浆抗体(antineutrophil cytoplasmic antibody,ANCA)联合检测的临床意义。方法采用间接免疫荧光法(IIF)和免疫印迹法(Western blot)检测120例SLE组患者、60例疾病对照组患者和20位健康人的ANCA和ANAs。用ELISA法检测验证ANCA阳性率,用SLE活动指数(SLEDAI)判断SLE活动性,分析ANCA、SLEDAI和ANAS之间的关系。结果在120例SLE患者中IIF法检测ANCA的阳性率为27.5(33/120),且均为核周型(perinuclear ANCA,pANCA)。用ELISA法验证全部ANCA阳性患者血清,阳性率为81.8(27/33),且均为髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)即为pANCA。ANCA阳性组SLEDAI评分>10分者(即SLE活动期)占81.4%与ANCA阴性组(36.5%)相比差异有显著性意义(P<0.01)。ANCA阳性组在血沉升高,补体C3、C4降低,肾脏损害、肺损害、关节肿痛等方面与ANCA阴性组比较差异具有显著性(P<0.01)。ANCA阳性率与抗ds-DNA抗体、抗Sm抗体、抗核小体抗体(AnuA)及抗核糖体P蛋白抗体(ARPA)阳性率呈正相关。结论联合检测ANCA和SLE的各项特异性自身抗体可能对SLE患者的早期发现、治疗、病情活动判断具有重要的意义。

抗中性粒细胞胞浆抗体荧光模型与其抗体谱对应关系

目的探讨间接免疫荧光法(IIF)检测抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)荧光模型与ANCA谱检测结果的对应关系。方法回顾性分析2016年1月至2017年12月该院669例ANCA荧光模型阳性患者ANCA荧光模型与ANCA谱6种特异性自身抗体之间的对应关系。ANCA荧光模型采用IIF检测;ANCA谱中的6种特异性抗体采用ELISA检测,靶抗原包括杀菌通透性增强蛋白(BPI)抗原、组织蛋白酶G(CAT-G)抗原、乳铁蛋白(LF)抗原、弹性蛋白酶(EL)抗原、髓过氧化物酶(MPO)抗原、蛋白酶3(PR3)抗原。结果核周型(P-ANCA)荧光模型对应的主要抗体为抗MPO(67.91%)、抗LF(9.79%)和抗EL(7.83%);胞浆型(C-ANCA)荧光模型对应的主要抗体为抗PR3(44.58%)、抗MPO(25.30%)和抗BPI(10.84%);不典型(A-ANCA)荧光模型对应的主要抗体为抗MPO(56.00%)、抗PR3(13.33%)和抗LF(12.00%);单纯抗MPO、抗EL、抗LF阳性时出现P-ANCA的概率分别为84.73%、90.91%、82.35%;单纯抗PR3、抗BPI、抗EL抗体阳性时出现C-ANCA的概率分别为58.18%、20.69%、9.09%;单纯抗BPI、抗LF、抗PR3抗体阳性时出现A-ANCA的概率分别为20.69%、17.65%、14.55%;此外,当所有抗体检测为阴性时出现97例荧光模型阳性患者,分别为P-ANCA(69.07%)、C-ANCA(17.53%)、A-ANCA(13.40%)。结论 ANCA荧光模型可对应出现所有的靶抗体,P-ANCA对应的抗体主要为抗MPO;C-ANCA主要为抗PR3;A-ANCA主要为抗MPO;抗MPO、抗EL、抗LF主要对应P-ANCA,抗PR3主要对应C-ANCA,抗BPI、抗LF主要对应A-ANCA,ANCA 荧光模型结果仅为临床医生对疾病的诊断提供参考,同时为实验室结果双向核对提供依据,具体疾病需参照ANCA谱靶抗体进行诊断。

抗细胞浆型自身抗体的临床意义初步探讨

目的研究抗细胞浆型自身抗体的临床意义。方法回顾性总结164例抗细胞浆型自身抗体阳性患者的临床资料。结果 164例抗细胞浆型自身抗体阳性病例中,14例(9%)为胞浆纤维型,150例(91%)为胞浆颗粒型。79例(48%)为抗细胞浆型自身抗体单阳性,其中9例检测出特异性抗体;85例(52%)为合并抗细胞核型自身抗体阳性,其中53例检测出特异性抗体,2组特异性抗体检出率差异有统计学意义(P<0.01)。99例(60%)为自身免疫性疾病,其中68例为抗细胞浆型自身抗体合并抗细胞核型自身抗体阳性;65例(40%)为非自身免疫性疾病,其中48例抗细胞浆型自身抗体单阳性,两者自身抗体组成差异有统计学意义(P<0.01)。结论抗细胞浆型自身抗体对应的特异性抗体检出率低,可能为常规抗体谱以外的其他抗体。抗细胞浆型自身抗体在自身免疫性疾病及非自身免疫性疾病中均能出现,自身免疫性疾病中抗细胞浆型自身抗体多与抗细胞核型自身抗体同时出现。

多方法学检测2657例血清自身抗体结果的回顾性分析

目的探讨常见自身抗体检测中不同方法学的检出情况,为自身抗体的检测策略提供依据。方法分析2657例同时使用间接免疫荧光(IIF)法检测抗核抗体(ANA)和免疫印迹(IB)法检测抗核抗体谱(ANAs,共15种靶抗原特异性抗体),使用IIF法、酶联免疫吸附试验(ELISA)和IB法同时检测抗双链DNA抗体(抗dsDNA抗体),以及2348例同时使用IIF法检测抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)和ELISA检测ANCA谱[髓过氧化物酶抗体(抗MPO抗体)、抗蛋白酶3抗体(抗PR3抗体)]的结果。结果(1)ANA检出率显著高于ANAs(57.77%vs.30.64%,P<0.001),检出ANA者中,40.78%检出至少一种特异性抗体,且所有检出ANAs者中,未检出ANA者占23.10%。(2)检出ANA者以低滴度为主,≤1∶320者占总检出例数的84.95%,但滴度越高者,ANAs特异性抗体的检出率越高:依次为1∶100的29.63%、1∶320的48.56%、1∶1000的77.78%和≥1∶3200的92.42%。(3)在检出ANAs者中,抗Scl-70抗体、抗PM-Scl抗体、抗PCNA抗体在检出ANA者中的占比显著低于未检出ANA者(P<0.001)。(4)ELISA对抗dsDNA抗体的检出率最高(4.14%),高于IIF法和IB法(均P<0.001),且后两种方法检出率比较差异有统计学意义(P<0.001);即便如此,IIF法和IB法检测抗dsDNA抗体仍对ELISA具有一定的补充作用。⑸IIF法对ANCA的检出率显著高于ELISA对ANCA谱的检出率(9.16%vs.2.43%),但检出抗MPO抗体和/或抗PR3抗体者中,仍有47.37%(27/57)未检出ANCA。结论用于自身抗体检测的不同方法检测效能明显不同,根据循证医学制订正确的检测策略尤为必要。

猪圆环病毒Ⅱ型Rep基因在PK15细胞中的表达及特性

为研究猪圆环病毒型(PCV2)Rep基因在PK15细胞中的表达特性,通过PCR方法克隆了PCV2杭州株(HZ0201)Rep基因全长945bp片段,与真核表达载体pCI-neo构建为重组质粒pCI-PCV2-Rep。pCI-PCV2-Rep质粒转染PK15细胞后48h,通过RT-PCR可检测到PCV2RepmRNA的转录;用猪PCV2多抗血清作间接免疫荧光试验,可检测到Rep基因表达产物。在表达量低的细胞中,PCV2Rep蛋白主要位于PK15的细胞浆,在表达量高的细胞中,细胞浆和细胞核中均含有大量的Rep蛋白,表明Rep对PK15细胞的细胞浆和细胞核的亲嗜性没有明显差别。

抗中性粒细胞胞浆抗体研究进展

抗中性粒细胞胞浆抗体（anti-neutrophil cytoplasmic anti-body，ANCA）是一种以中性粒细胞和单核细胞胞浆成分为靶抗原的自身抗体。近年来，国内外学者对ANCA及其靶抗原的性质、ANCA相关疾病、致病机制及检测方法等进行了深入的研究。目前已发现，ANCA自身抗体谱存在十余种特异性抗体，ANCA对系统性血管炎、炎症性肠病和自身免疫性肝病等自身免疫性疾病的诊断与鉴别诊断具有重要意义。ANCA已成为自身免疫性疾病极为重要的临床常规检测项目。抗中性粒细胞胞浆抗体谱中的自身抗体蛋白酶3（protease3，PR3）和髓过氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）为原发性小血管炎特异性自身抗体，并与病情活动度密切相关，现已成为原发性小血管炎特异性血清学诊断及治疗监测的重要指标。本研究针对ANCA的研究历史、致病机制、抗中性粒细胞胞浆抗体谱的分类、检查方法及临床意义做一简要综述。

力欣奇继续医学教育园地——思考病例系列（5）答案

（病例见本期彩页）应做检查：抗心磷脂抗体、抗肾小球基底膜抗体、抗中性粒细胞胞浆抗体、抗核抗体谱、补体，并完善视力、听力检查以及肾活检。化验结果：抗心磷脂抗体（-），抗肾小球基底膜抗体（-），抗中性粒细胞胞浆抗体：pANCA（＋）、cANCA（-）、抗MPO-ELISA（＋）、抗PR3-ELISA（-），抗核抗体谱：ANA（＋）1：40，DsDNA（-），补体C3、c4正常。

力欣奇继续医学教育园地——思考病例系列(6)答案

(病例见本期彩页)建议检查项目:完善细胞及体液免疫功能、抗核抗体谱、抗中性粒细胞胞浆抗体、补体定量、汗氯试验、血淀粉酶、结核感染T细胞斑点试验.G试验、冷凝集试验、副鼻窦CT肺功能、支气管镜下纤毛活检并行电镜检查,不能明确病因可完善基因检测及肺部活检。