利用RNA干扰技术抑制小鼠羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶基因的表达

目的为了探寻一种更有效的家族性高胆固醇血症(FH)基因治疗新途径,通过慢病毒介导RNA干扰的方法在H22细胞系及C57BL/6J纯系小鼠中抑制内源性羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMG-CoAR)基因表达进行研究。方法从HMG-CoAR基因序列中选择三段作为靶序列(T1、T2和T3),并构建重组慢病毒RNAi载体;经体外包装后,分别感染H22细胞系及注射小鼠。通过qRT-PCR检测HMG-CoAR mRNA丰度;利用WesternBlot、ELISA方法分析HMG-CoAR的表达水平。结果与空载体对照相比,三个实验组中稳定转染细胞的HMG-CoAR表达水平显著降低(P<0.05),同时感染5天后小鼠的肝脏HMG-CoAR mRNA水平、蛋白含量以及血浆中HMG-CoAR表达均显著降低(P<0.05),其中T3位点的抑制效率最高,是空质粒对照的1/3。另外,对三个载体的持续性抑制能力分析显示,在处理后的至少50天内,三个实验组小鼠中HMG-CoAR表达量均有效地被抑制,其中T1靶点的抑制效果最为稳定,而T3靶点的波动最大,但抑制效率一直最高。结论三个重组慢病毒RNAi载体均可显著抑制内源性HMG-CoAR表达,可为下一步试图通过下调HMG-CoAR表达的方式,降低FH患者体内胆固醇水平的FH基因治疗奠定基础。

羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶抑制剂的降脂外作用

目前，临床上常用的羟甲基戊二酸单酰辅酶A（HMG-GoA）还原酶抑制剂即他汀类药物，如洛伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、氟伐他汀、阿托伐他汀和西立戊他汀等。该类药物不仅具有显著的降脂疗效，且对心脑血管疾病还具有独特的防治或保护作用。

甘薯水溶性糖蛋白对大鼠脂肪肝及羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶的影响

以SD大鼠为实验对象,研究了甘薯水溶性糖蛋白(SPG)对大鼠脂肪肝及羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶的影响。肝脏组织切片及血液检测结果显示:甘薯糖蛋白能够有效降低高脂血症大鼠的血脂水平。甘薯糖蛋白可能是通过与羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMG-COA还原酶)结合,对羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶有较强的竞争性抑制作用,从而减少胆固醇的生成。

槲皮素对脂肪变性L-02细胞胆固醇合成及羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶表达的影响

槲皮素[3，3’4’，5，7-五羟基黄酮]是天然黄酮类化合物。许多研究已证实槲皮素有抗增殖、抗氧化、抗肿瘤、抗炎、抗病毒等药理作用，且不良反应小。本实验旨在检测槲皮素对胆固醇合成的作用及其相关机制，为治疗胆固醇代谢性疾病开辟新途径。

抗HMGCR抗体对他汀类药物暴露相关免疫介导坏死性肌病的诊断价值

他汀类药物是临床常用的降脂药物之一,其作用靶点为3-羟基-3甲基戊二酰辅酶A(hydroxymethylglutaryl-CoA,HMG-CoA)还原酶[1],抑制该酶活性可降低血脂水平。他汀类药物可以有效降低高血脂患者心血管疾病的发生风险[2]。临床上有关于他汀类药物引起肌肉疼痛及横纹肌溶解症等情况的报道[3]。

复方贞术调脂方调节HMG-CoA还原酶活性成分的快速筛选

目的优化快速筛选影响羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMG-CoA还原酶)活性成分的方法,并筛选复方贞术调脂方(FTZ)中抑制HMG-CoA还原酶的活性成分。方法利用纯化的猪肝HMG-CoA还原酶,从HMG-CoA还原酶浓度、HMG-CoA和NADPH底物浓度三方面优化HMG-CoA还原酶筛选方法,评价FTZ和FTZ中不同药物成分对HMG-CoA还原酶活性的影响。结果猪肝HMG-CoA还原酶粗酶制剂具有明显的酶促动力学特性,反应体系中30μgHMG-CoA还原酶粗酶、200mmol/LNADPH、6μmol/LHMG-CoA是检测HMG-CoA还原酶活性和筛选影响酶活性成分的优化条件;FTZ和人参皂苷Rb2、三七总皂苷和阳性对照普伐他汀对HMG-CoA还原酶活性有显著的抑制作用,最大抑制率分别为23.7%、44.6%、35.5%、45.7%(P<0.05或P<0.01)。结论 HMG-CoA还原酶是FTZ调节脂代谢的靶点之一,人参皂苷Rb2、三七总皂苷是FTZ中抑制HMG-CoA还原酶的活性成分。

北京市71家基层医疗机构2010-2012年HMG-CoA还原酶抑制剂应用情况分析

目的:调查北京市71家基层医疗机构2010-2012年羟甲基戊二酸单酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶抑制剂的应用情况。方法:对北京市71家基层医疗机构在2010-2012年HMG-CoA还原酶抑制剂的应用情况进行统计,包括药品名称、生产厂家、医院归属地和级别。结果:各种HMG-CoA还原酶抑制剂的用量和用药金额均呈逐年上升的趋势。阿托伐他汀和辛伐他汀占据垄断地位,两者的用药金额占HMG-CoA还原酶抑制剂总用药金额的约90%份额。一级医院HMG-CoA还原酶抑制剂的院均用药量和用药金额均明显低于二级医院,郊区医院明显高于市区医院。结论:北京市基层医疗机构使用的HMG-CoA还原酶抑制剂以阿托伐他汀和辛伐他汀为主,外资企业所产药品的用药金额高于内资企业。

白细胞介素-1β激活HMGCoA还原酶促进HepG2细胞脂质积聚

目的:探讨白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)对HepG2细胞羟甲基戊二酸单酰辅酶A(3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-coenzyme A,HMGCo A)还原酶及脂质积聚的影响。方法:200μg/m L低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)负荷下的HepG2细胞分别给予0 ng/m L(对照组)、20 ng/m L(炎症组)IL-1β处理24 h。荧光定量PCR(RT-PCR)、Western blot分别测定HMGCo A还原酶mRNA及蛋白表达水平;薄层层析法检测HMGCo A还原酶活性;同位素标记法评估胆固醇合成情况;油红O染色及酶法定量检测细胞内脂质。结果:IL-1β处理下,HepG2细胞HMGCo A还原酶mRNA表达水平为对照组的(1.54±0.04)倍(t=5.619,P=0.001)、蛋白表达水平为对照组的(1.92±0.12)倍(t=7.745,P=0.002),且HMGCo A还原酶的酶活性为对照组的(1.73±0.25)倍(t=2.476,P=0.048)。IL-1β处理使HepG2细胞的胆固醇合成增多为对照组的(1.32±0.11)倍(t=2.316,P=0.036)。IL-1β处理的HepG2细胞内红染的脂滴显著多于对照组,且IL-1β处理组细胞内总胆固醇含量(22.43±1.62)为对照组(14.90±1.11)的1.51倍(t=3.845,P=0.018),胆固醇酯的含量(3.84±0.20)为对照组(1.41±0.05)的2.72倍(t=11.730,P=0.000)。结论:IL-1β可以上调HepG2细胞HMGCo A还原酶的mRNA和蛋白表达水平,并增强其酶活性,促进HepG2细胞内胆固醇合成和脂质积聚。

辅酶Q10对他汀类药物引起肌病的影响

羟甲基戊二酸单酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶抑制剂即他汀类药物,目前临床广泛用于高血脂症的治疗。他汀类药物引起的不良反应肌病越来越受到关注。辅酶Q10(CoQ10)的缺乏则是引起肌病的重要原因,而他汀药物可能通过抑制CoQ10的合成及转运,减少血液循环中的CoQ10,对肌肉组织和线粒体中CoQ10的水平也有一定影响。试验证明,CoQ10和他汀类药物联合使用可以缓解他汀类药物引起的肌痛症状。文中综述了他汀类药物对血液循环和肌肉组织中CoQ10影响、他汀类药物对线粒体损伤及联用CoQ10后缓解他汀类药物引起的肌痛的研究进展。

血脂康对高脂血症患者C反应蛋白的影响

目的 研究血脂康对高脂血症患者C反应蛋白 (CRP)的影响。方法 测定 45例高脂血症患者应用血脂康治疗前后血脂、CRP水平的变化。结果 经过 8周血脂康治疗 ,总胆固醇、LDL C、TG及CRP分别下降2 8.13 % (P <0 .0 1)、2 1.92 % (P <0 .0 1)、13 .3 7% (P <0 .0 5 )及 13 .75 % (P <0 .0 5 ) ,而HDL C升高 9.2 5 %(P >0 .0 5 )。结论 血脂康不仅可调脂 。

脂肪变性肝细胞胆固醇代谢及合成相关基因的表达

目的探讨脂肪变性肝细胞胆固醇代谢及合成相关基因mRNA表达的变化。方法以软脂酸诱导正常成人肝细胞株L-02脂肪变性,建立肝细胞脂肪变性模型,分别于实验第3、6天收集细胞,同期设不含软脂酸培养的细胞作对照。试剂盒检测细胞内甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)含量,RT-PCR法检测固醇调节元件结合蛋白2(SREBP-2)及其靶基因羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGCR)、低密度脂蛋白受体(LDLR)mRNA表达。结果软脂酸诱导第3天即可产生肝细胞脂肪变性,第6天脂肪变性加重。随造模时间延长,模型组细胞内TG、TC含量逐渐增多,SREBP-2、HMGCR、LDLR mRNA表达逐渐增强;第3天和第6天细胞内TG含量均显著高于对照组(P<0.05),第6天细胞内TC含量显著高于对照组(P<0.05);第3天和第6天HMGCR、LDLR mRNA表达显著高于对照组(P<0.05);第6天SREBP-2 mRNA表达显著高于对照组(P<0.05)。结论脂肪变性肝细胞内存在胆固醇积聚,其机制可能是胆固醇合成相关基因表达上调。

美伐他汀对人多发性骨髓瘤细胞系U2 66体外增殖与凋亡的影响

为了探讨羟甲基戊二酸单酰辅酶A(HMG CoA)还原酶抑制剂对多发性骨髓瘤 (MM)细胞增殖与凋亡的调控作用及机制 ,应用MTT比色法、光镜形态学观察、流式细胞术、DNA凝胶电泳及RT PCR研究了美伐他汀(mevastatin )对MM细胞系U2 6 6细胞体外增殖与凋亡的影响。结果显示 ,美伐他汀以剂量及时间依赖方式抑制U2 6 6细胞增殖 ;细胞周期分析显示美伐他汀诱导U2 6 6细胞G0 -G1 期阻滞 ,但对 p2 7蛋白及mRNA的表达无影响 ;在美伐他汀作用下U2 6 6细胞出现核染色质凝聚、核固缩、核碎裂等凋亡形态改变 ,PI- AnnexinⅤ + 细胞增多 ,线粒体跨膜电位 (△ψm)下降 ,DNA凝胶电泳出现梯形条带 ,bcl 2mRNA表达下调。加入外源性甲羟戊酸 (meva lonate,MVA)可完全逆转美伐他汀对U2 6 6细胞增殖与凋亡的效应。结论 :美伐他汀可通过MVA途径 ,诱导G0-G1 期阻滞抑制增殖、下调bcl 2表达及降低线粒体膜电位触发U2 6 6细胞凋亡。

他汀对心房颤动预防作用的随机临床试验的Meta分析

目的:通过Meta分析,进一步明确羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶抑制剂(他汀)对房颤的作用,为其临床合理应用提供循证学依据。方法:检索MEDLINE、EMBASE、Cochrane Controlled Trials Register数据库,收集相关随机对照试验(RCT),进行Meta分析。结果:本文纳入20项RCTs。他汀对房颤一二级预防均有显著作用(二级预防OR,0.40;95%CI 0.20-0.83;一级预防OR,0.67;95%CI 0.51-0.88),两亚组比较并无统计学差异。阿托伐他汀亚组比其他亚组更能有效降低房颤风险(OR,0.43;95%CI 0.27-0.66),尤其在中小剂量亚组(OR,0.29;95%CI 0.19-0.45)。结论:他汀在房颤一、二级预防中均有显著作用。阿托伐他汀的抗房颤作用比普伐他汀强,且中小剂量有效性更显著。他汀的作用尚需更多的临床研究予以佐证。

他汀类调脂药对脓毒症患者的保护作用

他汀类药物是临床上常用的一种调脂药,现代研究表明它还具有抑制炎症因子的释放及炎症细胞的黏附,调节凝血及纤溶系统,影响单核细胞表面的受体,维护血管内皮功能等,临床研究表明他汀类药物还可以降低脓毒症患者的病死率。本文就他汀类药物在防治脓毒症方面作一综述。

PRMT1结合并增强HMGCR活性对食管鳞癌细胞增殖能力的影响

目的探讨蛋白质精氨酸甲基转移酶1(PRMT1)结合羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGCR)后活性变化及其对食管鳞癌细胞增殖能力的影响。方法以食管鳞癌ECA109细胞为模型,通过免疫共沉淀法观察PRMT1与HMGCR在细胞中的相互结合作用。将ECA109细胞随机分为感染组和对照组,分别以表达特异性针对PRMT1的RNA干扰分子的慢病毒质粒转染48 h,采用Western blot法分别检测PRMT1、HMGCR蛋白及甲基化HMGCR蛋白,分光光度法检测HMGCR酶活性,CCK-8法检测细胞增殖活性。结果细胞裂解后的蛋白共沉淀复合物分别用抗PRMT1、HMGCR抗体捕获后,可检测到HMGCR、PRMT1蛋白条带。感染组和对照组ECA109细胞中PRMT1蛋白相对表达量分别为0.057±0.011和0.239±0.041(P<0.01),HMGCR蛋白相对表达量分别为0.175±0.031和0.184±-0.037(P>0.05)。感染组和对照组ECA109细胞甲基化HMGCR蛋白相对表达量分别为0.028±0.006、0.107±0.016,HMGCR相对活性分别为0.104±0.009、0.277±0.013,P均<0.01。感染组ECA109细胞培养24 h后,细胞增殖的OD_(450)值已低于对照组(P<0.05);培养48 h及72 h后,两组OD_(450)值差距进一步扩大(P均<0.01)。结论 PRMT1可通过结合HMGCR蛋白促进其甲基化途径增强HMGCR蛋白活性,进而促进食管鳞癌细胞的体外增殖能力。

北京地区辛伐他汀不良反应报表分析

辛伐他汀为新型血脂调节药．是羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶抑制剂的代表药物．它进人体内后的水解物具有降胆固醇作用．临床应用十分广泛。本文通过分析北京市药品不良反应监测中心2004年～2007年间收到的所有辛伐他汀不良反应报表，了解辛伐他汀不良反应的特点及机制．为临床合理用药．减少不良反应提供参考。

他汀类药物治疗脓毒症的研究进展

他汀类药物是羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶抑制剂,广泛应用于高脂血症的治疗。近年来国内外研究发现,他汀类药物还能改善脓毒症动物模型的预后,提高生存率。它同时还具有抗炎、改善内皮细胞功能、调节细胞免疫功能、增加NO的生物活性及减少血管炎症的氧化应激反应等作用,已成为近年脓毒症研究的热点。该文就他汀类药物治疗脓毒症的研究进展作一综述。