UPLC⁃Q⁃TOF⁃MS/MS法结合网络药理学研究滇重楼抗肺癌活性成分

目的基于UPLC-Q-TOF-MS/MS法结合网络药理学研究滇重楼抗肺癌活性成分。方法滇重楼70%甲醇提取物的分析采用ACQUITY UPLCTM HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm);流动相0.1%甲酸-乙腈;体积流量0.3 mL/min;电喷雾(ESI)离子源;负离子模式。通过网络药理学预测活性成分作用靶点、疾病相关靶点、成分-疾病-靶点相互关系,筛选调控疾病靶点的关键成分和相关作用靶点,并得到相关的调控通路。结果滇重楼提取物中共鉴定出26个化合物,包括17个异螺甾烷醇型(9个薯蓣皂苷型、8个偏诺皂苷型)、1个螺甾烷醇型、1个C 21甾体化合物、2个黄酮类、1个其他类。活性成分进行靶点预测,与肺癌共性靶点91个。活性成分-靶点网络和肺癌靶点PPI网络分析表明,dioscinin、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅴ为滇重楼治疗肺癌的关键成分。重楼治疗肺癌KEGG分析发现,PI3K-Akt、Ras、MAPK等信号通路,为重楼活性成分调控肺癌的主要信号通路。结论本研究明确了重楼抗肺癌的关键活性成分、相关调控通路,为滇重楼抗肺癌新药的研制提供理论基础。

大鲵皮肤黏液糖蛋白的提取纯化及抗肺癌活性研究

目的研究大鲵皮肤黏液糖蛋白提取纯化工艺以及体外对人肺癌细胞A549活性的影响。方法利用碱提取和DEAE-52离子交换层析与Sephadex G-100凝胶层析分离纯化大鲵黏液糖蛋白;并采用MTT比色法体外检测大鲵黏液糖蛋白对人肺癌细胞A549的抑制率。结果黏液糖蛋白中的总糖含量为4.23%,经SDS-PAGE电泳检测,糖蛋白的分子量在30 k Da左右,为单一纯品。随糖蛋白纯品浓度从1、10、20、40μg/m L逐渐增加,糖蛋白对A549细胞的抑制率逐渐增大;当糖蛋白浓度为40μg/m L,作用24 h时,对A549细胞的抑制率可达85.66%,作用48 h时,可达92.32%。与阳性对照紫杉醇相比,大鲵皮肤黏液糖蛋白对人肺癌细胞A549有显著的抑制作用。结论大鲵黏液糖蛋白对人肺癌细胞具有明显的抑制作用,可为抗肺癌药物的开发提供理论依据。

黄酮类化合物抗肺癌机制的研究进展

肺癌是我国乃至世界发病率最高的恶性肿瘤,已成为人类癌症主要死亡原因之一。大多数化疗药物,无论单独还是联合,对肺癌疗效均不佳。因此,研究肺癌的机制,寻求新的化疗药物备受关注。从植物中开发抗肿瘤药物,是国内外抗肿瘤新药开发的一个热点。现代医学研究发现黄酮类化合物具有较强的抗肿瘤生物活性,体内外实验研究均表明黄酮类化合物对肺癌不同阶段都具有明显的抑制作用。本文综述黄酮类化合物拮抗肺癌的研究进展,并探讨黄酮类化合物抗肺癌药物发展的趋势。

基于痰证理论中医药抗肺癌的研究进展

本文检索近十年国内外基于痰证理论中医药抗肺癌的相关文献,从理论研究、实验研究、临床实践3个方面进行总结归纳。结果显示,在中医痰证理论指导下化痰法、化痰类方剂在治疗肺癌中发挥了一定作用,多种方剂可通过多通路、多靶点产生作用,特别是与化疗联用时,在临床上发挥了较好疗效。但自拟方剂名称混淆,相关分子水平机制研究有待深入。

雷公藤红素-薏苡仁组分微乳的制备及其体内抗肺癌药效研究

目的:以薏苡仁油和薏苡仁多糖作为双功能辅料包埋雷公藤红素,制备雷公藤红素-薏苡仁组分微乳(Tripterine-Coix seed Components Microemulsions,TCC-MEs),评价其体内抗肺癌疗效。方法:采用超临界萃取法获取薏苡仁油,残渣热水浸提、分级醇沉法制备薏苡仁多糖;以薏苡仁油作为油相,薏苡仁多糖水溶液作为水相,RH40为表面活性剂,PEG400为助表面活性剂,包埋雷公藤红素,一步滴定法制备TCC-MEs;借助动态光散射纳米激光粒度仪和高效液相分别测定其粒径、多分散指数(Polydispersity Index,PDI)、zeta电位、包封率和载药量;皮下注射肿瘤细胞法构建小鼠Lewis肺癌移植瘤模型,采用TCC-MEs灌胃方式考察其体内抗肺癌活性,并通过组织HE染色及生化指标评价其肝肾毒性。结果:TCC-MEs最佳处方为薏苡仁油400 mg,RH40 300mg,PEG400 100 mg,薏苡仁多糖50 mg,雷公藤红素10 mg;雷公藤红素包封率为(90.72±0.28)%,载药量为(1.08±0.17)%,微乳平均粒径为(43.86±0.22)nm,PDI为0.10±0.01,Zeta电位为(-13.14±1.35)mV,TCC-MEs体内抗肺癌活性显著优于各对照组,且治疗后未见明显肝肾毒性。结论:所得TCC-MEs常规辅料用量少,粒径小,且稳定性高,雷公藤红素与薏苡仁组分整合至微乳体系后具有协同减毒增效作用。

^(131)I标记抗肺癌单克隆抗体1E2在荷瘤小鼠体内分布及对小鼠移植瘤作用

目的:分析碘-131(131I)标记抗肺癌单克隆抗体1E2在荷Lewis肺癌小鼠体内分布,评估瘤内注射碘-131标记抗肺癌单克隆抗体1E2(131I-1E2)对小鼠Lewis肺癌的生长抑制作用。方法:C57BL/6小鼠右后腿皮下接种Lewis肺癌细胞(LLC)1×106/只,建立荷Lewis肺癌小鼠模型,免疫组化检测Lewis肺癌细胞(LLC)膜上1E2抗原-氨甲酰磷酸合成酶1(CPS1)的表达。131I标记1E2单抗(氯胺T法),检测标记率、放化纯度、放射性比活度。荷瘤小鼠尾静脉注射标记抗体131I-1E218.5MBq,观察其不同时间点在小鼠体内的分布。成瘤后小鼠随机分为4组,分别瘤内注射生理盐水0.1ml(空白对照),1E2单抗3μg(阳性对照),131I-IGg18.5MBq(阴性对照),131I-1E218.5MBq。治疗后每周2次测定肿瘤大小,21天后处死小鼠观察肿瘤组织病理学改变,检测肿瘤体积、重量,计算抑瘤率。结果:1E2抗原-CPS1主要在肿瘤细胞膜表达,131I-1E2标记率为67.73%,放化纯度为95.63%。131I-1E2主要分布在肿瘤组织,治疗后3周试验组肿瘤体积为(0.75±0.15)cm3,重量为(1.60±0.19)g,抑瘤率78.30%,与对照组间比较差异有统计学意义(P<0.01),对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组与对照组间病理学差异显著。结论:131I-1E2瘤内注射可抑制肿瘤的生长,具有潜在的临床应用价值,有可能成为新的肿瘤治疗靶向药物。

槲寄生乙醇提取物抗肺癌作用的研究

中国槲寄生Viscum．coloratum（Kom）Nakoi在传统中药中有祛风湿、补肝肾、强筋骨、安胎作用。近年来研究发现，槲寄生是一种天然的抗肿瘤药物。作者从槲寄生中提取到具有抗肿瘤活性的乙醇提取物，发现其对人肺腺癌细胞株（A549）有显著的抑制作用，并能诱导其凋亡。

应用肺癌细胞株筛选抗肺癌多肽的研究

目的应用核糖体多肽表达法结合肺癌活体细胞从设计的多肽库中筛选出特异性抗肺癌多肽,以建立1种简便、更有效的寻找抗肺癌多肽方法。方法选择已知可在肿瘤细胞膜上穿孔的阳性对照多肽Mast21和MastoparanX与肺癌细胞株(NCI-H460)进行筛选可行性试验,证实核糖体多肽表达法结合肺癌活体细胞可筛选出肺癌穿孔多肽。组建可直接用于体外多肽表达的DNA库,应用核糖体表达法结合肺癌细胞株(NCI-H460)进行抗肺癌多肽筛选,应用MTT法检测筛选的多肽在体外抗肿瘤效果。结果应用核糖体体外表达法和肺癌细胞株(NCI-H460)成功地从设计的肽库中筛选出一些肽,分析DNA序列编码多肽,选择合成肽链进行抗肺癌试验,证实能抑制非小细胞肺癌细胞株(NCI-H460)生长,而对正常人体红细胞影响有限。结论核糖体表达法结合肺癌细胞株,可从肽库中筛选出选择性抗肺癌多肽。从而有望建立1种简便、有效的寻找抗肺癌多肽的方法,为开发作用机制完全不同的抗肺癌新药奠定基础。

抗肺癌免疫核糖核酸治疗肺癌疗效观察

目的通过观察抗肺癌免疫核糖核酸的疗效,了解免疫疗法治疗肺癌的效果。方法对难以实施放疗、化疗或手术治疗后的肺癌患者给予抗肺癌免疫核糖核酸肌肉注射,2mg/d,隔日1次,3个月为1个疗程。结果患者的症状减轻,病灶及转移灶缩小,病情有所控制。结论肺癌患者单用或与手术治疗同用抗肺癌免疫核糖核酸,疗效确切。

抗肺癌合剂对荷瘤小鼠基底膜及细胞外间质影响的实验研究

目的:观察抗肺癌合剂对荷瘤小鼠基底膜与细胞外间质的影响。方法:采用C57BL/6小鼠50只,雌雄各半,每只小鼠右侧腋窝皮下接种Lewis肺癌瘤细胞悬液0.2mL,24h后随机分为生理盐水组、模型对照组、CTX组和抗肺癌合剂组,以1.2mg/kg的抗肺癌合剂灌胃,生理盐水组、模型对照组予以等量生理盐水灌胃,每日1次,连续14天;CTX组予以20mg/kg腹腔注射,隔日1次,共给药6次。每天观察动物的一般情况,隔日称重,并观察各组小鼠皮下结节情况;给药结束24h后处死所有动物,处死前,各组小鼠行眼球取血,测血透明质酸、胶原蛋白-Ⅳ;处死剥离肿瘤组织,对接种部位肿瘤组织进行FN和LN免疫组织化学染色,采用图像分析技术检测各组肿瘤组织FN和LN阳性表达的积分光密度。结果:模型对照组Lewis荷瘤小鼠血清中HA及ColⅣ含量较正常小鼠显著增高(P<0.01);抗肺癌合剂组能显著降低Lewis荷瘤小鼠血清中HA及ColⅣ含量,与模型对照组比较(P<0.01);而CTX对Lewis荷瘤小鼠血清中HA及ColⅣ含量有显著降低作用;与生理盐水组比较(P<0.01);对HA及ColⅣ未显示出明显的影响。结论:抗肺癌合剂能抑制Lewis肺癌小鼠肿瘤生长和自发肺转移;能降低Lewis肺癌小鼠血清中HA和ColⅣ含量;能使FN在Lewis肺癌小鼠肿瘤周围脂肪组织、肿瘤包膜、血管壁及癌巢间呈断线状或连续线状表达。LN在模型组及CTX组中瘤细胞胞浆中有较高的表达,而抗肺癌合剂可显著降低其表达,显示抗肺癌合剂与CTX具有不同的作用机制。

我国抗肺癌药物专利信息分析

专利文献蕴含着重要的经济、技术、法律信息,是企业专利战略和技术创新的重要情报源。研究以1985—2016年我国抗肺癌药物专利申请数据为依据,通过对专利数据的分析和挖掘,并绘制该领域的专利地图,为国内相关企业和机构抗肺癌药物研发和专利战略制定提供有价值的情报和数据支撑。

仙鹤复方水提物体外抗肺癌细胞效应和毒理学研究

目的:探讨中药仙鹤复方水提物体外抗肺癌效应和对小鼠毒理学研究。方法:采用体外细胞实验和动物实验方法,将中药仙鹤复方水提物作用于体外肺癌细胞和小鼠体内。测定不同浓度药物对肺癌细胞增殖的影响作用以及对小鼠的毒性作用。结果:仙鹤复方提取物对肺癌细胞的生长程浓度依赖性抑制,随药物浓度增加,抑制肺癌细胞增殖作用增强,在提取物浓度为8 mg/m L时,对肺癌细胞A549和NCI-H1299的抑制率分别为96.65%和93.27%,两株肺癌细胞均出现细胞核浓缩变亮、数量显著减少等凋亡特征变化。中药仙鹤复方水提物急性毒性实验未显示毒性作用。结论:仙鹤复方体内毒性相对较低,且能有效抑制肺癌细胞的生长。

漏芦抗肺癌活性部位的筛选

目的筛选漏芦Rhaponticum uniflorum(L.)DC.体内外抗肺腺癌的活性部位,并对其化学成分进行解析。方法漏芦经有机溶媒提取,其残渣再经水提,共5个活性部位与人肺腺癌细胞A549和H1299共孵育,从中筛选抗肺癌活性最强的部位;并观察它们对Lewis接种C57BL/6J荷瘤小鼠抑瘤率、胸腺指数、脾脏指数的影响,验证其体内抗肺癌作用。采用UPLC-Q-TOF-MS-MS对该活性部位进行解析。结果漏芦抑制A549细胞增殖作用的提取物依次为正丁醇(半数抑制浓度IC_(50)为205.43μg/m L)>乙酸乙酯(IC_(50)为244.22μg/m L)>二氯甲烷(IC_(50)为350.40μg/m L);漏芦抑制H1299细胞增殖作用的提取物依次为正丁醇(IC_(50)为315.87μg/m L)>乙酸乙酯(IC_(50)为356.13μg/m L)>二氯甲烷(IC_(50)为416.13μg/m L)。漏芦提取物抑制Lewis荷瘤小鼠肿瘤增长的作用排序为正丁醇高剂量组(37.43%)>正丁醇低剂量组(32.91%)>乙酸乙酯高剂量组(25.87%)>乙酸乙酯低剂量组(21.15%)。漏芦抗肺癌活性部位的主要成分为三萜类、甾醇类和植物激素类等。结论漏芦体内外抗肺癌作用最强的部位为正丁醇部位,该部位主要的成分为以齐墩果酸和熊果酸为代表的三萜类,以β-谷甾醇和豆甾醇为代表的甾醇类,以β-蜕皮甾酮、漏芦素甲为代表的植物激素类。

抗肺癌单链抗体融合胸腺素α1重组体的构建

以重组质粒pET39-Tα1为模板,PCR获得Tα1基因,连接到pUCm-T载体上.对质粒pET22-ScFv、pUCm-T-Tα1双酶切,回收相应片段,将Tα1连接到ScFv的C端,成功构建pET22-ScFv-Tα1重组体.

刺五加果多糖ASPF的结构表征及其体外抗肺癌活性研究

从刺五加果实体中纯化得到一种均一分子量多糖ASPF,对其结构表征及体外抗肺癌活性进行研究。将提取得到的粗多糖通过DEAE-52柱层析分离得到3个组分,进行体外抗肺癌活性筛选后,将ASPB-3通过Sephadex G-200凝胶柱色谱得到ASPF,选择GPC、IR、HPLC方法对该多糖进行结构解析,并采用CCK-8法研究其对肺癌细胞体外存活率的影响。测得ASPF的糖醛酸含量为22.9%,是一种酸性果胶类结构多糖,其相对分子质量MW为9.7462×10^(4),IR扫描结果显示其具有吡喃环结构,单糖测定结果显示其由鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、木糖、半乳糖、阿拉伯糖6种单糖组成,对A549细胞存在抑制效果,其机制可能与作用于凋亡基因Bcl-2/Bax有关。ASPF对人肺癌细胞具有一定体外抑制作用。

抗癌膏穴位贴敷抗肺癌作用机制的研究

目的 观察抗癌膏穴位贴敷抗肺癌的作用机制。方法 用C5 7BL/6近交系小鼠 ,瘤细胞悬液皮下接种法建模。建模次日开始穴位贴敷治疗 ,隔日治疗 1次 ,共治疗 5次。末次治疗 2 4h后 ,处死小鼠 ,测定癌细胞周期、脾淋巴细胞转化率和NK细胞活性。结果 抗癌膏穴位贴敷能使癌细胞G0 /G1期细胞比例增多 ,S期细胞比例减少 ,细胞增殖指数下降 ;抗癌膏穴位贴敷对荷瘤鼠脾淋巴细胞转化率和NK细胞活性无显著影响。

医院制剂参芪益肺糖浆药理分析及抗肺癌功效

目的分析参芪益肺糖浆药理,探讨其抗肺癌功效。方法将67例肺癌患者随机为两组,对照组(32例)以EP方案化疗,结合组(35例)在对照组基础上加用参芪益肺糖浆,观察两组疗效。结果结合组患者血液流变学指标低于对照组,有效稳定率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论参芪益肺糖浆补脾肺之气,益虚损,抗凝,提升白细胞,有较强抗肺癌功效。

傣百解药用部位和非药用部位体外抗肺癌活性对比研究

目的:研究傣百解药用部位根和非药用部位地上部分乙醇提取物不同极性萃取物体外抗肺癌细胞的活性,筛选出傣百解的抗肿瘤活性部位,分析地上部位作为替代药材的可行性。方法:将傣百解地上部位和根干燥粉碎,用95%乙醇回流提取,减压浓缩得到醇提取物;以水分散后,依次用乙酸乙酯和正丁醇萃取,得到乙酸乙酯部位(A1和B1)、正丁醇部位(A2和B2)和水部位(A3和B3)。采用MTT法测定不同浓度部位对人肺癌细胞A549和H1299增殖的影响。结果:傣百解地上部位和根对两种肺癌细胞株均有一定的细胞毒活性,地上部位的抗肿瘤活性优于根,两个部位中A1和B1萃取物抑制肿瘤细胞增殖活性最强,对A549肿瘤细胞的IC_(50)分别为51.28μg/mL和117.18μg/mL,对H1299肿瘤细胞的IC50分别为63.12μg/mL和95.11μg/mL。结论:傣百解地上部位的抗肿瘤活性优于根,具有替代可行性。

抗肺癌中药可望获美FDA批准

由华裔美籍科学家孙士铣研发的抗肺癌食品“华阳复方”，2004年年底展开上市前的第Ⅲ期临床试验，预计最快2006年可取得美国FDA药证。如果顺利，该品将是中草药有史以来第一次取得美国核准的药证。