^(131)I标记抗肺癌单克隆抗体1E2在荷瘤小鼠体内分布及对小鼠移植瘤作用

目的:分析碘-131(131I)标记抗肺癌单克隆抗体1E2在荷Lewis肺癌小鼠体内分布,评估瘤内注射碘-131标记抗肺癌单克隆抗体1E2(131I-1E2)对小鼠Lewis肺癌的生长抑制作用。方法:C57BL/6小鼠右后腿皮下接种Lewis肺癌细胞(LLC)1×106/只,建立荷Lewis肺癌小鼠模型,免疫组化检测Lewis肺癌细胞(LLC)膜上1E2抗原-氨甲酰磷酸合成酶1(CPS1)的表达。131I标记1E2单抗(氯胺T法),检测标记率、放化纯度、放射性比活度。荷瘤小鼠尾静脉注射标记抗体131I-1E218.5MBq,观察其不同时间点在小鼠体内的分布。成瘤后小鼠随机分为4组,分别瘤内注射生理盐水0.1ml(空白对照),1E2单抗3μg(阳性对照),131I-IGg18.5MBq(阴性对照),131I-1E218.5MBq。治疗后每周2次测定肿瘤大小,21天后处死小鼠观察肿瘤组织病理学改变,检测肿瘤体积、重量,计算抑瘤率。结果:1E2抗原-CPS1主要在肿瘤细胞膜表达,131I-1E2标记率为67.73%,放化纯度为95.63%。131I-1E2主要分布在肿瘤组织,治疗后3周试验组肿瘤体积为(0.75±0.15)cm3,重量为(1.60±0.19)g,抑瘤率78.30%,与对照组间比较差异有统计学意义(P<0.01),对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组与对照组间病理学差异显著。结论:131I-1E2瘤内注射可抑制肿瘤的生长,具有潜在的临床应用价值,有可能成为新的肿瘤治疗靶向药物。

碱性成纤维生长因子单克隆抗体联合伊立替康抑制小细胞肺癌H223细胞的增殖

目的探讨碱性成纤维生长因子(bFGF)单克隆抗体与伊立替康联合应用体外对抑制小细胞肺癌细胞株增殖和凋亡的作用及可能机制。方法 CCK8检测bFGF单克隆抗体联合伊立替康对小细胞肺癌株H223增殖的抑制作用。Annegin V-FITC/PI染色流式细胞仪检测新型bFGF单克隆抗体联合伊立替康对小细胞肺癌株H223凋亡的影响。Western blotting分析bFGFm Ab联合CPT-11对AKT和ERK1/2磷酸化水平的影响。结果 bFGF单克隆抗体、伊立替康剂量依赖性抑制小细胞肺癌株H223的增殖,bFGF单克隆抗体组、伊立替康组及bFGF单克隆抗体联合伊立替康组对小细胞肺癌株H223的增殖抑制率分别为18.73%、21.96%、54.30%,联合用药组抑制率明显高于单药组(P<0.05)。bFGF单克隆抗体、伊立替康剂量依赖性诱导小细胞肺癌株H223的凋亡,bFGF单克隆抗体组、伊立替康组及bFGF单克隆抗体联合伊立替康组诱导小细胞肺癌株H223的早期凋亡率分别为2.7%、4.3%、6.5%,联合用药组凋亡率明显高于单药组(P<0.05)。bFGF单克隆抗体组、CPT-11组及bFGF单克隆抗体联合CPT-11组可明显抑制p-AKT蛋白和p-ERK1/2蛋白的水平,差异有显著性,而对AKT、ERK1/2蛋白则影响不大。bFGF抗体联合CPT-11一方面通过抑制p-AKT蛋白和p-ERK1/2蛋白的水平来抑制肿瘤细胞的增殖和转移。结论 bFGF单克隆抗体联合伊立替康对小细胞肺癌株H223具有协同抑制作用,其机制与抑制细胞增殖和促进细胞凋亡有关。信号通路分析结果表明bFGF单克隆抗体联合伊立替康能有效阻断与bFGF相关的MAPK/ERK和PI3K/AKT信号通路。

抗PD -1单克隆抗体治疗晚期肺癌不良反应的观察与护理

目的总结54例程序性死亡受体-1(抗PD-1)单克隆抗体治疗晚期肺癌患者的不良反应与护理对策。方法对54例晚期肺癌患者进行272次抗PD-1单克隆抗体输注,观察免疫相关不良反应。结果54例患者中出现5例甲状腺功能减退,2例免疫相关性肺炎,2例皮肤血管瘤,1例红疹瘙痒,1例银屑病复发,1例一过性发热。其余患者无不良反应。结论应用抗PD-1单克隆抗体治疗晚期肺癌出现免疫相关不良反应时,通过密切观察病情变化,提高对免疫相关不良反应症状的认知,采用恰当的护理措施,使患者增强战胜疾病的信心,能够有效配合完成治疗。

抗PD-1单克隆抗体联合CIK细胞对肺癌细胞株杀伤作用的研究

目的:研究程序性死亡受体1(program cell death-1,PD-1)单克隆抗体联合细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cells,CIK cells)对肺癌细胞株的杀伤作用及相关机制,探究该治疗方法在肺癌治疗中的可行性。方法:患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)在体外采用多种细胞因子诱导为CIK,并用流式细胞术(flow cytometry,FCM)分析CIK细胞的表型。培养A520及H1975肺癌细胞,利用FCM检测其表面HLA-ABC,HLA-A2,HLA-DR及PD-L1的表达情况。将CIK细胞和抗PD-1单抗Nivolumab单独或者联合作用于A520及H1975肺癌细胞。用ELISPOT法测定不同组γ干扰素(interferon gamma,IFN-γ)的释放,用CCK8法检测CIK细胞对肺癌细胞株的杀伤率。结果:CIK细胞对于肺癌细胞株的杀伤随着效靶比(effect target ratio,E∶T)的增加而加强;对于PD-L1高表达的肺癌细胞,Nivolumab与CIK细胞联合使用对肺癌细胞株的杀伤优于单一的CIK细胞及Nivolumab。结论:对于PD-L1高表达的A520肺癌细胞,PD-1单抗Nivolumab能够提升CIK细胞的杀伤作用,而对于PD-L1表达水平低的H1975细胞,Nivolumab不能提升CIK细胞的杀伤作用。

抗体偶联药物抗HER2单抗-MCC-DM1细胞毒活性检测方法的建立及其检测效果评价

目的:建立抗体偶联药物(antibody-drug-conjugate,ADC)抗人类表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor-2,HER2)人源化单抗-MCC-DM1的细胞毒活性检测方法,并评价该药抗体偶联前后药物细胞毒活性的变化。方法:供试品为抗HER2-MCC-DM1原液及成品各3批,以抗HER2人源化单抗和抗HER2单抗-MCC-DM1标准品为参考品,利用CCK-8法、双荧光染色实验分别检测供试品和参考品对人乳腺癌BT-474细胞增殖的抑制作用,计算供试品相对百分效价,并比较抗体偶联前后该药细胞毒活性的改变;光学显微镜和荧光显微镜观察抗体偶联前后对BT-474细胞生存的影响。结果:抗HER2-MCC-DM1供试品及参考品在肿瘤细胞增殖抑制实验中均存在量效关系。3批原液和3批成品各经3次测定,对B7-474细胞增殖抑制活性的相对百分效价平均值在(92.50±8.80)%^(115.14±6.09)%,变异系数均小于15%。与抗HER2单抗原液相比,对应批次的抗HER2-MCC-DM1原液和成品各经3次测定,细胞增殖抑制活性平均值分别为偶联修饰前抗体活性的(326.72±21.58)%和(315.76±34.90)%。与偶联前抗体组相比,抗体偶联药物组细胞固缩和死亡明显增多。结论:所建立的体外细胞增殖抑制法可用于抗体偶联药物抗HER2-MCC-DM1的细胞毒活性检测,其重复性好、准确性高,可应用于ADC药物的质量控制及有效性评价。

抗CXCR4单克隆抗体对HL-60细胞粘附性及Bcl-2、Fas蛋白表达的影响

本研究通过观察抗CXCR4单克隆抗体 (12G5 )对HL 6 0细胞粘附性及Bcl 2、Fas蛋白表达的影响 ,探讨趋化因子SDF 1在维持HL 6 0细胞生存中的作用。培养HL 6 0细胞 ,并再与骨髓基质细胞共培养 ,在抗CXCR4单克隆抗体阻断SDF 1生物活性后 ,观察骨髓基质层上HL 6 0细胞的粘附情况并测定其粘附率 ;应用免疫组织化学技术检测HL 6 0细胞Bcl 2及Fas蛋白的表达。结果显示 ,12G5显著降低HL 6 0细胞的粘附率 ,与此同时Bcl 2表达下调 ,Fas表达上调。结论 :抑制SDF 1活性可一定程度地阻抑白血病细胞生存 ,促进凋亡。

GAGE7抗体、MAGE-A1抗体、雌激素E2联合检测对非小细胞肺癌的早期诊断价值分析

目的 分析GAGE7抗体、MAGE-A1抗体、雌激素E2联合检测对非小细胞肺癌的早期诊断价值。方法 选取NSCLC患者117例为肿瘤组,同期选择BPL患者57例为良性组;同时,健康体检者90例为对照组。全部研究对象入院后清晨抽取其肘静脉血3 ml,检测其血清肿瘤标志物GAGE7抗体、MAGE-A1抗体和雌激素E2浓度值。对比各组受试人员血清中GAGE7抗体、MAGE-A1抗体和雌激素E2的相对水平;分析早期NSCLC患者与肺部良性疾病患者、正常人血清中GAGE7抗体、MAGE-A1抗体和雌激素E2的AUC、灵敏度、特异度。计算GAGE7抗体、MAGE-A1抗体和雌激素E2对NSCLC的联合诊断价值。结果 肿瘤组患者中MAGE-A1抗体、GAGE7抗体、雌激素E2的表达水平明显高于良性组和对照组(P<0.05)。早期NSCLC患者与肺部良性疾病患者血清中GAGE7抗体、MAGE-A1抗体和雌激素E2的灵敏度、特异度分别为75%、62%,80%、62%,82%、63%。早期NSCLC患者与健康体检者血清中GAGE7抗体、MAGE-A1抗体和雌激素E2的灵敏度、特异度分别为84%、72%,87%、72%,88%、75%。血清中GAGE7抗体、MAGE-A1抗体和雌激素E2联合对早期NSCLC的诊断的的灵敏度为92.31%,特异度为73.68%。结论 GAGE7抗体、MAGE-A1抗体、雌激素E2联合检测对早非小细胞肺癌的诊断有重要价值。

意向放松训练在抗PD-1单克隆抗体治疗晚期肺癌患者中的应用

目的 探究意向放松训练在抗PD-1单克隆抗体治疗晚期肺癌患者中的应用。方法 选取医院2018年8月—2021年8月收治的抗PD-1单克隆抗体治疗晚期肺癌患者158例为研究对象,按照组间基本特征具有可比性的原则将其分为观察组与对照组,每组79例。对照组行常规护理,观察组加用意念放松训练。比较两组心理状态、癌因疲乏、生活质量。结果 干预前,两组心理状态各项评分比较差异无统计学意义(P>0.05);干预后,观察组心理状态各项评分均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。干预前,两组癌因疲乏各项评分比较差异无统计学意义(P>0.05);干预后,观察组癌因疲乏各项评分均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。干预前,两组生活质量各项指标评分比较差异无统计学意义(P>0.05);干预后,观察组生活质量各项指标均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论意向放松训练可以改善在抗PD-1单克隆抗体治疗晚期肺癌心理状态,降低癌因性疲乏,并提高生活质量。

乙型肝炎病毒核糖核酸酶H(HBV-RNaseH)蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及初步鉴定

目的建立能稳定分泌抗乙型肝炎病毒核糖核酸酶H1及H2(HBVRNaseH1及H2)重组蛋白单克隆抗体(McAb),并对其生物学活性进行实验室鉴定。方法用重组HBVRNaseH1及H2蛋白为抗原免疫BALB/c/小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,经有限稀释克隆3次后制备分泌McAb的杂交瘤细胞株,并用酶免疫(EIA)法对其分泌抗体进行初步鉴定。结果融合后的阳性克隆中筛选出4株能稳定分泌McAb的杂交瘤细胞株,命名为H1C6、D3;H2E2、F4。这4株McAb与HBVRNaseH1及H2重组抗原均有良好的反应性,杂交瘤培养上清的EIA抗体滴度为1∶100～1∶200,其中2株诱生的同系小鼠腹水滴度为1∶800,1∶1000。这4株McAb均为IgG1亚型。结论该McAb的制备,可为HBV感染者血清和肝组织中抗原检测方法的建立和生物工程药物的研制创造条件。

IL-12瘤苗与^(131)I-1E2协同抗瘤作用研究

目的:建立稳定表达IL-12的小鼠Lewis肺癌瘤苗LLC/mIL-12;评估尾静脉注射^(131)I-1E2(^(131)I标记抗肺癌单克隆抗体1E2)抑瘤效果及LLC/mIL-12对^(131)I-1E2靶向治疗增效作用。方法:制备LLC/mIL-12;Na^(131)I标记1E2;建立C57BL/6小鼠移植瘤模型,比较单纯尾静脉注射^(131)I-1E2或联合瘤内注射LLC/mIL-12时^(131)I-1E2在小鼠体内分布。成瘤小鼠随机分组。为GT、LLC/mIL-12)、RIT(Radioimmunotherapy,放射免疫治疗)、PBS和GT+RIT组,治疗后测量肿瘤体积及重量,计算抑瘤率,检测CTL和NK活性。结果:^(131)I-lE2能有效靶向肿瘤组织,尤其联合LLC/mIL-12。与单用GT或RIT比较,GT+RIT能有效地上调IL-12表达、抑制肿瘤生长,GT及联合组有大量CD4^+、CD8^+淋巴细胞浸润,NK和CTL细胞活性增强。联合组。^(131)I-1E2更多积聚在肿瘤组织。结论:^(131)I-1E2明显抑制肿瘤生长,具有潜在的临床应用价值,有可能成为新的肿痛靶向治疗药物。

猪瘟病毒E2糖蛋白A1抗原亚区的表达

猪瘟病毒(CSFV)囊膜结构糖蛋白E2(gp55)是诱导机体产生中和抗体及激发保护性免疫应答的主要抗原蛋白。E2存在4个不同抗原区(A-D),根据中和特性和保守性差异,将A抗原区进一步划分为A1、A2、A3抗原亚区,A1抗原亚区在不同猪瘟病毒分离毒株中高度保守且诱导的单克隆抗体具有中和特性。本文采用pRSETC载体,对A抗原区2744nt～2947nt(791aa～858aa)基因片段(EC)进行克隆、表达,并分析表达产物的免疫反应性。研究发现:EC表达产物能与抗猪瘟病毒Alfort毒株E2蛋白的中和性单克隆抗体c2410发生特异性结合,且此结合能被猪瘟病毒抗原或阳性血清阻断。结果表明:A1抗原亚区位于E2蛋白791～858位氨基酸区域。

一株高滴度广谱抗HFRS病毒单克隆抗体的建立

本文用抗原上有些不同的肾综合征出血热(HFRS)病毒湖北毒株HA1018免疫BALB／c小鼠，与Sp2／0细胞融合，获得分泌抗HFRS单克隆抗体(MCAb)的杂交瘤E5细胞株。McAbE5为IgG1亚类，间接免疫荧光(IFA)测定腹水抗体滴度可达1：100万。

应用单克隆抗体确定汉坦病毒囊膜糖蛋白抗原决定簇的特性(文摘)

应用一组24种抗汉坦病毒囊膜糖蛋白G1和G2的单克隆抗体(McAb)来检测抗原位点的表面分布和功能特性。用竞争结台法证明其中9种抗原位点性质不同，部分位点有重迭，有2个在G1上，7个在G2上。用血凝抑制试验和空斑减少中和试验分析表明，所有抗原位点除G1中的一种外均与病毒血凝活性有关。仅G1中的一个和G2中的2个位点具有病毒中和作用。

血清尿酸增长率对非小细胞肺癌一线接受含铂双药化疗联合抗PD-1/L1免疫治疗的疗效预测

目的:为了探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者在接受化疗联合程序性死亡受体-1/配体-1(PD-1/L1)免疫检查点抑制(ICB)治疗期间血清尿酸(UA)的动态变化对治疗效果的影响。方法:研究回顾性收集了2021年6月-2022年6月期间在南京医科大学第一附属医院接受一线化疗联合免疫治疗的晚期或不可切除的NSCLC患者82例,以无进展生存期(PFS)为主要终点。收集患者首次ICB治疗前和第一次ICB治疗3周后的血清UA值以及患者临床信息。通过绘制受试者工作特征曲线来确定尿酸增长率(GRU)最佳临界值。使用Kaplan-Meier、单因素及多因素Cox分析针对PFS进行预后分析。结果:Kaplan-Meier曲线显示,低GRU组(≤-9.36%)的PFS比高GRU组(>-9.36%)显著延长(log-rank检验P=0.001)。低GRU组中位PFS为15个月,而高GRU组中位PFS为8个月。研究中使用信迪利单抗、卡瑞利珠单抗、替雷利珠单抗或帕博利珠单抗对PFS影响的差异无统计学意义。多因素Cox回归分析显示,PD-L1表达状态以及GRU水平是NSCLC患者化疗联合免疫治疗疗效的独立预后因素。结论:NSCLC患者血清UA的降低可显著延长接受免疫治疗患者的PFS。

吉西他滨联合PD-1单抗对肺癌小鼠肿瘤体内增殖能力的影响

目的探究吉西他滨(GEM)联合程序性死亡受体-1(PD-1)单抗对肺癌小鼠肿瘤体内增殖能力的影响。方法制备肺癌小鼠模型,将40只小鼠分为空白对照组(NC组)、PD-1组、GEM组和联合组,分别给予磷酸盐缓冲液(200μL/kg)、GEM溶液(50 mg/kg)、PD-1抗体(100μg/kg)、GEM溶液和PD-1抗体(GEM溶液:50 mg/kg、PD-1抗体:100μg/kg)干预。比较4组小鼠肿瘤质量、体积、生长情况及生长抑制率;检测肿瘤微血管密度(MVD)和肿瘤细胞凋亡情况;免疫组织化学法检测肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)的阳性表达率。结果与NC组相比,PD-1组、GEM组和联合组小鼠肿瘤质量、体积均不同程度降低(P<0.05),小鼠肿瘤的生长抑制率均不同程度增加(P<0.05);且联合组小鼠肿瘤质量、体积最小,肿瘤生长抑制率[(58.5±3.21)%]最高(P<0.05);PD-1组和GEM组肿瘤质量、体积及生长抑制率无明显差异(P>0.05)。联合组小鼠肿瘤MVD(7.43±1.20)低于PD-1组(45.90±4.51)和GEM组(41.88±4.32),差异均有统计学意义(P<0.05),且PD-1组和GEM组无明显差异(P>0.05)。TUNEL结果显示,联合组小鼠肿瘤细胞凋亡率[(63.15±9.56)%]高于PD-1组[(17.35±6.41)%]和GEM组[(17.98±6.23)%],差异均有统计学意义(P<0.05),且PD-1组和GEM组无明显差异(P>0.05)。免疫组织化学结果发现,与NC组相比,PD-1组(82.54±6.31)%、GEM组(80.98±6.78)%和联合组(29.76±7.65)%肿瘤组织中VEGF阳性表达率均不同程度降低(P<0.05),且联合组明显低于PD-1组和GEM组(P<0.05),PD-1组和GEM组无明显差异(P<0.05)。结论GEM联合PD-1单抗可发挥协同作用抑制肺癌小鼠体内肿瘤生长,降低MVD及VEGF表达。

皮肌炎自身抗体检测研究进展

一些自身抗体包括抗黑素瘤分化相关基因5抗体、抗转录中介因子lγ抗体、抗核基质蛋白2抗体、抗甘氨酰-tRNA合成酶抗体、抗核小体重塑和组蛋白脱乙酰酶蛋白复合物抗体、抗组氨酰-tRNA合成酶抗体等与皮肌炎的临床表型和预后密切相关。抗黑素瘤分化相关基因5抗体、抗甘氨酰．tRNA合成酶抗体、抗组氨酰-tRNA合成酶抗体与皮肌炎并发间质性肺病有关，特别是抗黑素瘤分化相关基因5抗体与皮肌炎并发的间质性肺病的发生、病情活动和患者高死亡率显著相关。通常抗黑素瘤分化相关基因5抗体阳性的患者对常规的免疫抑制治疗疗效欠佳。抗转录中介因子1γ抗体、抗核基质蛋白2抗体与恶性肿瘤相关性皮肌炎有关。此外抗转录中介因子1γ抗体和抗核基质蛋白2抗体还与皮肌炎其他一些特征性临床表型相关，如抗转录中介因子1γ抗体阳性的患者发生银屑病样损害、手掌角化过度性丘疹明显增加，而抗核基质蛋白2抗体阳性的患者发生前臂、小腿和颈部无力更为常见。抗核小体重塑和组蛋白脱乙酰酶蛋白复合物抗体阳性患者发生间质性肺病风险和维持过长时间治疗的风险明显降低。因此临床上广泛地开展这些自身抗体的检测有助于指导皮肌炎的临床诊疗。

atezolizumab或为非小细胞肺癌患者的新福音

atezolizumab是一种人源化抗程序性死亡配体1（PD—L1）的单克隆抗体，能够抑制PD—L1和PD-1，以及PD—L1和B7—1的相互作用，激活抗肿瘤免疫。近日，美国研究人员发表一篇文章，研究人员评估fatezolizumab与多西他赛相比对以往治疗过的非小细胞肺癌患者的疗效和安全性。