抗肿瘤多肽HM-3的中和抗体活性研究

本研究检测抗肿瘤多肽HM-3在SD大鼠和食蟹猴长期毒性实验血清中中和抗体的产生及抗体活性的强弱。将SD大鼠与食蟹猴分别分成4.5,13.5,40.5mg/kg和3,9,27mg/kg3个剂量组,均每日静脉注射HM-3多肽1次,均连续给药6个月。每月取血清用ELISA法测定滴度,并用细胞迁移法测定抗体中和活性。长期给药过程中,中高剂量组的SD大鼠能产生抗体,其中少数检测到中和抗体的活性(P<0.05),而食蟹猴中能产生抗体的数量较少,且其中只有个别食蟹猴的血清中能检测到中和抗体的产生(P<0.05)。且抗体滴度与中和抗体活性不呈正相关。由此,本研究认为HM-3的抗原性较低,长期高剂量给药后极个别会产生一些低亲和力的中和抗体。

抗肿瘤多肽HM-3多克隆抗体的制备与鉴定

应用戊二醛法偶联HM-3与BSA,合成完全抗原,免疫新白兰白兔,制备HM-3多克隆抗体。同位素示踪法测定多抗效价、特异性和亲和力。结果表明:抗体的效价为1∶2000;亲和力常数经Scatchard分析计算为2.84×109L/mol,达到高敏分析要求;交叉实验结果表明抗体有较高的识别特异性。HM-3多抗的制备为放射免疫分析方法的建立奠定了基础。

PEG修饰多肽HM-3大鼠体内组织分布和排泄

研究PEG修饰抗肿瘤多肽HM-3单次尾静脉注射后在大鼠体内的组织分布特点和排泄途径,为临床试验提供依据。采用ELISA方法检测静脉注射修饰产物mPEG-SC_(20k)-HM-3后各时间点大鼠组织器官生物样品中药物的含量以及尿、粪和胆汁中mPEG-SC_(20k)-HM-3的排泄情况。大鼠单次静脉给予26mg/kg mPEG-SC_(20k)-HM-3后的组织分布试验表明,药物主要分布在大鼠肝和肾组织,其药物含量均于给药后1 h达最高,分别为(25.75±5.85)μg/g组织和(25.58±5.79)μg/g组织;大鼠静脉给予mPEG-SC_(20k)-HM-3(26 mg/kg)后从(0～104 h内)尿和粪中排泄的原型药物分别占给药总量的1.5%和0.02%;从(0～44 h内)大鼠胆汁中排泄的原型药物小于给药总量的0.1%。表明PEG修饰药物mPEG-SC_(20k)-HM-3主要分布在肝和肾组织,并主要由尿中排泄。