抗Ⅱ型胶原抗体对正常关节软骨表层组织的影响

正常大鼠关节软骨表层组织在抗Ⅱ型胶原抗体的作用下,其表层胶原纤维网状结构可出现排列紊乱,失去乳头状突起等改变,但关节软骨表层结构的这种早期退行性变化在停止关节内注射抗体一段时间后可恢复正常。

类风湿性关节炎患者血清抗Ⅱ型胶原抗体的检测及意义

目的 探讨类风湿性关节炎 (RA)患者血清抗Ⅱ型胶原 (CⅡ )抗体阳性的意义。方法 分别以人Ⅱ型胶原蛋白(HCⅡ )及牛Ⅱ型胶原蛋白CⅡ (BCⅡ )作为包被抗原进行间接ELISA法 ,检测 30例RA患者 ,对照组 (30例非RA的风湿病患者和 34例健康人 )血清抗CⅡ抗体。结果 以HCⅡ及BCⅡ作为包被抗原检测RA患者血清抗CⅡ抗体的阳性率分别约为 30 .0 %和 33.3% ;对照组血清中抗体阳性率均约为 1.6 % ;二者差异极其显著 (P <0 .0 1)。抗CⅡ抗体阳性的RA患者RF的阳性率高于抗CⅡ抗体阴性的RA患者。与HCⅡ和BCⅡ均发生阳性反应的血清 8例 ,均为早期RA患者。结论 抗CⅡ抗体可作为判断RA患者病情的辅助手段之一 。

血清抗Ⅱ型胶原蛋白抗体检测法的建立与应用

目的建立血清抗Ⅱ型胶原蛋白抗体的ELISA法,探讨其在类风湿关节炎(RA)患者中的应用价值。方法以自提可溶性鸡Ⅱ型胶原蛋白(soluble chicken collagen type Ⅱ,SCCⅡ)作为包被抗原,优化实验条件,建立抗Ⅱ型胶原蛋白抗体间接ELISA法。对124例RA病人和54例健康人血清抗Ⅱ型胶原蛋白抗体进行检测。结果血清抗Ⅱ型胶原蛋白抗体的检测条件为:SCCⅡ包被浓度为20μg/ml;以含10%羊血清的缓冲液进行封闭、稀释血清和酶标抗体;采用双波长(450nm/630nm)进行测定。RA患者和健康人血清抗Ⅱ型胶原蛋白抗体阳性率分别为19.35%(24/124)和1.85%(1/54),两组有明显的统计学差异(P<0.01)。结论以SCCⅡ为包被抗原检测抗Ⅱ型胶原蛋白抗体可作为判断RA患者病情的一个辅助诊断指标。

血清抗Ⅱ型胶原抗体与骨关节炎关系的研究

目的研究血清中抗Ⅱ型胶原抗体水平与骨关节炎的关系。方法研究对象包括56例膝骨关节炎患者及33名健康体检者,应用酶联免疫吸附实验方法检测血清中抗Ⅱ型胶原抗体水平。结果骨关节炎患者血清中抗Ⅱ型胶原抗体水平高于对照组,有显著性差异(P<0.05)。结论骨关节炎患者血清中抗Ⅱ型胶原抗体升高,可能与骨关节炎的免疫反应有关。

类风湿关节炎患者抗人、猪两种属Ⅱ型胶原抗体检测的意义

目的 :检测类风湿关节炎 (RA)患者血清中人及猪Ⅱ型胶原抗体水平 ,探讨其在RA发病中的意义。方法 :用自提取的人、猪Ⅱ型胶原包板 ,采用改良的酶联免疫吸附法 (ELISA)测定 1 0 5例RA患者血清抗人、猪Ⅱ型胶原抗体IgG及IgA ,并与正常人 ( 1 4 0例 )及疾病对照组 ( 80例 )比较分析。同时检测患者的类风湿因子(RF)、血沉 (ESR)及C反应蛋白 (CRP)。结果 :RA患者血清中抗人Ⅱ型胶原抗体IgG、IgA阳性率分别为2 5 .3%、2 7.5 % ,抗猪Ⅱ型胶原抗体IgG、IgA阳性率分别为 2 6.9%、2 5 .6% ,显著高于正常人及疾病对照组 (P<0 .0 5 )。两种属Ⅱ型胶原抗体IgG及IgA常同时存在于同一患者中。两种属Ⅱ型胶原抗体与RF、ESR及CRP异常无相关性。结论 :RA患者血清中人及猪Ⅱ型胶原抗体水平升高 ,可能在RA的发病中起着一定的作用 ;但RA患者Ⅱ型胶原抗体阳性与疾病活动指标无明显相关 ,不能作为监测RA活动的指标。

早期骨性关节炎抗Ⅱ型胶原抗体变化的临床研究

目的研究早期骨性关节炎(OA)患者的血清中抗Ⅱ型胶原抗体含量的变化,探讨早期OA的诊断,为早期预防和治疗、力争在疾病的临床前期或亚临床期就做出诊断提供可能。方法选用早期OA的患者作为实验对象,按照Ayral X的软骨退变的关节镜分级标准进行分期。运用ELISA检测早期OA不同时期血清中的抗Ⅱ型胶原抗体的改变。结果早期OA不同时期血清中抗Ⅱ型胶原抗体水平间差异有显著意义,以Ⅱ期最高,Ⅳ期最低。结论血清中抗Ⅱ型胶原抗体做为软骨特异性代谢标志物在OA的早期明显升高,可能与骨性关节炎的免疫反应引起的早期软骨破坏有关。

抗Ⅱ型胶原抗体检测在类风湿关节炎中的临床研究

目的：了解抗Ⅱ型胶原抗体在类风湿关节炎（RA）中的临床意义.方法：以改进的酶联免疫吸附法（ELISA抗变性Ⅱ型胶原抗体水平.结果：RA患者抗变性Ⅱ型胶原抗体阳性率各为36.9%,早期RA患者36.7%.其他风湿病患者中31.6%,健康人为2.5%.抗天然Ⅱ型胶原抗体阳性RA患者类风湿因子检出率、患者对病情活动性评价高于阴性组（P0.05）.抗变性Ⅱ型胶原抗体时阳性RA患者的CRP平均水平较高.结论：抗天然Ⅱ型胶原抗体可以作为RA的一个辅助诊断指标.抗变性Ⅱ型胶原抗体的检测有助于判断RA病情活动性.

抗Ⅳ型胶原抗体—金雀异黄素偶联物体外抑制晶状体上皮细胞增殖

目的:研究抗Ⅳ型胶原抗体-金雀异黄素偶联物对人晶状体上皮细胞抗增殖作用。方法:免疫组织化学法检测偶联物与人晶状体囊膜结合的特异性;倒置显微镜细胞形态学观察;丫啶橙染色荧光显微镜观察偶联物作用下细胞形态的变化;MTT法检测偶联物抑制晶状体上皮细胞增殖的作用。结果:偶联物既保持了抗体的免疫活性,又能高效的抑制体外晶状体上皮细胞增殖。结论:通过活性酯法制备的抗Ⅳ型胶原抗体-金雀异黄素偶联物体外具有高效的抑制晶状体上皮细胞增殖的作用。

抗Ⅳ型胶原抗体与金雀异黄素耦联方法的建立及测定

目的初步探讨金雀异黄素(genistein)与抗Ⅳ型胶原抗体耦联的方法。方法采用活性酯法将抗Ⅳ型胶原抗体与金雀异黄素进行耦联;采用凝胶层析对耦联物提纯;紫外吸收光谱法和Bradford蛋白检测法检测耦联物中的金雀异黄素与抗Ⅳ型胶原抗体的克分子比;免疫组织化学法检测耦联物与人晶状体囊膜结合的特异性。结果抗Ⅳ型胶原抗体与金雀异黄素成功耦联,耦联产物中抗Ⅳ型胶原抗体与金雀异黄素克分子比为1∶439,耦联物与晶状体囊膜可特异结合。结论采用活性酯法可成功地将抗Ⅳ型胶原抗体与金雀异黄素耦联,耦联物的免疫活性良好。

抗Ⅱ型胶原抗体对类风湿性关节炎诊断价值的Meta分析

目的评价抗Ⅱ型胶原抗体对类风湿性关节炎(RA)诊断的准确性。方法计算机检索PubMed、EMBASE、Cochrane Library、CBMWeb、CSJD、CJFD等数据库,全面收集抗Ⅱ型胶原抗体对RA诊断试验的文献,依据QUADAS质量评价标准评价纳入诊断试验的质量,对结果进行Meta分析。结果最终纳入文献5篇,包括1 293个受试者。Meta分析结果显示,抗Ⅱ型胶原抗体对RA诊断的合并敏感度为0.43(0.40,0.47),合并特异度为0.89(0.87,0.91),合并阳性似然比为6.70(3.21,13.97),合并阴性似然比为0.62(0.49,0.78),合并诊断比值比为12.75(4.66,34.86),受试者工作特性曲线下面积0.7974,Q=0.7336。结论抗Ⅱ型胶原抗体对RA诊断的敏感度较低,特异度较高,结合临床不推荐抗Ⅱ型胶原抗体用于RA的初筛及常规检查,可用于确诊高度疑似病例或症状体征不明显,经金标准无法诊断的患者。

抗Ⅱ型胶原抗体水平与血清阴性类风湿关节炎疾病活动相关性分析

目的:探讨抗Ⅱ型胶原(CⅡ)抗体在血清阴性类风湿关节炎(SNRA)中的可行性。方法:用ELISA法检测35例SNRA患者以及15例非RA的其他风湿病患者和10例健康人群的血清抗CⅡ抗体水平。结果:①SNRA患者抗CⅡ抗体阳性率为28.57%,其他风湿病患者中为6.67%,健康人为0,差异有统计学意义(P<0.05);②抗CⅡ抗体阳性SNRA患者C反应蛋白(CRP)和血沉(ESR)、DAS28评分较抗CⅡ抗体阴性患者升高(P<0.05);③35例SNRA患者平均C-Ⅱ水平与ESR呈正相关(r=0.394,P=0.019),与CRP(r=0.1,P=0.566)、DAS28评分(r=0.287,P=0.094)之间无显著相关性;④不同X射线分期患者血清抗CⅡ抗体水平差异有统计学意义(P<0.05)。结论:抗CⅡ抗体与SNRA的疾病活动度有相关性,且抗CⅡ型胶原抗体的检测有助于提高SNRA的诊断,可作为辅助诊断和监测疗效的指标。

Ⅱ型胶原蛋白抗血清的制备和检测

目的:探讨Ⅱ型胶原蛋白(collagen protein typeⅡ,CⅡ)抗体产生规律,制备CⅡ抗血清。方法:采用纯化的鸡和猪CⅡ免疫新西兰白兔,每隔10 d收集血清,以改良间接ELISA法检测抗CⅡ抗体效价。结果:鸡CⅡ免疫新西兰白兔后,第10天抗体效价为1∶3 200,第20天升至1∶204 800;加强免疫后,第30天和第40天抗体效价分别达到1∶409 600和1∶819 200。猪CⅡ免疫新西兰白兔后,第10天血清中未能检测出抗体,第20天血清抗体效价为1∶3 200;加强免疫后,第30天和第40天抗体效价分别为1∶51 200和1∶102 400。结论:采用纯化的鸡和猪CⅡ免疫新西兰白兔后,经一定潜伏期血清中出现抗体,可以获得高效价抗CⅡ抗体血清。抗体产生情况符合机体初次及再次免疫应答的有关规律,但血清抗体产生的潜伏期和效价与不同种属来源的胶原蛋白有关。

血管活性肠肽抑制实验性类风湿性关节炎自身抗体表达的研究

目的研究血管活性肠肽(VIP)是否对类风湿性关节炎(RA)具有抑制作用以及其作用机制。方法通过利用建立的胶原诱导的实验性RA大鼠模型(CIA),注射VIP,观测大鼠的发病率和严重程度,并检测大鼠血清中的抗胶原抗体水平。结果VIP对CIA有显著的抑制作用,明显降低了CIA的发病率和关节损伤程度,显著降低大鼠抗胶原抗体水平。结论本研究成功建立了CIA,VIP对CIA的抑制作用与抑制抗胶原抗体水平有关。

特发性肺间质纤维化血清抗体检测的探讨

应用被动血凝试验技术，对２４例不同肺间质病病人观察其血清中是否存在抗肺胶原Ⅲ型抗体。结果，特发性肺间质纤维化（ＩＰＦ）血清凝集试验阳性例数为９／１０，特异性为８０％。提示被动血凝试验技术可作为ＩＰＦ的诊断方法之一。

阿克他利对Ⅱ型胶原性关节炎小鼠的治疗作用及部分机制研究

目的 研究阿克他利 (Acta)对小鼠Ⅱ型胶原性关节炎 (CIA)的治疗作用。方法 采用Ⅱ型胶原 (CⅡ )乳剂皮内注射诱导的小鼠CIA模型。在此基础上 ,检测小鼠足肿胀、免疫功能的改变 ,以及对CⅡ的迟发性变态反应 (DTH)和血清中抗CⅡ抗体的测定 ,同时进行了病理组织学的检查。结果 Acta(10 ,30 ,90mg·kg-1)ig对CⅡ诱导的小鼠足肿胀有明显的抑制作用 ;体外研究发现 ,Acta(10 ,30 ,90mg·kg-1)能使CIA小鼠过高的ConA增殖反应和IL 2的产生恢复至接近正常 ,同时对CIA小鼠过高的IL 1产生有明显的抑制作用 ;Acta(10 ,30 ,90mg·kg-1)ig可以明显减轻CⅡ诱发迟发性变态反应 (DTH) ,但Acta对CIA小鼠体内的抗体的产生无显著影响。病理学检查表明 ,Acta(10 ,30 ,90mg·kg-1)ig可以减轻CIA小鼠的骨膜增生和软骨破坏。结论 Acta对CIA小鼠具有治疗作用 ,该作用可能是通过细胞免疫调节实现的。

非T细胞结合肽(FNS007)对小鼠胶原性关节炎的抑制作用及其机制

目的研究非T细胞结合肽(FNS007,又称NTAP)对小鼠Ⅱ型胶原(CⅡ)诱导的关节炎(CIA)的抑制作用及其机制。方法牛CⅡ加弗氏佐剂诱导小鼠胶原性关节炎动物模型。发病小鼠随机分为6组:空白对照组、模型组、阳性药(阿巴西普)组、FNS007低剂量(1.2 mg·kg^(-1))、中剂量(2.4 mg·kg^(-1))和高剂量(4.8 mg·kg-1)治疗组,发病入组当天尾静脉注射给药,以后隔天1次,直至治疗结束。给药后d 28处死小鼠。给药期间测量小鼠爪厚度和踝关节宽度;关节评分法检测关节炎发生情况;实验结束后,酶联免疫吸附法(ELISA)测定小鼠血清中干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)和抗CⅡ抗体水平;X线分析FNS007对CIA小鼠4爪骨损伤的作用;对小鼠踝关节进行组织病理学检查。结果与模型组比较,FNS007给药后能明显抑制CIA小鼠的爪厚度和踝关节宽度,明显降低小鼠的关节炎症评分,明显降低血清IFN-γ、IL-6及抗CⅡ抗体水平,小鼠X线评分降低,踝关节的病理损伤明显减轻。结论FNS007对CⅡ诱导的小鼠胶原性关节炎有明显抑制作用,其机制为竞争抑制T细胞活化,抑制CIA小鼠体内致炎性细胞因子的分泌,抑制抗CⅡ抗体的产生,减轻组织损伤和骨破坏,从而对小鼠CIA发挥治疗作用。

Ⅱ型胶原介导的细胞毒免疫学实验

目的检测用猪Ⅱ型胶原免疫新西兰大白兔的细胞免疫状态。方法用Ⅱ型胶原免疫新西兰大白兔60天,定期抽取血浆检测抗Ⅱ型胶原抗体;第60天取兔的外周血淋巴细胞,取兔脾细胞、淋巴结分离淋巴细胞,进行体外二次Ⅱ型胶原刺激,检测由此引起的反应性的细胞增殖规津。实验分为二组,第一组加入不同浓度PHA作阳性对照,并测定非特异性免疫;第二组加入不同浓度Ⅱ型胶原,检测特异性免疫。结果正常兔的淋巴细胞在PHA剌激下发生增殖,但对Ⅱ型胶原的第一次剌激不发生增殖,而免疫兔对PHA和Ⅱ型胶原的剌激均能发生显著的增殖。结论表明异种Ⅱ型胶原在一定浓度下,可以引起免疫兔的抗Ⅱ型胶原抗体的升高,并可引起兔脾、外周血淋巴细胞增殖,异种Ⅱ型胶原能在体内引起细胞免疫。

类风湿性关节炎自身抗体及其临床意义

类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种常见的致畸性系统性自身免疫性疾病,滑膜炎持久反复发作关节内软骨和骨质被破坏关节功能障碍是RA的主要临床特征。其病因和发病机制尚未阐明,患者在发病两年内即可出现不可逆的骨关节破坏,最后将导致关节强直、畸形和功能丧失。大量研究显示多种自身抗体对于RA早期诊断和鉴别诊断,了解病情发展,监测药物治疗效果,判断疾病的严重程度和预后均有重要价值。现将RA患者自身抗体的研究进展综述如下。