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抗胸腺素α1(Tα1)多克隆抗体的纯化及转基因藻中Tα1的检测
被引量:
2
1
作者
黄小花
周克夫
+2 位作者
章军
刘仁海
徐虹
《厦门大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第B08期122-125,共4页
采用不同浓度的硫酸铵分级盐析纯化抗Tα1多克隆抗体,然后用不同量的牛血清白蛋白(BSA)与兔抗Tα1抗体进行中和,以去除血清中的抗BSA抗体,并利用纯化后的抗Tα1多克隆抗体检测转基因藻中Tα1.结果表明:采用25%(NH4)2SO4进行分离纯化,并...
采用不同浓度的硫酸铵分级盐析纯化抗Tα1多克隆抗体,然后用不同量的牛血清白蛋白(BSA)与兔抗Tα1抗体进行中和,以去除血清中的抗BSA抗体,并利用纯化后的抗Tα1多克隆抗体检测转基因藻中Tα1.结果表明:采用25%(NH4)2SO4进行分离纯化,并将BSA加入到血清中进行中和,37℃处理30min,BSA的量与血清的比例以1μL血清+15μgBSA可达到中和血清中的抗BSA抗体的目的.获得的抗Tα1抗体效价与未进行分离前基本相同,并且阴性本底低.采用ELISA方法检测野生藻和转基因藻中的Tα1,转基因藻的Tα1OD450值比野生藻的高2.1倍以上,提示Tα1在转基因藻中成功表达.实验证明,此方法能有效纯化抗胸腺素α1多克隆抗体,获得特异性强的抗胸腺素Tα1抗体,并且效价不受影响.
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关键词
抗胸腺素α1
酶联免疫吸附反应
分离
纯化
抗
体
转基因藻
下载PDF
职称材料
题名
抗胸腺素α1(Tα1)多克隆抗体的纯化及转基因藻中Tα1的检测
被引量:
2
1
作者
黄小花
周克夫
章军
刘仁海
徐虹
机构
厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室
出处
《厦门大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第B08期122-125,共4页
基金
国家海洋863课题(819 04 03)资助
文摘
采用不同浓度的硫酸铵分级盐析纯化抗Tα1多克隆抗体,然后用不同量的牛血清白蛋白(BSA)与兔抗Tα1抗体进行中和,以去除血清中的抗BSA抗体,并利用纯化后的抗Tα1多克隆抗体检测转基因藻中Tα1.结果表明:采用25%(NH4)2SO4进行分离纯化,并将BSA加入到血清中进行中和,37℃处理30min,BSA的量与血清的比例以1μL血清+15μgBSA可达到中和血清中的抗BSA抗体的目的.获得的抗Tα1抗体效价与未进行分离前基本相同,并且阴性本底低.采用ELISA方法检测野生藻和转基因藻中的Tα1,转基因藻的Tα1OD450值比野生藻的高2.1倍以上,提示Tα1在转基因藻中成功表达.实验证明,此方法能有效纯化抗胸腺素α1多克隆抗体,获得特异性强的抗胸腺素Tα1抗体,并且效价不受影响.
关键词
抗胸腺素α1
酶联免疫吸附反应
分离
纯化
抗
体
转基因藻
Keywords
thymosin
α1
antibody
ELISA
purification.
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抗胸腺素α1(Tα1)多克隆抗体的纯化及转基因藻中Tα1的检测
黄小花
周克夫
章军
刘仁海
徐虹
《厦门大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2004
2
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