期刊文献+
共找到5篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
家蚕抗菌肽-死亡素杂合肽基因在大肠杆菌中的克隆与表达 被引量:7
1
作者 翁宏飚 牛宝龙 +1 位作者 孟智启 徐孟奎 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期352-355,共4页
A 44-residue hybrid peptide (CB (1-24)-Arg-Ser-Tyr-Tan (4-21)) incorporating 1-24 residues of cecropin B (CB) and 4-21 residues of thanatin (Tan) was designed and constructed. The CB-Tan gene was cloned into expressio... A 44-residue hybrid peptide (CB (1-24)-Arg-Ser-Tyr-Tan (4-21)) incorporating 1-24 residues of cecropin B (CB) and 4-21 residues of thanatin (Tan) was designed and constructed. The CB-Tan gene was cloned into expression plasmid pGEX-3X and expressed in E.coli BL21. The fusion protein was purified by affinity chromatography. After digested with enterokinase the gene product released with antibacterial activity and gave one band in Tricine-SDS-PAGE. 展开更多
关键词 家蚕 抗菌肽-死亡素杂合肽基因 大肠杆 克隆 表达 CEC B-Tan基因 表达 活性
下载PDF
天蚕抗菌肽A与蜂毒素杂合肽基因的合成及在大肠杆菌中的克隆与表达 被引量:14
2
作者 朱嘉明 刘飞鹏 +2 位作者 李月琴 钟振宇 张娜 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期31-34,共4页
根据天蚕抗菌肽A(cecropinA ,CA)N端第 1~ 7个氨基酸残基、蜂毒素 (melittin ,M )N端第 5~ 12个氨基酸残基 ,以大肠杆菌偏爱的密码子设计合成了杂合肽CA(1~ 7) -M(5~ 12 )基因 ,同载体 pGEMEX - 1连接后转化大肠杆菌JM 10 9,经打点... 根据天蚕抗菌肽A(cecropinA ,CA)N端第 1~ 7个氨基酸残基、蜂毒素 (melittin ,M )N端第 5~ 12个氨基酸残基 ,以大肠杆菌偏爱的密码子设计合成了杂合肽CA(1~ 7) -M(5~ 12 )基因 ,同载体 pGEMEX - 1连接后转化大肠杆菌JM 10 9,经打点杂交筛选和序列测定 ,获得一个与设计一致的克隆。将此克隆中的质粒亚克隆至JM10 3(DE3) ,经IPTG诱导、BrCN切割和抑菌圈试验表明 ,克隆的杂合肽基因在JM 10 9(DE3)中获得了表达。 展开更多
关键词 天蚕A 蜂毒 基因克隆 表达
下载PDF
蛙皮素-蜂毒素杂合肽基因在大肠杆菌中的克隆与诱导表达 被引量:4
3
作者 黄音 刘飞鹏 +1 位作者 周天鸿 朱嘉明 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期207-210,共4页
A hybrid peptide gene was designed and synthesized. Its encoding peptide is constructed from residues 3~14 of magainin and residues 1~13 of melittin. The MA E gene was cloned into plasmids pUC18 and pBV220. By DNA s... A hybrid peptide gene was designed and synthesized. Its encoding peptide is constructed from residues 3~14 of magainin and residues 1~13 of melittin. The MA E gene was cloned into plasmids pUC18 and pBV220. By DNA sequencing, the whole sequences of this gene is confirmed to be correct. The recombinant plasmid pBMA\|E was expressed in \%E.coli\% DH5α. A gene product band can be seen with Tricine\|SDS\|PAGE. The MA E hybrid peptide was purified by immobilized metal affinity chromatography. Bioactivity assay was carried out in liquid turbidity method. The bactericide value to \%E.coli\% K 12 D 31 is 0.182. 展开更多
关键词 MA-E基因 大肠杆 活性 表达 克隆 蛙皮-蜂毒基因
下载PDF
天蚕素A-蜂毒素杂合肽用pBV220载体的表达、纯化和活性测定 被引量:11
4
作者 王云起 刘飞鹏 +2 位作者 李月琴 张欣 蔡继业 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期29-33,共5页
为提高抗菌肽的表达,在抗菌肽的N端融合了1段酸性小肽以中和表达产物对宿主的毒性;并将融合肽基因同向串连成多拷贝,在大肠杆菌中获得了较高的表达。用化学合成法分别合成了编码天蚕素A(1-8)-蜂毒素(1-10)杂合肽和酸性小肽的DNA片段,首... 为提高抗菌肽的表达,在抗菌肽的N端融合了1段酸性小肽以中和表达产物对宿主的毒性;并将融合肽基因同向串连成多拷贝,在大肠杆菌中获得了较高的表达。用化学合成法分别合成了编码天蚕素A(1-8)-蜂毒素(1-10)杂合肽和酸性小肽的DNA片段,首先将其拼接成融合肽的完整基因,然后通过前后接头将融合肽基因连接成两侧具有EcoRI和SalI酶切位点的同向串连的多拷贝基因。将5份拷贝的基因克隆至pBV220表达载体,转化E.coliDH5α,温度诱导得到表达量为35%的融合蛋白。表达产物主要以包涵体形式存在,将包涵体溶解,经Ni2+-NTA琼脂糖亲和层析获得纯化的融合蛋白。融合蛋白再经CNBr切割和阳离子交换层析,得到纯化的抗菌肽,经蛋白质N端测序确认序列正确。琼脂糖扩散法和液相测定法证明了纯化的抗菌肽具有抗菌活性。 展开更多
关键词 天蚕A-蜂毒 pBV220载体 基因表达 基因纯化 基因活性 免疫系统
下载PDF
蜂毒素与死亡素杂合肽在毕赤酵母中的融合表达及其生物活性研究
5
作者 陈柏东 张展 +8 位作者 李静 陈淑慧 杨杨 梵高 柒启恩 朱翠 冯鑫 刘燊 张辉华 《广东饲料》 2021年第12期24-28,共5页
为获得新型抗菌肽饲料添加剂,设计将蜂毒素的5-12(VLKVLTTG)氨基酸和死亡素的4-21(KPVPIIYCNRRTGKCQRM)氨基酸拼接成蜂毒素与死亡素杂合肽(MT,Melittin-thanatin),并通过基因工程在酵母中进行重组表达。全基因合成MT-麦芽糖结合蛋白(MBP... 为获得新型抗菌肽饲料添加剂,设计将蜂毒素的5-12(VLKVLTTG)氨基酸和死亡素的4-21(KPVPIIYCNRRTGKCQRM)氨基酸拼接成蜂毒素与死亡素杂合肽(MT,Melittin-thanatin),并通过基因工程在酵母中进行重组表达。全基因合成MT-麦芽糖结合蛋白(MBP,Maltose binding protein)DNA序列,使用EcoRI和XbaI对MT-BMP基因序列和表达载体pGAPZa A进行酶切和连接,成功构建pGAPZαA-MBP-MT毕赤酵母特异表达载体。使用AvrⅡ酶切表达载体并使其线性化,电转入GS115感受态中并筛选出阳性酵母克隆。阳性酵母克隆在YPD培养基中诱导分泌重组蛋白,通过亲和层析柱和纯化系统进行纯化,获得了48 kD左右的重组MT蛋白,纯化的MT蛋白对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌具有明显的抑制作用。综上,本研究获得了具有生物活性的蜂毒素-死亡素杂合肽,下一步拟开展该杂合肽的饲料添加剂相关功能研究。 展开更多
关键词 蜂毒 死亡 毕赤酵母
下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部