抗菌肽BNBD5调节肺脏先天免疫抵御胸膜肺炎放线杆菌感染的研究

【目的】探究抗菌肽牛中性粒细胞β防御素5(bovine neutrophilβ-defensins 5,BNBD5)调节肺脏先天免疫抵御胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)感染的作用,为防控猪胸膜肺炎提供试验基础和理论支持。【方法】将30只雌性BALB/c小鼠随机分为3组,即正常对照组(Con)、APP感染对照组(APP)、抗菌肽BNBD5预处理后感染APP组(B5),每组10只,Con组小鼠鼻内给予2次PBS(20μL/只),每次间隔2 d;APP组鼻内给予2次PBS(20μL/只),间隔2 d,3 d后感染APP(107 CFU/只);B5组小鼠鼻内给予2次抗菌肽BNBD5(20μg/只),间隔2 d,3 d后鼻内感染APP(107 CFU/只),感染6 h后剖杀所有小鼠,观察肺脏和脾脏的病变,测定脏器系数和肺脏中的细菌载量;HE染色观察肺脏组织病理变化;ELISA检测肺脏组织匀浆液中的细胞因子肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin 1β,IL-1β)、IL-23、IL-17和IL-22水平;流式细胞术检测肺脏中的中性粒细胞数量。【结果】与Con组相比,APP组小鼠被毛粗乱、精神萎靡,肺脏肿大,可见明显斑块状或点状出血,镜下可见肺脏组织有明显出血和大量炎性细胞浸润,肺脏中TNF-α、IL-1β、IL-17、IL-22和IL-23细胞因子水平变化不显著(P>0.05),但均呈不同程度下降,中性粒细胞数量减少;与APP组相比,B5组小鼠精神状态较好,肺脏肿胀程度减轻,肺脏指数显著降低(P<0.05),未见明显斑块状出血,肺脏中的细菌载量极显著减少(P<0.01),肺脏中炎性细胞明显减少,肺脏组织中TNF-α、IL-1β、IL-17和IL-22水平显著升高(P<0.05),肺脏组织中中性粒细胞数量极显著增多(P<0.01)。【结论】抗菌肽BNBD5能在感染早期改善APP引起的肺脏免疫抑制,增强肺脏先天免疫杀伤胸膜肺炎放线杆菌。