中国家蚕抗菌肽CMIV基因的合成与克隆

根据从中国家蚕（Ｂｏｍｂｙｘｍｏｒｉ）蛹中提取的抗菌肽ＣＭＩＶ的氨基酸序列，设计兼顾大肠杆菌和昆虫两种不同体系偏爱密码子的ＣＭＩＶ基因序列；用固相合成法合成６段寡聚核苷酸，通过二步电泳法快速纯化之，复性，连接并克隆到ｐＵＣ９中，转化大肠杆菌ＪＭ１０９；在Ｘ－Ｇａｌ、ＩＰＴＧ、ＡｍｐＬＢ平板上挑选白色克隆，用限制性酶谱法筛选含有合适插入片断的质粒ＤＮＡ；然后通过序列分析得到了含有与设计完全一致的ＣＭＩＶ基因序列的阳性克隆。