抗菌肽对鱼类肠道菌群及免疫功能影响的研究进展

抗菌肽是先天免疫的组成部分,构成许多生物体抵御入侵病原体的第一道防线。抗菌肽是基因编码的(小于100个氨基酸),具有空间排列的疏水性和阳离子氨基酸特性的两性分子,具有多种生物学功能。抗菌肽(作为饲料添加剂)能够改善水产动物的生长性能,增强水产动物机体的抗病能力。鱼类肠道承担着营养物质消化吸收的功能,同时鱼类肠道内的微生物也参与机体的免疫反应。文章对抗菌肽的来源、分类、生物学功能、抗菌机制以及抗菌肽对鱼类肠道菌群和机体免疫功能的影响进行了系统的阐述,进而分析了抗菌肽、肠道菌群、机体免疫三者的关系。为抗菌肽替代抗生素在鱼类健康养殖中的应用提供了技术指导,为揭示抗菌肽在鱼体的相关作用机制奠定基础。

金属抗菌肽SIF_(4)对大肠杆菌拓扑异构酶活性及胞内核酸合成的影响

为系统阐明金属抗菌肽SIF_(4)基于DNA拓扑异构酶靶点的非细胞质膜抑菌机理,以大肠杆菌为模式菌株,研究了金属抗菌肽SIF_(4)与基因组DNA的结合方式、对DNA拓扑异构酶I/II活性以及胞内核酸生物合成的影响机理。研究发现,金属抗菌肽SIF_(4)可能以类似溴化乙锭嵌插方式与基因组DNA结合,对拓扑异构酶I有较强抑制活性,但对拓扑异构酶II影响较小,可通过影响DNA负超螺旋解链和RNA聚合酶结合催化RNA转录过程发挥抑菌活性。研究还发现,经金属抗菌肽SIF_(4)处理12 h后,大肠杆菌胞内总DNA和总RNA生物合成量均受到不同程度的抑制,且呈现良好的量-效关系,1/2最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)组与对照组(0 MIC)相比,胞内DNA和RNA生物量差异不显著(P>0.05),MIC和2 MIC组与对照组相比,胞内DNA和RNA生物量差异显著(P<0.05)。实验结果可为金抗肽SIF_(4)在食源性大肠杆菌生物防控中的应用提供理论支持。

澳洲坚果抗菌肽分离纯化及其肽段鉴定与分析

以液压压榨澳洲坚果粕为原料,采用碱性蛋白酶水解制备澳洲坚果多肽(macadamia nut peptide⁃0,MNP⁃0),以对金黄色葡萄球菌与白色念珠菌的抑菌活性为跟踪指标,通过超滤、DA201⁃C型大孔吸附树脂、交联葡聚糖凝胶Sephadex G⁃25对其进行逐级分离纯化,获得抑菌活性较强的抗菌肽,并运用液相色谱串联质谱(liquid chromatography tandem mass spectrometry,LC⁃MS/MS)技术对其进行肽段组成与氨基酸序列分析。结果表明:超滤分离的不同分子量澳洲坚果多肽在所有多肽中所占质量分数不同,抑菌活性也有所差异。其中,澳洲坚果多肽组分MNP⁃4占比最高,为29.55%;抑菌活性也最强,对金黄色葡萄球菌与白色念珠菌的抑菌圈直径分别为10.01 mm与9.41 mm。大孔吸附树脂纯化多肽组分MNP⁃4的技术条件为75%乙醇溶液为解吸剂,静态吸附3 h,动态洗脱体积60 mL。经大孔吸附树脂与交联葡聚糖凝胶Sephadex G⁃25分离纯化,获得3个澳洲坚果纯化多肽(macadamia nut purified peptide,MPP)组分,其中组分MPP⁃2的抑菌活性最强,对金黄色葡萄球菌与白色念珠菌的抑菌圈直径分别为18.67 mm与16.83 mm,优于多肽MNP⁃0与超滤分离多肽组分。分离纯化的澳洲坚果抗菌活性多肽MPP⁃2含有DDLTDPAPA、VLL、WDY、VPV、WDL、LLW、LWL、FDW 8个肽段,经预测分析,属于抗菌肽的肽段为WDL与FDW,其概率得分a(1.00≥a≥0.50)均为1.00,疏水率均为66.67%,均带有1个负电荷,等电点分别为0.69与0.67,并具有较好的溶解性。研究结果表明澳洲坚果可通过酶法制备具有抗菌活性的肽类成分。

黄粉虫抗菌肽的诱导·分离及其抗菌活性研究

[目的]探讨不同方法诱导对黄粉虫抗菌肽活性的影响,为黄粉虫抗菌肽的修饰改造、分子克隆、外源表达等奠定基础。[方法]选7龄、8龄、9龄的黄粉虫幼虫,以巴氏杆菌和沙门氏菌为诱导菌采用微量注射法、针刺法诱导抗菌肽,对不同菌液浓度和不同方法诱导的不同龄期黄粉虫幼虫抗菌肽的抑菌效果进行研究。[结果]①黄粉虫龄期对抗菌肽活性有显著影响。采用巴氏杆菌和沙门氏菌作为诱导菌,对7龄、8龄和9龄黄粉虫进行诱导,在诱导处理中,8龄幼虫诱导的抗菌肽活性显著大于其他龄期幼虫诱导的抗菌肽活性(P<0.05)。②不同菌液浓度诱导黄粉虫幼虫产生的抗菌肽抑菌活性存在差异。菌液浓度为对数期浓度稀释100倍时抗菌肽活性显著大于其他稀释倍数诱导的抗菌肽活性(P<0.05)。③不同方法诱导产生的抗菌肽抑菌活性存在差异。微量注射诱导的抗菌肽活性显著大于针刺诱导的抗菌肽活性(P<0.05)。④2种细菌诱导的抗菌肽活性有显著差异。采用沙门氏菌诱导的抗菌肽最高活性显著大于采用巴氏杆菌诱导的抗菌最高活性(P<0.05)。[结论]黄粉虫抗菌肽的活性受黄粉虫龄期、诱导源微生物种类、菌液浓度、诱导方法的影响。该研究中,以8龄黄粉虫为试验动物,采用对数期沙门氏菌液稀释100倍进行微量注射法诱导,所获得的抗菌肽活性最好。

杂合抗菌肽KL-21与抗生素体外协同抗菌效果研究

为了进一步研究杂合抗菌肽KL-21的抗菌活性和探索其应用潜力,试验测定了KL-21和抗生素对4种常见致病菌的抑菌活性,同时评估了KL-21与4种常见抗生素联用的协同效果。试验采用微量倍比稀释法测定KL-21和4种抗生素的最小抑菌浓度(MIC)及最小杀菌浓度(MBC),利用棋盘试验法测得部分抑菌浓度指数(FIC)评估联用后的协同效果。结果表明,KL-21对4种致病菌均有良好的抑菌活性,与卡那霉素、庆大霉素、链霉素及氯霉素联合使用时具有协同或部分协同作用,可以将抗生素体外抑菌试验的MIC减少至1/16~1/2,为人工设计杂合抗菌肽KL-21的实际应用提供了参考,为畜牧生产以及动物疫病治疗提供更多选择。

磷脂酶A_2氨基末端衍生肽的合成及其抗细菌活性的研究

目的 探讨磷脂酶A_(2)(PLA_(2))氨基末端衍生肽的合成及抗菌活性。方法 根据PLA_(2)氨基末端氨基酸残基的顺序合成为多肽PLA_(2)N_(11)、PLA_(2)N_(15)、PLA_(2)N_(20),将其分别与2种细菌(大肠埃希菌、枯草杆菌)在特定条件下培养,并以生理盐水作为对照,分析抗菌活性。结果 与对照比较,多肽不同作用浓度时PLA_(2)N_(11)、PLA_(2)N_(15)、PLA_(2)N_(20)对革兰氏阳性枯草杆菌杀菌活性更强,各多肽间比较,差异有统计学意义(P<0.05);当多肽作用浓度为500μg/ml时,PLA_(2)N_(15)对革兰氏阳性枯草杆菌杀菌活性可达99.8%,高于PLA_(2)N_(11)、PLA_(2)N_(20),及对照(P<0.05)。与对照比较,各多肽不同作用浓度时对大肠埃希菌杀菌活性比较,差异有统计学意义(P<0.05);多肽作用浓度为7.81、125.00、500.00μg/ml时,PLA_(2)N_(15)的杀菌活性均高于PLA_(2)N_(11)和PLA_(2)N_(20),及对照(P<0.05);多肽作用浓度为31.25μg/ml时,PLA_(2)N_(15)的杀菌活性低于PLA_(2)N_(11)的杀菌活性,且高于PLA_(2)N_(20)的杀菌活性(P<0.05)。结论 多肽PLA_(2)N_(11)、PLA_(2)N_(15)、PLA_(2)N_(20)对枯草杆菌、大肠埃希菌有很强的杀菌作用。

卤化合成α螺旋抗菌肽Cl-FR18的抑菌活性、安全性及稳定性研究

为了对α螺旋抗菌肽FR18进行卤化并了解卤化抗菌肽Cl-FR18的功能特性,对α螺旋抗菌肽FR18的N端第1个苯丙氨酸进行氯代,得到合成肽Cl-FR18,并进行抗菌活性、溶血活性、细胞毒性及稳定性检测。结果显示:Cl-FR18对7株指示菌均有良好的抑菌活性,其中对大肠杆菌K88和鲍曼不动杆菌js1的最小抑菌浓度(MIC)为4μg/mL,高于未修饰肽FR18;Cl-FR18的溶血活性明显低于蜂毒肽和未修饰肽,在浓度为16μg/mL时仅引起221%的羊红细胞溶血。Cl-FR18保留了未修饰肽FR18较好的细胞选择性和安全性的特点,经Cl-FR18作用12 h后的细胞存活率均在90%以上,且Cl-FR18在不同的盐离子、蛋白酶溶液和温度环境中表现出一定的敏感性,MIC增至2~8倍。结果表明,经卤化后的抗菌肽Cl-FR18抑菌谱广,抑菌活性明显,且具有良好的安全性,其卤化合成策略为优化抗菌肽的改造方法提供了理论参考。

抗菌肽对大口黑鲈生长代谢的影响研究

为评估不同水平抗菌肽对大口黑鲈生长代谢的影响,试验以不含抗菌肽的基础饲料为对照组,在基础饲料中分别添加50 mg/kg(D1组),100 mg/kg(D2组),150 mg/kg(D3组),200 mg/kg(D4组)抗菌肽为试验组,在养殖水箱中饲喂初始平均体质量(12.49±0.2)g的大口黑鲈幼鱼,养殖8周后测定试验鱼的生长性能、饲料表观消化率、鱼体成分、营养代谢等相关指标。试验结果表明:(1)生长和体组成方面,各组试验鱼增重率均高于对照组但差异不显著(P>0.05)。与对照组相比,D4组干物质消化率显著升高6.58%(P<0.05);D3和D4组饲料转化率分别显著升高9.4%和10.8%(P<0.05);各组试验鱼全鱼粗蛋白质、粗脂肪和粗灰分均无显著差异(P>0.05),D3组脏体比比对照组显著升高9.4%(P<0.05);(2)消化吸收方面,与对照组相比,D2和D3组前肠钠钾ATP酶活性分别显著升高32.35%和39.04%(P<0.05),前肠碱性磷酸酶活性分别显著升高12.09%和10.05%(P<0.05),肝脏溶菌酶活性分别显著升高11.81%和10.9%(P<0.05),D3组前肠脂肪酶活性显著升高12.62%(P<0.05);(3)蛋白质代谢方面,与对照组相比,D3和D4组血清总蛋白含量分别显著升高19.53%和18.7%(P<0.05),D3和D4组蛋白质效率分别显著升高10.31%和10.82%(P<0.05),D4组肝脏AST活性显著升高22.49%(P<0.05);(4)脂肪代谢方面,D4组血清总胆固醇含量比对照组显著下降18.76%(P<0.05)。本研究表明,在大口黑鲈饲料中添加抗菌肽可以提高饲料转化率,促进蛋白质沉积,能在一定程度上提升鱼体免疫性能,抗菌肽添加量为150 mg/kg时效果较佳。

抗菌肽对肉牛生长性能及经济效益的影响

试验旨在研究不同水平的抗菌肽对西门塔尔杂交肉牛生长性能、瘤胃发酵参数、血清免疫力及养殖经济效益的影响。试验选择32头健康、体重相近的西门塔尔杂交肉牛,随机分成4组,每组8个重复,每个重复1头肉牛。对照组饲喂基础饲粮,试验A组、B组、C组分别饲喂含有2、4、8 g/(头·d)抗菌肽的饲粮。预试期7 d,正式试验期150 d。结果表明:与对照组比较,试验B组和试验C组的末重和平均日增重显著升高(P<0.05),料重比显著降低(P<0.05);瘤胃液的pH值和菌体蛋白含量显著升高(P<0.05),乙丙比显著降低(P<0.05);所有试验组瘤胃乙酸浓度显著降低(P<0.05);所有试验组血清中白细胞介素-4水平显著升高(P<0.05),白细胞介素-6水平显著降低(P<0.05);试验B组和试验C组血清白细胞介素-10水平显著升高(P<0.05),免疫球蛋白M和免疫球蛋白G水平显著升高(P<0.05)。与对照组相比,试验A组、B组、C组的增重收入分别增加了10.40%、22.34%和23.55%,利润分别增加了19.31%、46.54%和48.45%。研究表明,在肉牛养殖中添加适量的抗菌肽可以提高生长性能,促进瘤胃发酵功能,增强机体的免疫功能,增加养殖利润,且添加4 g/(头·d)的抗菌肽较为适宜。

血清抗菌肽37、HDAC4对急性心肌梗死患者PCI术后发生不良心血管事件的预测价值

目的 探讨血清抗菌肽LL-37、组蛋白去乙酰化酶(HDAC)4对急性心肌梗死(AMI)患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后发生主要不良心血管事件(MACE)的预测价值。方法 选取2021年1月至2023年5月在潍坊市人民医院急诊内科行PCI术的AMI患者240例,根据PCI术后3个月是否发生MACE分为MACE组和non-MACE组。采用酶联免疫吸附试验检测血清LL-37、HDAC4水平。采用多因素Logistic回归分析PCI术后AMI患者发生MACE的影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清LL-37、HDAC4单项及联合检测对PCI术后AMI患者发生MACE的预测价值。结果 240例AMI患者PCI术后3个月有66例发生MACE(MACE组),其余174例纳入non-MACE组,MACE发生率为27.50%。与non-MACE组比较,MACE组血清LL-37、HDAC4水平降低(P<0.05)。年龄增加、KILLIP分级≥Ⅱ级是AMI患者PCI术后发生MACE的独立危险因素(P<0.05),左心室射血分数、LL-37和HDAC4水平升高是保护因素(P<0.05)。血清LL-37联合HDAC4预测AMI患者PCI术后发生MACE的曲线下面积为0.864,大于血清LL-37、HDAC4单独预测的0.778、0.779(P<0.05)。结论 血清LL-37、HDAC4联合检测对AMI患者PCI术后发生MACE的预测价值较高。

动物源性抗菌肽对荷斯坦奶公牛生长性能、瘤胃发酵指标、粪便评分、血清生化和免疫指标的影响

本试验旨在研究动物源性抗菌肽对荷斯坦奶公牛生长性能、瘤胃发酵指标、粪便评分、血清生化和免疫指标的影响,同时探究其适宜添加量。选取体重为(255.35±22.43)kg的荷斯坦奶公牛24头,随机分为3个组,每组8个重复,每个重复1头牛。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别在基础饲粮的基础上添加500(A组)和800 g/t(B组)的动物源性抗菌肽。预试期5 d,正试期60 d。结果表明:1)B组的平均日增重(ADG)显著高于对照组(P<0.05),料重比(F/G)显著低于对照组(P<0.05)。2)A、B组的瘤胃pH显著高于对照组(P<0.05),瘤胃乙酸含量及乙丙比(A/P)显著低于对照组(P<0.05)。B组的瘤胃微生物蛋白(MCP)含量显著高于对照组(P<0.05)。与对照组相比,A、B组的瘤胃总挥发性脂肪酸(TVFA)含量有降低趋势(P=0.080)。3)A、B组的粪便评分显著高于对照组(P<0.05)。4)A、B组的血清乳酸脱氢酶(LDH)活性显著低于对照组(P<0.05),B组的血清免疫球蛋白M(IgM)含量显著高于对照组(P<0.05)。综上所述,饲粮中添加动物源性抗菌肽能够提高荷斯坦奶公牛的生长性能,改变瘤胃发酵模式为丙酸发酵。综合试验结果,以800 g/t动物源性抗菌肽的添加量作用效果较好。

Bt对棉铃虫天蚕素抗菌肽基因(HacD)转录的影响

抗菌肽是昆虫体液免疫的重要组成部分,对抵御外源致病微生物的侵染具有重要作用。明确苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis(Bt)诱导下棉铃虫天蚕素抗菌肽基因(HacD)转录的空间特征和时序特征,有利于进一步了解昆虫体液免疫与棉铃虫抗Bt发展的关联性。本研究测定了HacD cDNA序列,对序列进行了蛋白质翻译,并通过RT-qPCR技术研究了棉铃虫HacD基因在Bt诱导下的转录规律。结果表明,棉铃虫HacD cDNA全长189 bp,其中GC含量为48.15%,肽链由63个氨基酸组成。Bt诱导后棉铃虫幼虫HacD相对转录水平整体呈显著上调趋势,其中脂肪体中HacD的相对转录水平上调最高,其次为血淋巴。Bt对棉铃虫幼虫进行短期诱导后,脂肪体和血淋巴中的HacD基因的相对转录水平均呈持续上调趋势,分别在诱导24 h和18 h时达到最高,随后均持续下调。对幼虫进行持续诱导后,F 0代初孵幼虫、5龄幼虫、蛹和成虫的HacD基因均可以保持上调的转录特性;传代培养获得的F 1代初孵幼虫、5龄幼虫、蛹和成虫的HacD基因转录较F 0代下调,但均高于对照组。综上所述,Bt能够诱导棉铃虫HacD基因转录水平上调。

青刺果抗菌肽组分的分离及其稳定性分析

旨在高值化利用青刺果榨油后副产物青刺果粕中的蛋白质,以青刺果粕为原料,提取青刺果蛋白并制备蛋白酶解物,采用活菌吸附法联合反相高效液相色谱(RP-HPLC)从蛋白酶解物中筛选出抗菌肽组分,评价其抑菌活性,并对抑菌活性最好的组分进行稳定性分析。结果表明:筛选出的3个抗菌肽组分(F1、F2和F3)中,F2组分抑菌活性最好,当其质量浓度为10 mg/mL时对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌活性分别达到45.5%和39.1%;抗菌肽组分F2抑菌活性随温度升高和盐溶液浓度增加均降低,最适pH为6.0,在酸性环境中极不稳定,对酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶的耐受性均较差,对中性蛋白酶耐受性较好。综上,青刺果粕中的蛋白酶解物具有抑菌活性,具有开发青刺果抗菌肽的潜力。

足三里穴位注射黄芪注射液联合肺康复训练对老年慢性阻塞性肺疾病病人抗菌肽LL-37和免疫功能的影响

目的 研究足三里穴位注射黄芪注射液联合肺康复训练对老年COPD稳定期病人的疗效、血清抗菌肽LL-37水平、炎症因子及外周血T淋巴细胞亚群的影响。方法 选择98例老年COPD稳定期病人,根据治疗方法分为黄芪组(50例)和对照组(48例)。对照组予以肺康复训练及常规西药治疗,黄芪组在对照组基础上予以足三里穴位注射黄芪注射液,疗程均为12周。比较2组治疗前后肺功能、6分钟步行试验(6MWT)结果、改良版英国医学研究委员会呼吸问卷(mMRC)呼吸困难程度分级,血清抗菌肽LL-37、TNF-α、IL-6、CRP水平及T淋巴细胞亚群变化。结果 2组治疗后肺功能(FVC、FEV1、FEV1%pred、FEV1/FVC)、6MWT结果及mMRC分级均较治疗前明显改善(P<0.05),且黄芪组较对照组改善更为明显(P<0.05)。2组治疗后血清抗菌肽LL-37、CD3^(+)T淋巴细胞、CD4^(+)T淋巴细胞及CD4^(+)/CD8^(+)水平均较治疗前升高,且黄芪组高于对照组(P<0.05);2组治疗后TNF-α、IL-6、CRP水平均低于治疗前,且黄芪组低于对照组(P<0.05)。结论 足三里穴位注射黄芪注射液联合肺康复训练可改善老年COPD稳定期病人的肺功能和运动耐力,提高血清抗菌肽LL-37水平并改善免疫功能。

抗菌肽LL-1对肺炎克雷伯菌ATCC 700603的抗菌机制

【目的】探明新抗菌肽LL-1对肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)的抗菌效果和机制。【方法】测定抗菌肽LL-1对肺炎克雷伯菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),通过抑菌曲线评价抗菌肽LL-1对肺炎克雷伯菌的体外抗菌效果;通过检测碱性磷酸酶(ALP)、β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)、核酸、蛋白质的泄露,评价抗菌肽LL-1对肺炎克雷伯菌细胞膜和细胞壁的影响;通过核酸凝胶电泳检测抗菌肽LL-1与肺炎克雷伯菌DNA的结合作用;通过扫描电子显微镜观察抗菌肽LL-1对肺炎克雷伯菌菌体形态的影响。【结果】抗菌肽LL-1对肺炎克雷伯菌具有良好的抗菌活性,MIC为50μg/mL;抑菌曲线表明,抗菌肽LL-1对肺炎克雷伯菌具有生长抑制作用,且2 MIC的抗菌肽LL-1在6 h内能完全抑制肺炎克雷伯菌;抗菌肽LL-1能导致肺炎克雷伯菌的ALP和β-半乳糖苷酶发生泄漏,且1/4 MIC的抗菌肽LL-1即可导致其泄漏量极显著高于对照组(P<0.01);核酸和蛋白质泄露的检测结果进一步证实抗菌肽LL-1能导致肺炎克雷伯菌胞内容物外流;此外抗菌肽LL-1还能与肺炎克雷伯菌DNA结合;扫描电子显微镜观察显示,抗菌肽LL-1会导致肺炎克雷伯菌表面变得粗糙、菌体变形等。【结论】抗菌肽LL-1能增加肺炎克雷伯菌细胞壁和细胞膜的通透性,并结合其DNA,从而发挥抗菌作用,本研究结果将为深入研究抗菌肽LL-1对肺炎克雷伯菌的抗菌机制奠定基础。

抗菌肽在眼表感染性疾病中的应用进展

眼表长时间暴露在外部环境下,很容易患各种眼表感染性疾病。近年来,由于病原体对抗菌药物的耐药性问题,眼表感染性疾病患者呈现治疗效果不佳、视力和生活质量严重下降等情况。目前,眼表感染性疾病已成为一个全球性的公共卫生问题,寻找一种安全、有效的治疗药物迫在眉睫。抗菌肽作为抗生素类似物,具有广谱抗菌性,能有效抵抗各种微生物的感染,包括细菌、病毒、真菌和寄生虫。抗菌肽在眼表感染性疾病的治疗中发挥着重要作用。本文就抗菌肽的结构与功能、抗菌肽在眼表感染性疾病中的作用机制、内源性抗菌肽在眼表感染中针对不同病原体的作用、外源性诱导抗菌肽对眼表感染性疾病的作用以及抗菌肽研究的最新进展等进行综述。

食品加工、贮藏对乳杆菌源抗菌肽抑菌活性的影响及安全性评价

为明确乳杆菌源抗菌肽粗提粉在食品加工、贮藏过程中的应用,先测定其抑菌谱,然后以白假丝酵母菌为指示菌,从最低抑菌浓度(MIC)、温度、pH、盐浓度、反复冻融以及贮藏时间等方面对粗提粉进行相对抑菌活性评估,然后进行安全性评价。结果表明,乳杆菌源抗菌肽粗提粉具有广谱抑菌性;其热稳定性良好,121℃处理20 min仍可保持79.68%的相对抑菌活性;在pH 2~6处理4 h后,可保持90%以上的相对抑菌活性,pH 10~12处理4 h后,几乎完全失活;盐的质量浓度达到0.8 mg/mL时,相对抑菌活性显著降低(P<0.05);在不同温度、不同贮藏时间,相对抑菌活性无显著变化(P>0.05);经-20℃反复冻融5次后的相对抑菌活性同样无显著性差异(P>0.05)。安全性评价证实粗提粉属无毒、安全级别。结论:乳杆菌源抗菌肽粗提粉稳定性好,适用范围广,可作为生物防腐剂应用于食品领域。

高产抗菌脂肽芽孢杆菌的分离鉴定筛选及发酵工艺优化

为了筛选出高产抗菌脂肽的芽孢杆菌并确定其最佳发酵工艺条件,研究从传统发酵豆酱中分离和鉴定产抗菌脂肽芽孢杆菌菌株,通过正交试验研究了发酵接种量、发酵填液量、发酵时间、发酵温度等发酵条件对芽孢杆菌脂肽产量的影响。结果表明,从9份东北传统发酵豆酱中分离筛选得到27株芽孢杆菌,经16S rDNA鉴定,其中6株芽孢杆菌具有合成脂肽的基因sfp、fenB和ituA。通过单位菌体脂肽产量和抑菌效果测定发现,贝莱斯芽孢杆菌SN-20和解淀粉芽孢杆菌SN-46表现优异,单位菌体脂肽产量达106和72 mg,且对革兰氏阳性和阴性指示菌均有较强的抑菌效果。正交试验发现贝莱斯芽孢杆菌SN-20最佳发酵工艺为:接种量3%,发酵填液量20%,发酵时间36 h,发酵温度32℃;枯草芽孢杆菌SN-46最佳发酵工艺为:接种量2%,发酵填液量40%,发酵时间24 h,发酵温度32℃。在此条件下发酵的两株芽孢杆菌单位菌体脂肽产量优化前为106.11和76.23 mg/g,优化后分别提高了21.85%和23.84%。研究结果有效地增加了芽孢杆菌抗菌脂肽的产量。

盐渍凡纳滨对虾抗菌肽PV-M7对副溶血性弧菌的抑菌活性

抗菌肽是食品工业的新型生物防腐剂,而盐渍发酵食品是抗菌肽的来源之一。采用超高效液相色谱-质谱联用技术从盐渍凡纳滨对虾中鉴定小分子多肽序列,利用生物信息学分析筛选潜在的抗菌肽。通过最低抑菌浓度、时间-杀灭曲线、细胞膜通透性和圆二色谱等试验评价抗菌肽对副溶血性弧菌的抑菌活性及机制。结果表明:盐渍凡纳滨对虾中一种新型抗菌肽(PV-M7)对副溶血性弧菌的最低抑菌质量浓度为15.6μg/mL,其在1 h内即可产生很好的抑菌作用。PV-M7作用于副溶血性弧菌后,可使细胞膜通透性增加,胞内大分子物质(核酸、蛋白质)泄露,同时,细胞膜表面模糊,细胞质密度减小。当PV-M7接触细胞膜时,它的二级结构由无规则卷曲转变成α-螺旋,这种结构转换是其发挥抑菌活性的关键作用机制。

抗菌肽偶联纳米银材料及其在医疗和食品领域的应用

由于具有抗菌活性,纳米粒子(NPs)和抗菌肽(AMPs)相结合可以用来杀死耐药(MDR)病原体。纳米银(AgNPs)具有广谱高效的抗菌性能、多种细菌灭活机制,并能对抗菌肽共轭银纳米粒子(AMP-AgNPs)表面进行共轭微调,使得AMP-AgNPs具有更高的生物安全性。文章综述了AMP-AgNPs偶联物的最新研究进展,讨论了AMP-AgNPs偶联物的合成方式、抗菌活性、作用机制、溶血毒性以及其在医疗和食品领域的应用,并对其未来发展方向进行了展望。