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草鱼TAB2与TAK1蛋白互作鉴定及其对两种抗菌肽基因表达的影响
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作者 杨文飞 郭佳静 +1 位作者 赵文平 李槿年 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期131-140,共10页
为了探究草鱼TAB2(Ci TAB2)与Ci TAK1能否互作及其对2种草鱼抗菌肽基因(Cihepcidin与Ciβ-defensin1)表达的影响,实验首先采用实时荧光定量PCR(qPCR)方法分析拟态弧菌感染后Citab2和Citak1在草鱼免疫相关组织中的时空表达模式。然后利... 为了探究草鱼TAB2(Ci TAB2)与Ci TAK1能否互作及其对2种草鱼抗菌肽基因(Cihepcidin与Ciβ-defensin1)表达的影响,实验首先采用实时荧光定量PCR(qPCR)方法分析拟态弧菌感染后Citab2和Citak1在草鱼免疫相关组织中的时空表达模式。然后利用荧光共定位、免疫共沉淀及Western blot技术鉴定Ci TAB2与Ci TAK1在细胞内共定位及相互作用情况。最后将过表达质粒pEGFP-N1-Citak1与pEGFP-N1-Citab2共同转染草鱼肾细胞(CIK细胞),检测Cihepcidin与Ciβ-defensin1的相对mRNA表达水平。结果显示,拟态弧菌感染能够显著改变Citab2和Citak1的相对表达水平,前者于感染后不同时间在各检测组织中表现出不同的时空表达模式,而后者均呈现先上调后下调的表达模式;荧光显微镜下观察到Ci TAB2与Ci TAK1共定位于转染后的HEK293T和CIK细胞的胞质中,且在HEK293T细胞内能够形成Ci TAB2-Ci TAK1蛋白复合物;共同过表达Ci TAB2与Ci TAK1后,CIK细胞内Cihepcidin与Ciβ-defensin1的相对mRNA表达水平在各检测时间点均显著上调。结果表明,Ci TAB2与Ci TAK1存在互作关系且二者互作能够促进上述两种抗菌肽的转录表达。本研究从蛋白互作调控抗菌肽表达的角度为防治鱼类弧菌病提供了新策略。 展开更多
关键词 草鱼 转化生长因子-β激活激酶1(TAK1) TAK1结合蛋白2(TAB2) 蛋白互作 肽基因表达
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基于SARS-CoV-2病毒N蛋白的抗菌肽设计及抗临床耐药菌机制研究
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作者 杜娟 王洁 +2 位作者 代云峰 刘云龙 衣同辉 《中国科技期刊数据库 医药》 2023年第9期36-38,共3页
研究基于SARS-CoV-2病毒N蛋白的抗菌肽设计及抗临床耐药菌机制。方法 在分析SARS-CoV-2病毒N蛋白的基因序列基础上,选择形成两亲性α-螺旋的序列进行设计合成。测定肽对临床耐药菌的抗菌活性和细胞毒性,并以此为基础,通过结构测定、细... 研究基于SARS-CoV-2病毒N蛋白的抗菌肽设计及抗临床耐药菌机制。方法 在分析SARS-CoV-2病毒N蛋白的基因序列基础上,选择形成两亲性α-螺旋的序列进行设计合成。测定肽对临床耐药菌的抗菌活性和细胞毒性,并以此为基础,通过结构测定、细胞膜渗透实验、钙黄绿素荧光探针实验和原子力显微镜实验对肽的抗菌机制进行研究。结果 临床确诊患者发病后0~1周、1~2周、2~3周、3~13周的SARS-CoV IgG和N-IgG阳性率均逐渐升高(P<0.05)。临床疑似患者发病后0~1周、2~3周的SARS-CoV IgG和N-IgG阳性率均低于发病后1~2周、3~13周(P<0.05)。临床排除患者发病后0~1周SARS-CoV IgG和N-IgG阳性率均低于发病后1~2周、2~3周、3~13周(P<0.05)。结论 研究基于SARS-CoV-2病毒N蛋白的抗菌肽设计及抗临床耐药菌机制能够将有效依据提供给临床控制与治疗细菌感染。 展开更多
关键词 SARS-CoV-2病毒N蛋白 临床耐药 机制
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抗菌肽Rs-AFP_2的原核表达及抑菌活性 被引量:10
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作者 路妍 刘宝业 +1 位作者 井金学 张增艳 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期84-88,共5页
为了明确人工合成的萝卜抗菌肽Rs-AFP2基因编码产物是否对一些重要农作物病原真菌有抑制作用,本文将该基因编码序列亚克隆到原核表达载体pGEX-4T-1上,构建成GST-Rs-AFP2融合蛋白表达载体。经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,获得了... 为了明确人工合成的萝卜抗菌肽Rs-AFP2基因编码产物是否对一些重要农作物病原真菌有抑制作用,本文将该基因编码序列亚克隆到原核表达载体pGEX-4T-1上,构建成GST-Rs-AFP2融合蛋白表达载体。经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,获得了以包涵体形式表达的GST-Rs-AFP2重组蛋白。经过裂解、洗涤、溶解、复性、离心等处理,获得了纯化的GST-Rs-AFP2融合蛋白。对重要作物病原真菌进行体外抑菌分析的结果表明,Rs-AFP2可以显著抑制水稻纹枯病菌、小麦纹枯病菌、小麦根腐病菌、棉花黄萎病菌、小麦赤霉病菌的菌丝生长,说明Rs-AFP2可作为上述植物病害抗性基因育种的潜在基因。 展开更多
关键词 抗菌蛋白rs-afp2 复性 抑制真 植物病原真
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内生菌BS-2菌株的抗菌蛋白及其防病作用 被引量:70
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作者 何红 蔡学清 +2 位作者 关雄 胡方平 谢联辉 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期373-378,共6页
BS 2菌株为一株能在多种植物体内定殖 ,对多种植物炭疽病具有良好防治效果 ,并对植物生长具有良好促进作用的枯草芽孢杆菌 ,其BPY培养液经 30 %~ 70 %硫酸铵盐析、高温 (10 0℃ )处理后 ,以SDS PAGE、MALDI TOF检测 ,该菌株分泌的抗菌... BS 2菌株为一株能在多种植物体内定殖 ,对多种植物炭疽病具有良好防治效果 ,并对植物生长具有良好促进作用的枯草芽孢杆菌 ,其BPY培养液经 30 %~ 70 %硫酸铵盐析、高温 (10 0℃ )处理后 ,以SDS PAGE、MALDI TOF检测 ,该菌株分泌的抗菌蛋白为分子量≤ 2 884 .39D的多肽 ;该抗菌多肽对热稳定并抗紫外线照射 ,对植物炭疽病菌和番茄青枯病菌等多种植物病原真菌和细菌有强烈的抑制作用 ,并对辣椒果炭疽病具有 6 9.79% (9d后 )的防病效果 ;抑制病菌生长 ,引起菌丝 (或芽管 )细胞消融 ,导致菌丝畸形以及抑制病菌分生孢子的产生和萌发等可能是该抗菌多肽主要的防病机制。 展开更多
关键词 内生 BS-2 蛋白 防病作用 定殖 防治效果 植物病害 枯草芽孢杆 BPY培养液
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生防菌成团泛菌XM2抗菌蛋白抗真菌特性研究 被引量:7
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作者 张晓宇 高振峰 +3 位作者 张宝俊 王亮 赵迎丽 张立新 《河南农业大学学报》 CSCD 北大核心 2017年第5期693-698,共6页
以成团泛菌XM2为研究对象,采用硫酸铵分级沉淀和生长速率法对其次级代谢产物中抗菌蛋白的最佳硫酸铵沉淀质量浓度和抗真菌特性进行了研究。结果表明,该抗菌蛋白最佳硫酸铵沉淀质量浓度为209.4 g·L-1;具有较好的抑菌广谱性,对梨黑... 以成团泛菌XM2为研究对象,采用硫酸铵分级沉淀和生长速率法对其次级代谢产物中抗菌蛋白的最佳硫酸铵沉淀质量浓度和抗真菌特性进行了研究。结果表明,该抗菌蛋白最佳硫酸铵沉淀质量浓度为209.4 g·L-1;具有较好的抑菌广谱性,对梨黑斑病菌、辣椒疫病菌、西瓜枯萎病病菌以及辣椒枯萎病菌具有90%以上的抑菌活性;在温度低于80℃、pH值为4~9.5、紫外照射24 h以及蛋白酶K和胰蛋白酶处理后均可保持85%以上的抑菌活性。 展开更多
关键词 成团泛XM2 蛋白 特性
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青鱼、草鱼、鲢鱼和鳙鱼组蛋白H2A N-端基因克隆及其衍生抗菌肽 被引量:4
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作者 武向敏 赵燕静 +4 位作者 孔祥会 江红霞 李莉 聂国兴 李学军 《水产科学》 CAS 北大核心 2014年第5期311-316,共6页
采用RT-PCR方法,以青鱼、草鱼、鲢鱼和鳙鱼肌肉提取总 RNA 为模板,运用 GenBank中BLAST 同源性搜索,寻找亲缘关系相近的鱼类基因序列,采用Primer5设计简并引物,进行 H2A N-端序列扩增,通过胶回收和连接,然后转化到载体中进行克... 采用RT-PCR方法,以青鱼、草鱼、鲢鱼和鳙鱼肌肉提取总 RNA 为模板,运用 GenBank中BLAST 同源性搜索,寻找亲缘关系相近的鱼类基因序列,采用Primer5设计简并引物,进行 H2A N-端序列扩增,通过胶回收和连接,然后转化到载体中进行克隆测序,分别获得青鱼、草鱼、鲢鱼和鳙鱼组蛋白 H2A N-端基因序列,长为364 bp ,分析发现均属于不稳定蛋白质,等电点为10.48~11.02,平均亲水性为0.179~0.264。序列同源性比对结果显示,青鱼、草鱼、鲢鱼和鳙鱼同狭孔金线鲃和斑马鱼基因H2A编码蛋白质同源性极高,达到85%以上,与其他物种同源性较低,其中狭孔金线鲃与青鱼、草鱼、鲢鱼和鳙鱼的亲缘关系比斑马鱼更近,分子系统学分析也支持这一结果。青鱼、草鱼、鲢鱼和鳙鱼H2A衍生抗菌肽与庸鲽 Hipposin抗菌肽同源性极高,不仅存在碱性氨基酸,还存在酸性氨基酸。组蛋白 H2A N-端可衍生 Hipposin类抗菌肽,均为阳离子α螺旋结构抗菌肽。 展开更多
关键词 蛋白 基因克隆 H2A衍生 青鱼 草鱼 鲢鱼 鳙鱼
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人精液凝固蛋白Ⅰ衍生合成肽在不同pH值及Zn^(2+)浓度下的抗菌活性研究 被引量:2
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作者 赵晖 何仁松 +1 位作者 李文辉 申吉泓 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第13期6-10,共5页
目的研究5种人精液凝固蛋白Ⅰ衍生合成肽在不同PH值及Zn2+浓度下的抗菌活性,探讨人精液凝固蛋白Ⅰ衍生抗菌肽在不同条件下的抗菌机理。方法在前期研究新发现的人精液凝固蛋白Ⅰ衍生肽SgI29及其衍生合成肽(SgI14、SgI19、SgI22及SgI25)... 目的研究5种人精液凝固蛋白Ⅰ衍生合成肽在不同PH值及Zn2+浓度下的抗菌活性,探讨人精液凝固蛋白Ⅰ衍生抗菌肽在不同条件下的抗菌机理。方法在前期研究新发现的人精液凝固蛋白Ⅰ衍生肽SgI29及其衍生合成肽(SgI14、SgI19、SgI22及SgI25)具有抗菌活性的基础上,设置不同pH值及不同Zn2+浓度,通过琼脂糖弥散法抗菌试验进一步测定其在此环境下对泌尿生殖道感染常见细菌抗菌活性。结果 SgI29及其衍生合成肽在pH值为4时,无明显抗菌活性,pH值为6和7时,其抗菌活性最强。在试验所设置的不同Zn2+浓度下,各培养皿中均未见细菌生长。结论 pH值是影响人精液凝固蛋白Ⅰ衍生肽抗菌活性的重要因素之一。游离态Zn2+具有较强的抗菌活性,精液中Zn2+的抗菌活性值得进一步研究。 展开更多
关键词 精液凝固蛋白 活性 pH Zn2+
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灵长生物抗菌蛋白ⅡA型磷脂酶A_2氨基酸取代与分子进化的关系
8
作者 何睿林 卢美珍 梁宁生 《广西医科大学学报》 CAS 2011年第3期331-334,共4页
目的:了解灵长生物的抗菌蛋白ⅡA型磷脂酶A2氨基酸取代的特点及其与分子进化的关系。方法:对人、猩猩和猴3种哺乳类灵长生物的抗菌蛋白ⅡA型磷脂酶A2的氨基酸顺序进行两两比较,分析它们之间相互取代的位点、频率和性质。结果:①人和猩... 目的:了解灵长生物的抗菌蛋白ⅡA型磷脂酶A2氨基酸取代的特点及其与分子进化的关系。方法:对人、猩猩和猴3种哺乳类灵长生物的抗菌蛋白ⅡA型磷脂酶A2的氨基酸顺序进行两两比较,分析它们之间相互取代的位点、频率和性质。结果:①人和猩猩、人和猴、猩猩和猴之间分别有4,12,12个氨基酸残基发生取代,且主要发生在带电荷的氨基酸;而在发生的氨基酸取代中,又以带正电荷的氨基酸(碱性氨基酸)为主;②氨基酸取代主要集中在有限的4个区域,且为功能重要的区域。结论:哺乳类灵长生物抗菌蛋白ⅡA型磷脂酶A2的蛋白质分子进化较快,与其所具有的较强的杀菌活性相适应。 展开更多
关键词 磷脂酶A2 灵长类 蛋白 分子进化 活性
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棉花黄萎病拮抗细菌Bacillus subtilis ZL2-70抗菌蛋白的理化性质和抑菌机理 被引量:5
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作者 王奕丁 姜婷婷 王全 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2017年第6期560-569,共10页
【目的】旨在研究棉花黄萎病拮抗细菌枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis ZL2-70抗菌蛋白的抑菌谱、理化性质以及抑菌机理,为棉花黄萎病生物农药的研制与开发奠定理论基础。【方法】采用抑菌圈法测定该抗菌蛋白的抑菌谱,以及温度、pH、无机... 【目的】旨在研究棉花黄萎病拮抗细菌枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis ZL2-70抗菌蛋白的抑菌谱、理化性质以及抑菌机理,为棉花黄萎病生物农药的研制与开发奠定理论基础。【方法】采用抑菌圈法测定该抗菌蛋白的抑菌谱,以及温度、pH、无机离子、有机溶剂、蛋白酶对其稳定性的影响,并通过无菌小瓶等方法研究抗菌蛋白对大丽轮枝菌菌丝和孢子的抑制作用,测定了抗菌蛋白的纤维素酶和几丁质酶活力。【结果】棉花黄萎病拮抗细菌B.subtilis ZL2-70抗菌蛋白抑菌谱广,对19种植物病原菌表现出抑菌活性;该蛋白理化性质相对稳定,耐高温,在pH 5.0~10.0范围内抑菌活性较稳定,经EDTA处理后活性变化不大,对Fe3+敏感,对蛋白酶K、胃蛋白酶和胰蛋白酶不敏感;该抗菌蛋白对大丽轮枝菌的菌丝生长和孢子萌发有双重抑制作用,能使病原菌菌丝胞壁消融、原生质凝集渗漏、菌丝细胞泡囊化,并可抑制病菌孢子的萌发;抗菌蛋白具有纤维素酶和几丁质酶活性,且酶活力与抑菌活性有关。【结论】初步推断该抗菌蛋白通过多糖酶活力破坏大丽轮枝菌的细胞壁和抑制病原菌的孢子萌发而起到抑菌作用。 展开更多
关键词 棉花黄萎病 大丽轮枝 B.subtilis ZL2-70 蛋白 理化性质 机理
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转Rs-AFP2基因小麦的分子分析及其纹枯病抗性 被引量:16
10
作者 路妍 张增艳 +8 位作者 任丽娟 刘宝业 廖勇 徐惠君 杜丽璞 马鸿翔 任正隆 井金学 辛志勇 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期640-646,共7页
Rs-AFP2属于r-硫堇类抗菌肽,主要通过形成离子通道直接破坏细胞来杀灭病原菌。本研究通过基因枪介导法结合对目标基因的分子检测,证明已将外源Rs-AFP2基因转入小麦推广品种扬麦12中。通过逐株抗纹枯病接种鉴定、PCR、PCR-Southern blot... Rs-AFP2属于r-硫堇类抗菌肽,主要通过形成离子通道直接破坏细胞来杀灭病原菌。本研究通过基因枪介导法结合对目标基因的分子检测,证明已将外源Rs-AFP2基因转入小麦推广品种扬麦12中。通过逐株抗纹枯病接种鉴定、PCR、PCR-Southern blot、Southern blot和RT-PCR/荧光定量RT-PCR(Q-RT-PCR)分析,对转Rs-AFP2基因小麦T1至T4代植株跟踪检测。结果表明,Rs-AFP2在转基因小麦中能够稳定遗传,以单拷贝整合到小麦基因组中,遗传方式符合孟德尔遗传规律,并能在转录水平上表达。对转Rs-AFP2基因小麦的抗病性、主要农艺性状以及Rs-AFP2表达活性分析结果表明,与受体扬麦12相比,Rs-AFP2表达活性高的转基因小麦植株对纹枯病抗性有明显提高,其抗病性可以遗传,而主要农艺性状没有明显差异,证明可以利用Rs-AFP2基因和基因工程途径创制抗纹枯病小麦新种质。 展开更多
关键词 rs-afp2 转基因小麦 基因表达 纹枯病
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RIP2对大肠杆菌的抗菌作用研究 被引量:5
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作者 席琼 胡巢凤 +2 位作者 张芸 陆大祥 蒋宇 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期951-955,共5页
目的:探讨受体相互作用蛋白2(RIP2)对人肠细胞清除大肠杆菌的作用。方法:使用阳离子聚合物JetPeiTM介导人RIP2基因(pEGFP-C2-PIP2)转染人结肠癌SW480细胞株,以转染空质粒及未转染的SW480细胞株作为对照,应用RT-PCR检测外源性RIP2 mRNA... 目的:探讨受体相互作用蛋白2(RIP2)对人肠细胞清除大肠杆菌的作用。方法:使用阳离子聚合物JetPeiTM介导人RIP2基因(pEGFP-C2-PIP2)转染人结肠癌SW480细胞株,以转染空质粒及未转染的SW480细胞株作为对照,应用RT-PCR检测外源性RIP2 mRNA水平的变化、Western blotting法检测细胞RIP2蛋白的表达;并利用大肠杆菌ATCC25922感染转染和未转染的SW480细胞24 h,用平板培养菌落计数活菌数。应用p38MAPK通路抑制剂SB203580作用于3组细胞,计数活菌数。结果:与对照组相比,转染RIP2组其mRNA和蛋白表达水平均有明显升高(P<0.01,P<0.05),表明RIP2表达质粒成功转染SW480细胞。转染RIP2细胞能清除胞内大肠杆菌;而阻断p38 MAPK信号通路后,RIP2清除胞内大肠杆菌的作用被阻断。结论:RIP2转染细胞可有效清除胞内大肠杆菌,这种胞内细菌的清除作用可能与p38 MAPK信号通路有关。这些结果提示RIP2在细菌感染性疾病治疗中具有广阔的临床应用前景。 展开更多
关键词 受体相互作用蛋白2 基因转染 作用
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HMGN2的重组表达质粒的构建及其抗菌功能研究 被引量:7
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作者 马懿 冯云 +3 位作者 李恒 黄宁 吴琦 王伯瑶 《四川生理科学杂志》 2005年第4期147-149,共3页
目的:构建HMGN2重组表达载体,探讨HMGN2分子抗菌作用。方法:用基因克隆的方法构建pET-32 a-c(+)-HMGN2重组表达质粒,经IPTG诱导表达后,用亲和层析的方法纯化H is-HMGN2融合蛋白,Tric ine-SDS-PAGE电泳鉴定其分子量,行琼脂糖弥散法检测... 目的:构建HMGN2重组表达载体,探讨HMGN2分子抗菌作用。方法:用基因克隆的方法构建pET-32 a-c(+)-HMGN2重组表达质粒,经IPTG诱导表达后,用亲和层析的方法纯化H is-HMGN2融合蛋白,Tric ine-SDS-PAGE电泳鉴定其分子量,行琼脂糖弥散法检测其抗菌功能。结果:成功构建了pET-32 a-c(+)-HMG17重组表达质粒,其表达的融合蛋白对致病性大肠杆菌54080,54299以及金黄色葡萄球菌ATCC25923均有抗菌活性。结论:HMGN2是一种抗菌分子,可能参与了体内的天然免疫防御作用。 展开更多
关键词 HMGN2 重组表达质粒 功能 作用 功能研究 SDS-PAGE电泳 致病性大肠杆 琼脂糖弥散法 金黄色葡萄球 融合蛋白
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采用重组溶菌酶-抗菌肽融合蛋白治疗糖尿病手部感染一例报道 被引量:1
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作者 陈庆莹 鲍鲲 +1 位作者 王秀冬 陈金龙 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2018年第5期620-622,626,共4页
糖尿病手部感染可导致坏疽、截肢,甚至死亡,截肢率远高于糖尿病足。本文报道1例牙签伤致2型糖尿病手部感染患者,手掌见长约8 cm不规则创口,手背见长约3、6、3 cm的3个纵行创口,符合截肢指征。在传统治疗的基础上,创面均匀喷洒重组溶菌酶... 糖尿病手部感染可导致坏疽、截肢,甚至死亡,截肢率远高于糖尿病足。本文报道1例牙签伤致2型糖尿病手部感染患者,手掌见长约8 cm不规则创口,手背见长约3、6、3 cm的3个纵行创口,符合截肢指征。在传统治疗的基础上,创面均匀喷洒重组溶菌酶-抗菌肽融合蛋白喷剂,1次/d。治疗后,患者创面愈合,避免了截肢。重组溶菌酶-抗菌肽融合蛋白应用于糖尿病手部感染是一种安全有效的治疗手段,可使部分患者免除截肢。 展开更多
关键词 糖尿病 2 手部感染 重组溶酶-肽融合蛋白
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一种源自人α-2-巨球蛋白的抗菌肽A2M3及其对金黄色葡萄球菌的抑菌机制 被引量:1
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作者 范学楠 林蓉 +3 位作者 金日天 梁铎 邱绪健 杨燊 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期938-952,共15页
【目的】在人的鼻腔中鉴定出一种源自α-2-巨球蛋白的抗菌肽(命名为A2M3),并探究其对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的抑菌作用和机制。【方法】结合生物信息学技术对人类鼻液的质谱结果进行分析,并筛选潜在抗菌肽;通过微量稀... 【目的】在人的鼻腔中鉴定出一种源自α-2-巨球蛋白的抗菌肽(命名为A2M3),并探究其对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的抑菌作用和机制。【方法】结合生物信息学技术对人类鼻液的质谱结果进行分析,并筛选潜在抗菌肽;通过微量稀释法和平板涂布法分别分析A2M3对金黄色葡萄球菌最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和时间杀伤曲线(time-kill curve);采用透射电镜、碘化丙锭(propidium iodide,PI)摄取实验、流式细胞术和核酸蛋白质泄露实验分析A2M3对金黄色葡萄球菌膜完整性、膜通透性的影响;通过凝胶阻滞实验和荧光光谱实验探究A2M3对金黄色葡萄球菌基因组DNA的影响。【结果】利用生物信息学技术筛选出源自α-2-巨球蛋白的潜在抗菌肽A2M3,其对金黄色葡萄球菌的MIC为125.0μg/mL,且能在3h内完全杀灭细菌。A2M3通过增加细胞膜的通透性,促使核酸和蛋白质泄漏,继而穿过细胞膜嵌入DNA的碱基对,影响细菌的基因功能,从而导致菌体死亡。【结论】A2M3对金黄色葡萄球菌的抑菌机制涉及多靶点协同作用,能够改变细菌细胞膜的通透性,影响细菌的基因功能。这一发现揭示了从人体体液中筛选和分离抗菌功能肽的潜在应用价值。 展开更多
关键词 鼻液 α-2-巨球蛋白 金黄色葡萄球 机制
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贝伐单抗联合长春瑞滨、顺铂对非小细胞肺癌患者血清ANGPTL2、抗菌肽hCAP18水平的影响及疗效分析 被引量:3
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作者 毕晓勤 唐晓春 +2 位作者 解童玲 吕达 于水 《肿瘤药学》 CAS 2019年第3期422-426,共5页
目的 探讨贝伐单抗联合长春瑞滨、顺铂对非小细胞肺癌患者的疗效及对血清血管生成素样蛋白2(ANGPTL2)、抗菌肽人类阳离子抗菌蛋白18(hCAP18)水平的影响。方法 随机选择2015年1月-2017年1月在本院就诊的非小细胞肺癌患者86例,按随机数字... 目的 探讨贝伐单抗联合长春瑞滨、顺铂对非小细胞肺癌患者的疗效及对血清血管生成素样蛋白2(ANGPTL2)、抗菌肽人类阳离子抗菌蛋白18(hCAP18)水平的影响。方法 随机选择2015年1月-2017年1月在本院就诊的非小细胞肺癌患者86例,按随机数字表法分为观察组和对照组,各43例。对照组给予长春瑞滨、顺铂治疗,观察组给予贝伐单抗联合长春瑞滨、顺铂治疗。治疗2个疗程后观察两组患者的疗效、生活质量以及血清ANGPTL2、抗菌肽hCAP18水平、1年生存率等。结果 治疗后,观察组缓解率为55.8%,显著高于对照组(30.23%),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组患者QOL、ECOG评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组患者QOL评分显著高于治疗前,ECOG评分显著低于治疗前,且观察组变化更为显著,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组患者血清ANGPTL2、抗菌肽hCAP18水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组患者血清ANGPTL2、抗菌肽hCAP18水平均显著降低,且观察组显著低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组不良反应发生率高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。观察组1年生存率(76.74%)显著高于对照组(58.14%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 贝伐单抗联合长春瑞滨、顺铂可降低非小细胞肺癌患者血清ANGPTL2、抗菌肽hCAP18水平,改善其生活质量,提高生存率,整体疗效较好,在临床上可广泛应用。 展开更多
关键词 贝伐单 长春瑞滨 顺铂 非小细胞肺癌 血清血管生成素样蛋白2 肽人类阳离子蛋白18
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急性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障损伤、MLCK/p-MLC信号通路活性变化及其与抗菌肽的关系
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作者 马凤雨 曾家月 +1 位作者 文琳 陈霞 《山东医药》 CAS 2023年第2期28-32,共5页
目的观察急性胰腺炎(AP)大鼠肠黏膜屏障损伤情况和MLCK/p-MLC2信号通路活性变化,探讨MLCK/p-MLC2信号通路激活与抗菌肽的关系。方法将24只SD大鼠分为对照组6只和AP组18只,采用胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠溶液进行AP造模,对照组仅翻动胰... 目的观察急性胰腺炎(AP)大鼠肠黏膜屏障损伤情况和MLCK/p-MLC2信号通路活性变化,探讨MLCK/p-MLC2信号通路激活与抗菌肽的关系。方法将24只SD大鼠分为对照组6只和AP组18只,采用胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠溶液进行AP造模,对照组仅翻动胰腺后复位。AP组于造模后6、12、24 h各取6只大鼠进行解剖和取材,对照组于造模后6 h取材。采用ELISA法检测血清淀粉酶、脂肪酶水平,HE染色法观察回肠组织病理改变,RT-qPCR法检测回肠组织潘氏细胞分泌的抗菌肽REG3γ、α-防御素5、溶菌酶mRNA表达水平,Western blotting法检测回肠组织紧密连接蛋白ZO-1、Claudin-1及MLCK/p-MLC2信号通路相关蛋白MLCK、p-MLC2蛋白表达水平。结果AP组造模后6、12、24 h血清淀粉酶、脂肪酶水平均高于对照组,其中12 h和24 h血清淀粉酶、脂肪酶水平高于6 h,且24 h高于12 h(P均<0.05)。对照组回肠黏膜完整,绒毛结构规整正常;AP组回肠黏膜出现不同程度的断裂缺失、间质水肿、炎性细胞浸润。AP组造模后6、12、24 h回肠组织病理学评分均高于对照组,且24 h高于6 h和12 h,12 h高于6 h(P均<0.05)。AP组造模后6、12、24 h回肠组织REG3γ、α-防御素5、溶菌酶mRNA及ZO-1、Claudin-1蛋白表达水平均低于对照组,且24 h低于6 h和12 h,12 h低于6 h(P均<0.05),造模后6、12、24 h回肠组织MLCK、p-MLC2蛋白表达水平均高于对照组,且12、24 h高于6 h,24 h高于12 h(P均<0.05)。AP组回肠组织MLCK蛋白表达水平与REG3γ、α-防御素5、溶菌酶mRNA水平呈负相关(r分别为-0.96、-0.95、-0.93,P均<0.05),p-MLC2蛋白表达水平与REG3γ、α-防御素5、溶菌酶mRNA水平亦呈负相关(r分别为-0.96、-0.94、-0.96,P均<0.05)。结论AP大鼠存在肠黏膜屏障损伤,MLCK/p-MLC2信号通路激活参与了AP肠黏膜屏障损伤的过程,该作用可能与潘氏细胞分泌抗菌肽减少相关。 展开更多
关键词 MLCK/p-MLC2信号通路 紧密连接蛋白 肠黏膜屏障损伤 急性胰腺炎
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基因枪法介导转人工合成Rs-AFP2基因小麦的获得和检测 被引量:7
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作者 廖勇 张增艳 +4 位作者 徐惠君 杜丽璞 姚乌兰 辛志勇 任正隆 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期15-19,共5页
萝卜(Raphanus sativus)抗菌肽Rs—AFP2在体外强烈抑制小麦赤霉病菌(Fusarium graminenrum)、黄色镰孢菌(Fusarium culmorum)、烟草赤星病(Alternaria longipes)的菌丝生长。为了研究Rs-AFP2在小麦抗病育种上的应用潜力,人工... 萝卜(Raphanus sativus)抗菌肽Rs—AFP2在体外强烈抑制小麦赤霉病菌(Fusarium graminenrum)、黄色镰孢菌(Fusarium culmorum)、烟草赤星病(Alternaria longipes)的菌丝生长。为了研究Rs-AFP2在小麦抗病育种上的应用潜力,人工合成了Rs-AFP2基因。通过基因重组技术(包括限制性内切酶酶切和连接),将人工合成的R以FP2基因替代单子叶高效组成型表达栽体pAHC25中的GUS基因,构建了R£AFP2基因的单子叶高效表达栽体pUAFP2。该栽体除携带受Ubiquitin启动子控制的Rs-AFP2基因表达盒外,还具有1个受Ubiqutin启动子控制的Bar基因表达盒,后者可为后续利用除草剂Bialaphos筛选转化再生植株提供抗性;采用基因枪法轰击小麦品种扬麦12、济麦19、晋麦47和豫麦34幼胚共4042个,经过2~3次Bialaphos筛选,最终获得扬麦12再生植株316株;利用高效表达栽体pUAFP2的Bar和Rs-AFP2基因的特异引物对上述成活的转化植株进行PCR检测,获得Bar和Rs-AFP2基因均为阳性的植株58株,转化率为1.43%。 展开更多
关键词 萝卜rs-afp2 小麦 转基因 载体构建
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乳铁素B的抗菌活性及其影响因素 被引量:5
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作者 张东送 庞广昌 +2 位作者 谷芳 王彦 刘萍 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期1-5,共5页
乳铁素B是牛乳铁蛋白经胃蛋白酶酶解后得到的最重要的抗菌肽,具有较强抗菌活性. 研究表明,乳铁素B对大肠杆菌的最小抑菌质量浓度为0.5 mg/mL,对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为0.4 mg/mL;葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、牛血清白蛋白(BSA)、尿... 乳铁素B是牛乳铁蛋白经胃蛋白酶酶解后得到的最重要的抗菌肽,具有较强抗菌活性. 研究表明,乳铁素B对大肠杆菌的最小抑菌质量浓度为0.5 mg/mL,对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为0.4 mg/mL;葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、牛血清白蛋白(BSA)、尿素、硫酸铵在0~10 mg/mL,乳糖、可溶性淀粉在0~4 mg/mL的质量浓度范围内,对乳铁素B的抗菌活性影响不大;当NaCl或KCl的浓度为25~100 mmol/L,MgCl2或CaCl2的浓度为1.0~5.0 mmol/L时,乳铁素B的抗菌活性就会大大降低;随着缓冲盐浓度和有机酸浓度(25~100 mmol/L)的增大,乳铁素B的抗菌活性呈下降趋势,且在微碱性环境下乳铁素B表现出较强的抗菌活力. 展开更多
关键词 活性 乳铁素B 金黄色葡萄球 最小抑浓度 牛血清白蛋白 牛乳铁蛋白 可溶性淀粉 CaCl2 MGCL2 有机酸浓度 蛋白 质量浓度 大肠杆 浓度范围 活性影响 NaCl 活力 碱性环境 葡萄糖 麦芽糖 硫酸铵 KCl 盐浓度 酶解 蔗糖 乳糖
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重组鸡β-防御素2蛋白的表达与生物学活性鉴定 被引量:2
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作者 马得莹 张婷婷 +5 位作者 徐杨 高梦莹 王秋玲 徐倩倩 韩宗玺 刘胜旺 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期56-60,108,共6页
为探讨鸡β-防御素2(Av BD2)的生物学特性,研究将Av BD2基因克隆到原核表达载体p Pro EX HTa的Eco RⅠ和XhoⅠ双酶切位点上,构建重组表达质粒p Pro EX-Av BD2,将重组质粒转化大肠杆菌Rosetta感受态细胞,用IPTG对其菌液进行诱导表达。Tri... 为探讨鸡β-防御素2(Av BD2)的生物学特性,研究将Av BD2基因克隆到原核表达载体p Pro EX HTa的Eco RⅠ和XhoⅠ双酶切位点上,构建重组表达质粒p Pro EX-Av BD2,将重组质粒转化大肠杆菌Rosetta感受态细胞,用IPTG对其菌液进行诱导表达。Tricine-SDS-PAGE电泳结果表明,His-Av BD2重组蛋白分子质量约12 ku,与预期一致。将该重组蛋白纯化后,通过菌落计数法测定其体外抗肠炎沙门氏菌、四联球菌、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌等抑菌活性,盐离子浓度对其抗菌活性的影响及其溶血活性。结果显示,Av BD2重组蛋白对所测定的4株细菌有显著抗菌活性,高盐浓度显著降低其抗菌活性。该重组蛋白溶血活性极低。 展开更多
关键词 AvBD2 重组蛋白 活性
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普通菜豆中烟草水杨酸结合蛋白2同源基因的鉴定及表达特征分析
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作者 薛仁风 王利 +1 位作者 丰明 葛维德 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期642-649,共8页
水杨酸(salicylic acid,SA)能够诱导植物产生系统抗病性反应,而水杨酸结合蛋白2(salicylic acid binding protein 2,SABP2)是植物细胞内调控水杨酸水平的重要酯酶。本研究利用生物信息学方法在普通菜豆中搜索到7个烟草水杨酸结合蛋白2... 水杨酸(salicylic acid,SA)能够诱导植物产生系统抗病性反应,而水杨酸结合蛋白2(salicylic acid binding protein 2,SABP2)是植物细胞内调控水杨酸水平的重要酯酶。本研究利用生物信息学方法在普通菜豆中搜索到7个烟草水杨酸结合蛋白2的同源基因,命名为PvMES1~PvMES7。分别在2个菜豆感病品种(白刀豆和BRB130)和2个抗病品种(黑芸豆和260205)中接种尖镰孢菌FOP-DM01菌株(Fusarium oxysporum f.sp.phaseoli isolate,FOP-DM01)后,检测寄主根组织中水解水杨酰甲酯(methyl salicylate,Me SA)活性和游离SA含量的变化,并利用荧光定量PCR技术分析7个PvMES基因表达量变化。结果表明,PvMES1、PvMES3、PvMES4、PvMES5和PvMES6的转录表达受FOP-DM01菌株诱导均呈现不同程度的升高,其中黑芸豆中PvMES5基因和260205中PvMES1基因表达量变化最显著,接种3 d后分别升高至0 d表达量的7.6倍和5.6倍。此外,黑芸豆和260205根中水杨酰甲酯酯酶(methyl salicylate esterase,MES)活性显著提升,游离SA含量也相应升高,激活寄主内SA介导的相关防御反应。本研究结果可以为普通菜豆镰孢菌枯萎病抗病分子育种和抗病机理研究提供理论基础。 展开更多
关键词 普通菜豆 镰孢枯萎病 水杨酸结合蛋白2 直系同源基因 系统获得性
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