高效液相色谱-串联质谱法测定除螨类化妆品中10种抗螨虫药物

建立了12 min内同时测定除螨类化妆品中10种抗螨虫药物成分的高效液相色谱-质谱(HPLC-MS/MS)的定性定量分析方法。实验比较了不同提取溶剂,优化了色谱和质谱等仪器条件参数。最终采用以甲醇溶液为提取溶剂对化妆品样品进行超声提取,过0.22μm滤膜,选择Thermo Hypersil GOLD C18(100mm×2.1mm,1.9μm)色谱柱分离,以0.01%甲酸水(含2 mmol·L^(-1)甲酸铵)-0.01%甲酸甲醇(含2 mmol·L^(-1)甲酸铵)作为流动相梯度洗脱,采用电喷雾离子源正离子模式和在多反应监测(MRM)模式下测定,外标法定量。实验结果显示,10种抗螨虫药物均在12min内出峰,定量限通过分别稀释相应标准溶液至仪器的10倍信噪比(S/N=10)获得,并将该点作为标曲最低点,以各组分的质量浓度对相应的峰面积进行线性回归,在各自线性范围内,各组分线性关系良好,相关系数大于0.999,检出限为0.015~0.075 mg·kg^(-1),定量限为0.05~0.25 mg·kg^(-1)。水剂类、乳液膏霜类两种基底在低(定量限附近)、中、高三个加标浓度下,回收率为81.24%~109.57%,相对标准偏差(RSD)均小于7%。该方法操作简单,检测迅速,重复性好,能够满足除螨类化妆品中10种抗螨虫药物非法添加的快速筛查和定量分析。

EurBeST——商业养蜂条件下的抗螨蜂种选育

上期我们讲了抗螨蜜蜂的选育以及取得的成效,本期我们继续讨论选育抗螨蜜蜂过程中遇到的问题及建议。一、种蜂王的用户调查对目前蜂王市场的调查显示,客户的期望值很高,但满意度一般。欧洲养蜂人希望买到高品质的蜂王,其中最重要的是抗病和高产。但是,他们对抗病性的满意度最低(图1)。近50%的用户认为选择育种是实现免用药养蜂的重要甚至唯一的手段。具有悠久育种传统的国家的用户对选择育种的认可率更高。

苹果抗螨性鉴定及抗螨机制研究进展

总结近30年来国内外苹果抗螨性鉴定及抗螨机制研究概况,对苹果抗螨性鉴定方法进行汇总分析,并从苹果叶片外部形态(如叶毛)、组织结构(如叶片厚度、气孔密度等)、生理生化(如营养成分、次生代谢物质等)及与捕食螨的关系(如化感物质、叶毛、虫菌穴)等4个方面阐述了苹果抗螨机制的研究进展,并对存在问题提出了建议或看法。最后针对研究现状,提出了今后在抗螨性研究中应重点开展的研究工作,以期全面系统地提高苹果抗螨性研究水平。

棉花川98系的抗螨性及抗螨机理研究

以陆地棉与海岛棉的远缘杂交后代川 98为研究对象 ,采用螨害指数法和产量下降率法两种方法评价川 98的抗螨性。研究在不同逆境下的抗螨性和从不同方面研究川 98的抗螨机理 ,结果表明 :川 98的抗螨性与海岛棉抗螨品种PimaS 3相当 ,其螨害指数明显地低于陆地棉感螨品种。川 98受螨害后的产量下降率最小 ,仅为 8% ,而在逆境条件下川 98仍表现出良好的抗螨性。川 98对棉叶螨的抗性存在多种抗性机制。

中蜂与意蜂营养杂交对意蜂抗螨力的影响研究

以中华蜜蜂(ApisceranaceranaFabricius)和意大利蜜蜂(ApismelliferaligusticaSpinola)为实验材料,用中华蜜蜂蜂王浆饲喂意大利蜜蜂幼虫,进行中华蜜蜂与意大利蜜蜂营养杂交,然后检测营养杂交亲本意蜂蜂群、杂交子1代意蜂蜂群和杂交子2代意蜂蜂群的蜂螨自然寄生率;同时采用人为转接蜂螨技术,检测实验蜂群的抗螨力。结果表明:亲本意蜂群与营养杂交子代抗螨力都存在显著差异(P<0.01),营养杂交子代的抗螨力得到显著提高;但营养杂交子1代和营养杂交子2代之间差异不显著(P(0.05)。

保护酶PPO在木薯种质抗螨中的功能初步研究

目前尚不了解保护酶PPO(polyphenol oxidase)在木薯种质抗螨中的作用,为证实PPO的抗螨功能,本研究通过定量PCR和酶学试验手段分析了朱砂叶螨取食抗、感螨木薯种质后,PPO的基因表达量和酶活分别在木薯和朱砂叶螨中的变化情况。结果表明,一方面,朱砂叶螨取食1d和8d后,感螨木薯种质BRA900体内MePPO的表达量和PPO总酶活仅分别是为害前的0.99、1.02倍和1.05、1.03倍,而在抗螨木薯种质C1115体内则分别较为害前提高1.78、1.74倍和1.74、1.72倍,显著高于感螨木薯水平;另一方面,朱砂叶螨取食感螨种质BRA900 1 d和8 d后,保护酶TcPPO的基因表达量和PPO酶活分别是取食前的0.98、0.97倍和0.98、1.10倍,而取食抗螨木薯种质C1115 1 d和8 d后分别降低至为害前的0.52、0.64倍和0.54、0.57倍,显著低于取食感螨木薯水平。上述结果初步证实了保护酶PPO在木薯种质抗螨中的功能。

保护酶CAT在木薯种质抗螨中的功能初步研究

为验证保护酶CAT在木薯抗螨中的功能,测定分析了朱砂叶螨取食抗、感螨木薯种质后,CAT的表达量和酶活分别在木薯和朱砂叶螨中的变化情况。结果表明,一方面,朱砂叶螨取食1 d和8 d后,感螨木薯种质BRA900体内Me CAT1的表达量和CAT总酶活仅分别较为害前提高1.11倍、1.24倍和1.06倍、1.15倍,而在抗螨木薯种质C1115体内则分别较为害前提高2.75倍、2.62倍和2.36倍、2.38倍,均显著高于感螨木薯水平。另一方面,朱砂叶螨取食感螨种质BRA900 1 d和8 d后,保护酶Tc CAT的基因表达量和CAT酶活分别是为害前的1.13倍、0.98倍和1.02倍、0.99倍,而取食抗螨木薯种质C1115 1 d和8 d后分别降低至为害前的0.57倍、0.61倍和0.52倍、0.61倍,均显著低于取食感螨木薯水平。以上结果初步证实了保护酶CAT在木薯中被诱导能够缓解朱砂叶螨造成的氧化损伤,在朱砂叶螨中被抑制不利于取食为害,从而形成木薯抗螨性的功能。本研究为将CAT作为基因资源应用于抗螨木薯种质创制提供了理论基础。

棉花抗螨性的基因效应分析

采用中棉12×7124和徐州184×7124两个陆地棉×海岛棉杂交组合6个家系为材料,在大田接螨和笼罩接螨鉴定条件下,分析抗螨性基因效应,遗传方差分量、遗传力和最少因子数估值在苗期、蕾期和花铃期的动态变化。加性效应和加性×显性互作上位性效应是2个组合不同生育期的主要遗传效应,加性方差是抗螨性遗传变异的主要来源。而加性×加性互作效应一般不存在,显性和显性×显性互作效应则因组合、生育期和鉴定方法而异。在苗期和蕾期,主要有一个效应较大的因子在起作用。

抗螨蜂种第一代蜂王适应性和繁殖能力研究

【目的】饲养观察抗螨蜂种第一代蜂王在云南的适应性和蜂群繁殖能力，为成功培育抗螨性能和生产性能双优的蜜蜂品种寻找突破点，为抗螨蜂种育种工作奠定基础。【方法】2010年8月上旬～2011年6月上旬，对抗螨蜂种第一代蜂王蜂群饲养适应性进行观察，秋季和春季蜂群繁殖时与浙大蜜浆高产蜂种第一代蜂王群的群势增殖能力进行测定比较。【结果】抗螨蜂种第一代蜂王适应性强，采集积极性高，蜂群最大群势可维持16．4脾（成蜂、幼虫、蛹的总和）。两个蜂种第一代蜂王繁殖后总数（成蜂、卵、幼虫、蛹）的增长分别达到极显著水平（P〈0．01）和显著水平（P〈0．05）。抗螨蜂种第一代蜂王繁殖前后总数净增长高于浙大蜜浆高产蜂种第一代蜂王，但差异不显著（P〉0．05），只有成蜂量的净增长差异显著（P〈0．05）；抗螨蜂种第一代蜂王繁殖期间平均增长率整体上高于浙大蜜浆高产蜂种第一代蜂王（P〉0．05）。【结论】抗螨蜂种第一代蜂王的适应性强，秋繁和春繁繁殖能力强，比浙大蜜浆高产蜂种第一代蜂王繁殖稍好，可为全国进行抗螨蜂种的育种工作提供借鉴。

西方蜜蜂抗螨蜂种子代形态测定分析

蜜蜂外部形态特征是蜜蜂分类鉴别的重要依据,而且形态特征与蜂群的经济性能紧密相关,因此,在抗螨蜜蜂遗传育种上可作为遗传标记辅助相关生产性状的选育。本实验采集西方蜜蜂抗螨蜂种子一代和子二代与本地意蜂、浙大蜜浆高产蜂种4个类型共20群蜜蜂样本,每群测定分析15只,每只工蜂共有38个测定的形态指标。结果表明抗螨蜂种子代在形态特征上与本地意蜂和浙大蜜浆高产蜂种存在显著差异;区辨和聚类分析得出,抗螨蜂种子代之间为一个类群,与浙大蜜浆高产蜂种聚为一个分支,与本地意蜂相对分开。

测试抗螨织物驱螨效用的新方法

根据粉尘螨的生理特点,提出一种测试抗螨织物的驱螨效用的新方法。新方法对每一个样品进行独立培养,每个培养皿都盖上皿盖,消除了试验样品与对照样品的相互干扰。通过对几种具有抗螨功能的棉布样品进行驱避效用检测,同时采用常规方法进行对比检测,发现新方法的平行实验重复性好,快速简便,检测结果更准确可靠。

中蜂与意蜂营养杂交对意蜂抗螨性及卫生行为能力的影响

通过人工添加中华蜜蜂王浆来培育江山2号与法国意蜂的杂交蜂王,并测定江山2号、中华蜜蜂、营养杂交子一代及子四代抗螨性能和卫生行为能力指标。结果表明:营养杂交蜂群抗螨性均显著高于亲本江山2号,工蜂卫生行为能力也显著高于江山2号,且随营养杂交代数的增加,蜂群的抗螨性也显著增强。

茶树生化指标与抗螨性的相关研究

1992～1993年在四川省农科院茶叶研究所利用8个茶树品种,研究了咖啡碱,茶多酚、氨基酸、可溶性糖含量,叶绿素总量和叶绿素a含量等生化成分指标与茶树抗侧多食跗线螨(Ployphagotassonemus latus Banks)的相互关系.相关分析结果表明,茶树鲜叶可溶性糖含量与感螨量呈显著的正相关r=0.722;氨基酸含量与感螨量呈显著的负相关r=-0.833;其它生化成分含量对感螨量无明显影响..

应用离体叶片法鉴定棉花种质抗螨性的研究

应用离体叶片法,对9个棉花种质进行了鉴定,试验结果表明;种质间抗生性和忌避性差异显著;同株棉花不同部位的叶片对朱砂叶螨的抗生性无显著性差异。通过对叶螨在不同棉花种质上种群增长动态进行系统聚类,可将9个棉花种质划分为3类:斯字棉825-91、杞县86789、鄂棉314、苏联8911为1类,中棉164、潼南接龙棉、新库861517-2、南农NAC90-2为1类,美棉7-15独立为1类。依据朱砂叶螨在不同种质上的种群增长曲线和高峰期螨量增长倍数,可将9个种质划分为3个类型;斯字棉825-91、新库861517-2为抗性类型,潼南接龙棉、美棉7-15、南农NAC90-2为感性类型,其余为中抗类型。从忌避性看:斯字棉825-91、美棉7-15表现出较高的忌避性。

火炬树抗螨性生物测定

本文分别测定了二斑叶螨Tetranychus urticae Koch和山楂叶螨Tetranychus viennensis Zacher对火炬树的选择性，以及限制性条件下火炬树对叶螨的生存及产卵的影响。结果表明：在火炬树叶和苹果叶之间，二斑叶螨和山楂叶螨在2h，6h，10h，12h对火炬树的选择率分别为9．5％，6．5％，5％，5％和2％，5％，1％和0，显著低于对苹果的选择率。被限制于火炬树叶上生存的山楂叶螨144h后死亡率100％，产卵力随生存时间增加而下降，至96h后产卵终止；被限制于火炬树叶上生存的二斑叶螨240h后全部死亡，整个观察期内（24～216h）始终没有产卵。据此认为：叶螨强烈拒食火炬树，火炬树对叶螨具有生存、产卵抑制作用，但这种抑制作用呈现种问差异。

玉米抗螨性的大棚人工诱发鉴定与评价分析

利用大棚条件,在人为控制和创造既能满足玉米正常生长发育,又能促使叶螨发生的条件下,进行了玉米抗螨性的鉴定,并以各自交系的受害指数（DMI）和受害面积比率（DMR）为基础采用聚类法和DMR-直观法划分玉米对叶螨的抗感性。结果表明：DMI、DMR和叶螨结网面积比率（SWR）分别为0.06~0.91、1.12%~93.98%和14.10%~99.50%间,其最高值分别是最低值的15.17、83.91和7.06倍;3者间呈极显著正相关（P〈0.01）。在2种聚类中,参试自交系均分为抗（占52.70%）和感（占47.30%）两大类群及高抗（占27.02%）、抗（占25.68%）、中感（占24.32%）、感（占16.22%）和高感（占6.76%）等5个亚类群;各类群间的DMI和DMR都存在极显著差异（P〈0.01）。基于DMI和DMR聚类分析划分的类群及亚类群中所包含的自交系种类及其数量都一致,自交系的抗感划分结果相同。与此相比,基于DMR值直观划分玉米对叶螨的抗感性,抗性自交系数量（占78.38%）偏多、抗性偏高。在参试自交系中,BSSSS53-B、9F592、K10-14-1和铁7922的DMI（〈0.10）、DMR（≤3.00%）和SWR（〈20.00%）都最小、抗螨性最强,而GNS12059和Mo17-476的DMI（〉0.75）、DMR（〉80.00%）和SWR（〉98.00%）都最大、抗螨性最弱;其中,Mo17-476对玉米叶螨最为敏感。

基于BSA-seq技术挖掘糙皮侧耳抗螨候选基因

根据前期不同糙皮侧耳菌株抗螨性差异调查结果,构建了糙皮侧耳孢子单核体群体,群体内479个菌株抗螨性呈正态分布。利用BSA-seq技术对高抗和高感混池进行SNP和InDel位点的欧氏距离关联分析,将抗螨性候选基因定位到一条染色体上,2个相邻候选区域总长度为1.75 Mb,内有基因605个,其中非同义突变基因353个,移码突变基因89个。经功能注释以及GO和KEGG通路富集等分析,发现26个候选基因参与了信号传导、防御过程和次级代谢相关通路,推测这些候选基因可能与糙皮侧耳抗螨性相关。

受瓢虫伤害的茄子抗螨性初步研究

从侧多食跗线螨的发育历期（卵、幼螨、若螨、雌成螨）、产卵量、种群增长倍数和田间种群密度的角度比较被茄二十八星瓢虫取食后叶片（处理）与未被取食的正常叶片（对照）饲养该螨之间的差异。结果表明：该螨的产卵量、卵和雌成螨历期、田间种群密度、种群增长倍数在处理和对照之间存在显著差异，幼螨和若螨历期之间差异不明显。处理叶片的全世代历期比对照长，而产卵量比对照低。

陕西关中主栽小麦品种田间抗螨性鉴定

１９９４～１９９６年，选择陕西关中目前主栽小麦品种３０个，田间自然感虫进行抗螨性鉴定。结果表明，不同小麦品种对麦圆叶爪螨（Ｐｅｎｔｈａｌｅｕｓｍａｊｏｒ（Ｄｕｇｅｔ））的抗性有一定的差异。比较而言，陕１６７，小偃５０４，陕２２９，ＮＣ３３２等品种的抗螨性较强；８７１６２，８３２９，陕９２７，陕８００７，５４８９，９０－３等品种的抗螨性较弱；其余品种的抗螨性介于上述二者之间。个别品种的抗螨性在不同时期的相对排序中变化较大，表现了抗性的时间特定性。

棉花品系川98抗螨性能研究

棉花品系川98是四川省棉花研究所用海陆杂交方法选育而成,在当地具有高产和病虫兼抗的性能。笔者于1988年引入郑州,采用生命表的方法研究了其抗螨性能。