VSV-G假型反转录病毒介导的人凝血因子Ⅸ cDNA在新生血友病B小鼠中的有效转移和表达

研究探索了 ＶＳＶ－Ｇ假型反转录病毒 ｉｎ ｖｉｖｏ途径基因治疗血友病Ｂ的可行性．采用新型包装细胞 系 ２９３－ＧＰＧ制备了 ＶＳＶ－Ｇ／ＧＩＮａＢＡⅨ假型病毒，该病毒的最高滴度可达 ８．５ × １０～８ ＣＦＵ· ｍＬ～（－１），与传 统的反转录病毒相比具有更高抗补体灭活效应（Ｐ＜０．００１），并初步证实了新生鼠血清补体对ＶＳＶ－Ｇ假 病毒的灭活作用明显弱于成年鼠血清补体（Ｐ＜０．０１）．不同剂量的病毒上清液经腹腔注入新生血友病Ｂ 鼠后，各治疗组小鼠血浆均可持续检测到 ｈＦⅨ抗原，最高峰值为（７２．５±６．１） ｎｇ·ｍＬ～（－１），表达持续超过 １２０ ｄ．治疗后小鼠的凝血功能均有一定程度的改善，以大剂量治疗组的改善最为明显，凝血活性提高 至（３．４± １．５）％， ＡＰＴＴ时间缩短至（４３．６± ７．２）ｓ． ｈＦⅨ的表达水平和凝血功能的改善程度与所用病毒的剂 量呈正相关．治疗小鼠体内未检测到抗ｈＦⅨ抗体，未发生任何治疗相关的毒副反应和生殖细胞的基因 转移．研究结果表明，采用 ＶＳＶ－Ｇ假型反转录病毒开展新生血友病 Ｂ 小鼠 ｉｎ ｖｉｖｏ基因治疗是可供选择 的有效方法．