免疫性血栓症和习惯性流产的标志物—抗血管五糖(VPS)抗体的检测

目的 :探讨血栓形成和习惯性流产发病的免疫机理。方法 :利用ELISA法测定人血清中的抗 VPS抗体 ,结果 :96例血栓症中 ,18例抗 VPS抗体阳性 (18 8% ) ,34例习惯性流产有 16例阳性 (4 7 1% ) ,16 4例无血栓形成史的自身免疫性疾病及其它疾病仅 3例阳性 (1 8% ) ,正常人 6 1例均阴性 (0 % )。阳性病例抗 VPS抗体OD值明显高于正常人 ,18例阳性血栓症中的 8例和 16例阳性习惯性流产中的 14例抗磷脂抗体 (aPL)检测阴性。实验室发现 ,抗磷脂抗体 (aPL)阴性而抗 VPS抗体阳性的病例组显示与APTT延长或血小板减少无关。然而 ,在抗磷脂抗体 (aPL)阳性组病例则通常与此相关。结论 :抗VPS抗体参与血栓形成和习惯性流产发病过程 ,可作为此类疾病的标志物而用于临床观察。

缺血性视网膜静脉阻塞继发黄斑水肿患者基线血清己糖激酶1抗体滴度与抗VEGF治疗后视力改善的相关性分析

目的分析缺血性视网膜静脉阻塞继发黄斑水肿(RVO-ME)患者基线血清己糖激酶1抗体滴度与抗血管内皮生长因子(VEGF)治疗后视力改善的相关性。方法招募2017年6月至2020年2月在首都医科大学宣武医院确诊为缺血性RVO-ME并接受初始抗VEGF治疗的53例患者,其中缺血性视网膜中央静脉阻塞(CRVO)23例(CRVO组),缺血性视网膜分支静脉阻塞(BRVO)30例(BRVO组)。另选取该院同期30例行超声乳化的白内障患者作为对照组。研究对象行基线血清己糖激酶1抗体滴度检测、眼科常规检查和光学相干断层成像(OCT)检查。所有RVO-ME患者按照“3+按需治疗方案(pro re nata,PRN)”向玻璃体内注射抗VEGF药物治疗。随访12个月,采用多元线性回归分析缺血性RVO-ME患者抗VEGF治疗后视力改善的影响因素。结果CRVO组基线logMAR BCVA高于对照组和BRVO组,CRVO组和BRVO组基线CRT、基线血清己糖激酶1抗体滴度高于对照组,且CRVO组基线CRT、基线血清己糖激酶1抗体滴度高于BRVO组,差异有统计学意义(P<0.05)。RVO-ME患者基线血清己糖激酶1抗体滴度与随访6个月(r=0.377,P=0.005)、9个月(r=0.362,P=0.008)和12个月(r=0.465,P<0.001)时BCVA改善呈正相关,与随访12个月时中断EZ横向长度减少值(r=0.401,P=0.001)呈正相关。多元线性回归分析结果显示,基线logMAR BCVA、基线血清己糖激酶1抗体滴度是缺血性RVO-ME患者抗VEGF治疗随访12个月时BCVA改善的影响因素(P<0.05)。结论己糖激酶1抗体作为一种新的血清生物标志物,与缺血性RVO-ME患者抗VEGF治疗后的视力改善相关。

利用五特征转基因小鼠获得的全人源抗VEGF单抗的抑制血管生成及抗肿瘤活性(英文)

为研究一种全人源抗VEGF单克隆抗体在体外和体内的抑制血管生成和抗肿瘤活性,利用细胞划痕实验检测抗体抑制人脐静脉内皮细胞(HUVEC)迁移的活性;MTT法检测抗体抑制分泌VEGF的肿瘤细胞增殖能力;Annexin V/PI双染检测抗体诱导肿瘤细胞凋亡活性;通过建立胃癌原位模型,静脉注射给予不同剂量的抗体,免疫组化方法检测抗体在体内的抑制血管生成和抗肿瘤活性。结果表明一定剂量的全人源抗VEGF抗体能够显著抑制HUVEC细胞的迁移,明显抑制4种分泌VEGF的肿瘤细胞增殖并显示了一定的诱导肿瘤细胞凋亡的能力。静脉注射一定剂量的抗体能够显著抑制胃癌原位肿瘤的生长和肿瘤血管生成。进而表明该全人源抗VEGF单克隆抗体能够在体外和体内都表现出显著的抑制血管生成和抗肿瘤活性。

补阳还五汤联合骨髓间充质干细胞移植对大脑中动脉栓塞模型整合素相关因子的影响

背景:前期研究发现,补阳还五汤联合骨髓间充质干细胞移植可发挥协同抗脑缺血损伤作用。目的:分析骨髓间充质干细胞移植联合补阳还五汤促进脑缺血血管新生的作用。方法:将96只SD大鼠随机分为4组,均制作大脑中动脉栓塞模型。联合组于造模前3 d灌胃给予补阳还五汤10 mL/kg,1次/d,造模成功后2 h灌胃1次,以后每12 h灌胃1次;局灶脑缺血2 h再灌注2 h后,干细胞组、联合组向脑室中注入骨髓间充质干细胞悬液,30 min后再注射抗CD34、CD45抗体;抗体组注射抗CD34、CD45抗体;模型组注射生理盐水。联合组于再灌注后12,24,36,48 h进行血清αVβ3水平及脑组织免疫组织化学、Q-PCR、免疫印迹检测,其余3组均于再灌注后36 h检测上述指标。结果与结论:(1)血清αVβ3水平:抗体组血清αVβ3水平低于模型组(P<0.05),干细胞组、联合组高于抗体组(P<0.05),且联合组再灌注不同时间点的血清αVβ3水平高于干细胞组(P<0.01);(2)免疫组织化学:抗体组CD34阳性细胞数量少于模型组(P<0.05),干细胞组、联合组高于抗体组(P<0.05);(3)Q-PCR与免疫印迹检测:与模型组相比,抗体组、干细胞组p FAK蛋白表达水平降低(P<0.05),FAK基因及蛋白表达变化不大;与其他组比较,联合组FAK蛋白(自再灌注后24 h开始)和p FAK蛋白(自再灌注12 h开始)显著升高(P<0.05,P<0.01),且随着再灌注时间延长有逐渐升高趋势;(4)结果表明:骨髓间充质干细胞移植联合补阳还五汤可逆转抗CD34+CD45抗体引起的血管内皮细胞数量减少、整合素αVβ3及其下游信号分子表达下降,促进血管新生。

ANCA诱导中性粒细胞释放正五聚素蛋白3

目的:研究正五聚素蛋白3(PTX3)在中性粒细胞的表达及释放情况,为进一步探讨PTX3在抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)相关性小血管炎(AAV)中的作用及机制奠定基础。方法:采用PolymorphprepTM进行密度梯度离心分离健康志愿者和AAV患者外周静脉血中性粒细胞,通过健康人血清、AAV患者血清、TNF-α和溶酶体膜蛋白2(LAMP-2)抗体分别刺激健康人外周血中性粒细胞,ELISA检测培养上清PTX3水平,免疫荧光观察中性粒细胞胞外捕网(NETs)的形成,激光共聚焦显微镜检测可溶性识别受体PTX3的表达。结果:LAMP-2抗体及AAV患者血清均能促进中性粒细胞PTX3的释放。与正常中性粒细胞对照组相比,LAMP-2抗体刺激组中性粒细胞上清PTX3水平明显升高(P<0.01);AAV患者血清刺激组中性粒细胞中PTX3表达的荧光强度显著高于用健康人血清刺激的对照组(P<0.01),进一步通过激光共聚焦显微镜进行形态学观察,发现PTX3由中性粒细胞通过NETs形成释放。结论:PTX3可由ANCA诱导的NETs释放至胞外,参与血管炎的病理生理过程。

补体活化旁路途经在抗中性粒细胞胞质抗体相关性血管炎发病机制中作用的研究进展

抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)相关性血管炎(AAV)是一组与环境、遗传及自身免疫等多因素有关的系统性疾病,常导致患者死亡。因AAV的肾损害病理检查多显示为寡或无明显免疫复合物沉积,虽然有证据显示ANCA参与AAV的发病,但免疫复合物及补体系统活化在AAV发病中的作用长期未被重视。近10余年来,越来越多的病理、动物实验及临床研究证据,提示补体活化旁路途经在AAV的发病中发挥关键作用,尤其是C5a在AAV的病理损害中的作用成为研究热点,对C5a及C5a受体在AAV发病中作用的深入探讨,不仅进一步提示补体旁路途经参与AAV的发病,而且为临床治疗AAV提供潜在的靶点途经。

抗中性粒细胞胞质抗体相关性血管炎相关抗体研究进展

ANCA相关性血管炎(AAV)是一组累及多系统的寡免疫复合物型小血管炎,其确切病因及发病机制目前尚不明确。目前该病临床误诊率及病死率仍然较高。传统抗体ANCA仍是目前用于诊断及分型依据的特异性实验室指标,但其本身对于监测疾病的活动度尚缺乏足够的敏感度和特异度。因此发现并应用新型生物标记物对AAV进行诊断,监测疾病活动度,评估不同类型AAV的治疗效果以及预测其复发情况,有望实现AAV的精准诊断和治疗。

血清MASP-2、AECA、IL-26水平与类风湿关节炎患者疾病活动度的相关性

目的分析血清人甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶-2(MASP-2)、抗血管内皮细胞抗体(AECA)、白细胞介素-26(IL-26)水平与类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者疾病活动度的相关性。方法选取92例RA患者为RA组,另选取同期92例健康体检者为对照组。比较2组研究参与者不同疾病活动度入院时血清MASP-2、AECA、IL-26水平,比较不同活动度患者入院时血清类风湿因子(RF)水平,分析血清MASP-2、AECA、IL-26水平与RF水平、28处关节疾病活动度(DSA28)评分的相关性及联合诊断效能。结果RA组血清MASP-2水平低于对照组,AECA检出率高于对照组,血清IL-26水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);血清MASP-2水平比较:重度患者<中度患者<轻度患者<稳定期患者,差异有统计学意义(P<0.05);血清IL-26、RF水平比较:稳定期患者<轻度患者<中度患者<重度患者,差异有统计学意义(P<0.05);稳定期、轻度患者AECA阳性率与重度患者比较,差异有统计学意义(P<0.05);入院时MASP-2水平与RF水平、DSA28评分呈负相关,AECA、IL-26水平与RF水平、DSA28评分呈正相关(P<0.05);MASP-2、AECA、IL-26水平联合诊断曲线下面积(AUC)为0.920。结论血清MASP-2、AECA、IL-26水平与RA患者疾病活动度密切相关,可为临床诊断疾病、评估病情提供参考。