小檗碱的体外抗衣原体活性研究

研究旨在阐明天然产物小檗碱的体外抗衣原体活性。首先,通过测定小檗碱对沙眼衣原体L2和鼠衣原体MoPn包涵体形成数量和感染性子代滴度的影响,发现小檗碱对两种衣原体均呈浓度依赖性抑制。其次,采用CCK-8试剂盒测定化合物对细胞活力的影响,显示浓度不高于8μmol/L时小檗碱无明显宿主细胞毒性。借助宿主细胞和衣原体预处理实验,发现小檗碱不能直接作用于宿主细胞,仅能微弱地直接作用于衣原体而影响衣原体的感染过程。最后,分析小檗碱对衣原体增殖过程的影响。后加药和撤药实验结果显示,小檗碱主要作用于2~12 h的EB→RB转化阶段;长期耐受实验结果表明,小檗碱可以延缓衣原体的生长周期,但不能完全杀死衣原体。综上,小檗碱具有广谱的体外抗衣原体活性,对衣原体增殖过程的干扰作用强于对感染过程的影响。

二氢苯并呋喃醇化合物体外抗衣原体活性研究

目的分析前期合成的5个二氢苯并呋喃醇类化合物的抗衣原体活性及其作用机制,为寻找新型抗衣原体活性物质提供参考。方法通过免疫荧光染色和测定感染性子代滴度的方法,评估化合物对沙眼衣原体L2(Chlamydia trachomatis L2,C t L2)和肺炎衣原体AR39(Chlamydia pneumonia,Cpn AR39)的抑制作用,并计算子代滴度的半数抑制浓度(IC_(50))值。通过Evans Blue细胞形态染色、4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)细胞核染色和增殖细胞计数,评估化合物对宿主细胞活力的影响。通过细胞和衣原体预处理实验,检测化合物对衣原体感染过程的影响;通过后加药和撤药实验,检测化合物对衣原体增殖过程的影响。结果5个化合物均能浓度依赖性抑制C t L2和Cpn AR39生长,其抑制感染性子代滴度的IC_(50)均在5μmol·L^(-1)附近,同时在16μmol·L^(^(-1))时没有明显的细胞毒性。5个化合物均对衣原体感染过程没有影响;化合物1,3,5对衣原体的增殖全过程均具有较强的抑制作用,化合物2,4的抑制作用较弱且需要全过程的持续作用。结论5个二氢苯并呋喃醇类化合物均具有广谱抗衣原体活性,其作用机制与衣原体的感染过程无关,主要作用于衣原体的增殖过程。