高压氧治疗对急性脑梗死患者抗心磷脂抗体和血栓调节蛋白水平的影响

目的观察高压氧治疗对急性脑梗死患者的疗效及其对抗心磷脂抗体(ACA)和血栓调节蛋白(TM)水平的影响。方法选取2012年1月至2013年1月就诊的急性脑梗死的患者267例,将患者随机分为对照组(133例)和观察组(134例),对照组予以常规治疗,观察组在对照组的基础上予以高压氧治疗,观察两组治疗前后血清ACA,TM水平和美国国立卫生院神经功能缺损(NIHSS)评分的变化。结果对照组有效率78.2%(104/133),而观察组为88.8%(119/134),观察组疗效优于对照组(χ2=4.716,P<0.05)。两组治疗后,NIHSS、ACA和TM水平较治疗前明显降低,而观察组降低水平较对照组更为明显:NIHSS(12.45±7.21)分vs(10.12±6.24)分,ACA(0.65±0.09)mg/L vs(0.52±0.08)mg/L,TM(31.54±2.95)μg/L vs(24.83±2.76)μg/L(均P<0.01)。结论高压氧为主的综合治疗能明显降低机体的ACA和TM水平,提高疗效,通过调节对抗血栓形成具有一定的关系。

艾滋病抗体治疗的研究现状与展望

艾滋病的发病机制非常复杂 ,到目前为止还没有根治该病的特效药物或疫苗 ,但在实验中发现许多基因工程抗体具有阻断病毒入侵、中和病毒活性和抑制病毒复制作用 。

IgG型抗CD55×抗β-Gal基因工程双特异性抗体的构建

目的 探讨用生物学方法治疗病毒感染性疾病及肿瘤的新途径。方法 以有重要补体活化调节功能的膜补体调节蛋白CD5 5为靶点 ,以 β GaL为模拟病毒或肿瘤抗原 ,制备“IgG”型抗CD5 5×抗 β Gal基因工程双特异性抗体 ,并对该重组抗体真核表达后的结合活性进行初步的验证。结果 克隆的CD5 5抗体可变区片段为新的小鼠抗体可变区片段 ,经HEK 2 93细胞表达后的重组抗体显示了良好的CD5 5及Fc结合活性。

抗心磷脂抗体阳性反复流产患者血清对体外培养胎盘绒毛血管内细胞的激活作用

目的:探讨抗心磷脂抗体(ACA)阳性引起反复流产的机理。方法:用采集的14例ACA阳性(阳性组)和14例ACA阴性(阴性组)反复流产患者及3例健康男性(对照组)血清分别处理体外培养的胎盘绒毛微血管内皮细胞,检测培养液中凝血调节蛋白(TM)的含量。结果:ACA阳性组培养液中TM含量较阴性组和对照组明显升高,差异有显著性(P<0.05)。结论:ACA直接激活增殖的绒毛微血管内皮细胞,使TM释放,导致绒毛内血栓形成几率增加。

ANCA相关性血管炎存在血管内皮细胞血栓调节蛋白以及内皮源性一氧化氮合酶弥漫性丢失

目的探索ANCA相关性血管炎(antineutrophil cytoplasmic antibody-associated vasculitis,AAV)微小动脉和静脉的血管内皮细胞膜结合性血栓调节蛋白(thrombomodulin,TM)、内皮源性一氧化氮合酶(endothelial-nitricoxide synthase,eNOS)的表达规律。方法 12例经过临床、血清免疫学检查证实的AAV患者,2例Wegerner肉芽肿、5例显微镜下多血管炎和5例Churg-Strause综合征。Birmingham血管炎活动评分提示疾病处于活动期。均进行腓肠神经活检标本的常规组织学染色以及以抗CD68、CD3、CD20、血栓调节蛋白(thrombomodulin,TM)、eNOS以及第八因子(von Willebrand factor,vWF)抗体为第一抗体的免疫组织化学染色,以正常血管为对照。结果 12例患者的腓肠神经病理检查发现9例活动性血管炎,可见大量CD68阳性单核细胞和CD3阳性淋巴细胞浸润。和对照组相比,所有患者微小动脉和毛细血管内皮细胞eNOS和TM减低或消失,包括无炎细胞浸润血管,其中eNOS的下降程度较TM更明显。Churg-Strause综合征的血管内皮细胞eNOS和TM下降最显著。结论 AAV外周血管存在血管内皮细胞TM和eNOS弥漫性下降,两者下降程度在AAV不同亚型之间存在差异。

组胺对人结肠肥大细胞类胰蛋白酶释放的调节作用

探讨组胺对人结肠肥大细胞类胰蛋白酶释放的调节作用。经酶消化后获取人结肠组织肥大细胞 ,激发后行多种干预实验。用酶联免疫吸附试验法测定类胰蛋白酶。结果发现组胺可诱导人结肠肥大细胞释放类胰蛋白酶 ,浓度为 10 0 μg/L时组胺释放量最大 ,为基础值的 3.5倍。浓度为 10 μg/L时对人肥大细胞的刺激强度与 10mg/L的抗IgE抗体相似。组胺的作用从加样后 10s开始 ,5min后完成。百日咳毒素和抗霉素A联合 2 脱氧 D 葡萄糖可显著抑制组胺诱导人结肠肥大细胞释放类胰蛋白酶。 10 0及 10 0 0 μg/L的组胺与抗IgE抗体或离子载体钙同时加入细胞中 ,诱导类胰蛋白酶释放的能力低于组胺单独作用组。结论为组胺可激活人结肠肥大细胞 。

安子合剂对抗心磷脂抗体阳性流产小鼠母胎界面ERK1/2信号通路的影响

目的研究细胞外信号调节蛋白激酶(extracellular signal regulated kinase,ERK)1/2信号通路参与抗心磷脂抗体(anticardiolipin antibodies,ACA)阳性流产的发病过程,从细胞增殖的角度阐明安子合剂对ERK1/2信号通路的影响。方法采用免疫组化方法检测ACA阳性流产模型组、空白对照组、安子合剂低/中/高剂量组和阿司匹林组小鼠母胎界面ERK1、ERK2磷酸化水平。结果JD801形态学统计分析结果显示安子合剂低剂量组ERK1平均光密度值(0.678±0.097)接近空白对照组的平均光密度值(0.727±0.047),差异无统计学意义;模型组、安子合剂中剂量组、高剂量组、阿司匹林组ERK1平均光密度值(0.434±0.066、0.613±0.041、0.487±0.061、0.551±0.056)均较空白对照组明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。模型组、安子合剂低剂量组、中剂量组、高剂量组、阿司匹林组ERK2平均光密度值(0.430±0.058、0.621±0.041、0.562±0.047、0.449±0.062、0.515±0.045)均较空白对照组(0.708±0.038)明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论安子合剂可以通过ERK信号转导通路提高细胞增殖的活性,改善胎盘功能,改变妊娠结局。

不同剂量静注人免疫球蛋白(pH4)对川崎病合并冠状动脉损伤患儿外周血CD4^+CD25^+调节性T细胞、TGF-β、IL-10、MMP-9、AECA、ANCA表达的影响

目的探讨不同剂量静注人免疫球蛋白(pH4)对川崎病合并冠状动脉损伤患儿外周血CD4^+CD25^+调节性T细胞、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)、白介素-10(interleukin-10,IL-10)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)、抗内皮细胞抗体(anti endothelial cell antibody,AECA)、抗中性粒细胞胞质抗体(antineutrophil cytoplasmic antibody,ANCA)的影响。方法选择2014年1月至2018年1月本院收治的62例川崎病合并冠状动脉损伤的患儿为研究对象,采用随机数表法将其分为观察组(31例)和对照组(31例)。对照组患儿采用常规剂量静注人免疫球蛋白(pH4)联合阿司匹林治疗,观察组患儿采用大剂量静注人免疫球蛋白(pH4)联合阿司匹林治疗,比较两组患儿治疗前后CD4^+CD25^+调节性T细胞、TGF-β、IL-10、MMP-9、AECA、ANCA水平。结果治疗后,两组患儿CD4^+CD25^+调节性T细胞及TGF-β水平均显著高于治疗前(P均<0.05),MMP-9、AECA、ANCA、IL-10水平均显著低于治疗前(P均<0.05)。观察组患儿CD4^+CD25^+调节性T细胞及TGF-β水平均显著高于对照组(P均<0.05),MMP-9、AECA、ANCA、IL-10水平均显著低于对照组(P均<0.05)。结论 CD4^+CD25^+调节性T细胞、TGF-β、IL-10、MMP-9、AECA、ANCA参与了川崎病合并冠状动脉损伤的发生发展,监测其水平变化对预测患儿早期冠状动脉损伤具有重要意义,大剂量静注人免疫球蛋白(pH4)有利于改善患儿机体免疫功能和炎症状态。

活血通络汤对抗中性粒细胞胞浆抗体相关性血管炎患者内皮祖细胞功能及血管内皮损伤因子的影响

目的 观察活血通络汤对抗中性粒细胞胞浆抗体相关性血管炎(AAV)患者外周血内皮祖细胞(EPCs)功能及血管内皮损伤因子的影响,探讨其作用机制。方法 采用密度梯度离心法分离AAV患者外周血EPCs进行培养,将EPCs分为正常组、模型组、空白血清组(10%空白血清)和活血通络汤低(5%含药血清)、中(10%含药血清)、高(20%含药血清)剂量组,干预48 h,MTT法检测细胞增殖能力,Transwell小室检测细胞迁移能力,检测细胞黏附能力,Western blot检测EPCs血管性假性血友病因子(vWF)、可溶性血栓调节蛋白(sTM)表达。结果 与正常组比较,模型组EPCs增殖、迁移、黏附能力显著降低(P<0.01),vWF、sTM蛋白表达显著升高(P<0.01);与模型组及空白血清组比较,活血通络汤各剂量组EPCs增殖、迁移及黏附能力显著升高(P<0.05,P<0.01),vWF、sTM蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01),以活血通络汤高剂量组作用最显著(P<0.01)。结论 活血通络汤可能通过提高EPCs增殖、迁移及黏附能力,降低血管内皮损伤因子vWF、sTM蛋白表达,从而治疗AAV。

紫外线灭活的EB病毒蛋白对抗角蛋白自身抗体产生的调节作用

目的研究紫外线(UV)灭活和热处理的EB病毒刺激培养的人脐带血B细胞产生抗角蛋白自身抗体(AKautoAb)的作用。方法用淋巴细胞分离液分离人脐带血单一核细胞,L-亮氨酸甲酯去除单核细胞、NK细胞和细胞毒性T细胞,2-氨乙基硫脲溴化物处理的绵羊红细胞去除T细胞,从而获得纯化B细胞。用UV灭活和热处理EBV处理培养的B细胞。流式细胞仪检测UV灭活EBV组细胞CD5、CD3、CD4和CD8的表达。ELISA法检测培养上清液中AKautoAbIgG和IgM的产生,并与EBV转化B细胞产生的AKautoAbIgG和IgM作对比。结果细胞培养14d时,未检测到T细胞,CD5+B细胞占43%;28d时,CD5+B细胞占47%。UV灭活EBV组AKautoAbIgG18d以后各时间点有显著变化(P<0.05),AKautoAbIgM26d与其他时间点差异有显著性(P<0.05)。热处理EBV组AKautoAbIgG和IgM无明显变化(P>0.05)。EBV转化B细胞40d,AKautoAbIgG和IgM的产生与同期的UV灭活EBV组差异有显著性(P<0.05)。结论UV灭活EBV有诱导AKautoAb产生的作用,而热处理EBV不能诱导抗体的产生,提示灭活EBV诱导AKautoAb产生可能是通过EBV的蛋白成分实现的。

B6.MRL-Faslpr/J狼疮小鼠脾脏调节性T细胞与狼疮样病征的相关性研究

目的探讨狼疮小鼠脾脏调节性T细胞(Treg细胞)与狼疮样病征的相关性,为系统性红斑狼疮(SLE)的免疫疗法提供依据。方法选取22周龄雌性B6.MRL-Faslpr/J狼疮小鼠30只,留取24 h尿液及外周血后处死,取脾脏组织进行匀浆过滤,分别检测各小鼠24 h尿蛋白量、血清中抗核抗体(ANA)和抗ds-DNA抗体水平,流式细胞仪检测小鼠脾脏Treg细胞及淋巴细胞。应用Pearson对Treg细胞比例与24 h尿蛋白量、血清ANA和抗ds-DNA抗体水平进行相关分析。结果狼疮小鼠脾脏Treg细胞比例与24 h尿蛋白量及血清ds-DNA抗体水平均呈高度负相关关系(P均<0.01),与血清ANA水平呈负相关关系(P<0.05)。结论狼疮小鼠脾脏Treg细胞比例可能与狼疮样病征的活动性呈负相关关系。

调节性B细胞在天疱疮患者外周血中的水平及临床意义

目的·探讨天疱疮患者外周血调节性B细胞的水平及其在天疱疮发病中的意义。方法·选取天疱疮患者40例,正常对照组20例,抽取外周静脉血,流式细胞术检测外周血中CD19^+B细胞和刺激5h、48h后CD19^+IL-10^+B细胞水平;酶联免疫吸附法检测血清中抗dsg1和抗dsg3抗体滴度。结果·天疱疮患者外周血CD19^+B细胞比例与正常对照组差异无统计学意义(P>0.05),CD19^+B细胞在急性发作期、慢性活动期及稳定期的天疱疮患者中差异亦无统计学意义(P>0.05)。体外刺激5h后,天疱疮患者外周血CD19^+IL-10^+B细胞水平显著高于正常对照组(P=0.008),但在刺激48 h后,2组差异无统计学意义(P>0.05)。20例寻常型天疱疮患者中,急性发作期和慢性活动期患者的抗dsg3抗体滴度均显著高于稳定期患者(P<0.05);20例落叶型天疱疮患者中,急性发作期和慢性活动期患者的抗dsg1抗体滴度均显著高于稳定期患者(P<0.05)。结论·天疱疮患者血清中致病性自身抗体滴度水平与B细胞数量无关,与疾病活动期有关;天疱疮患者外周血调节性B细胞功能可能存在缺陷。

急性脑梗塞患者AECA、TM检测的临床意义

目的:通过对急性脑梗塞患者血清抗血管内皮细胞抗体(Antiendothelialcellantibodies,AECA)和血浆可溶 性血栓调节蛋白(solublethrombomdulin,sTM)的联合检测,旨在探讨急性脑梗塞临床发病与血管内皮细胞损伤的 内在关系。方法:采用间接荧光免疫法和双抗体夹心ELISA法检测66例急性脑梗塞患者(急性脑梗塞组)和35例 献血员标本(对照组)的AECA、sTM水平。结果:急性脑梗塞组的AECA阳性率显著高于对照组(P<0.01);急性 脑梗塞组治疗前sTM水平显著高于对照组(P<0.01);急性脑梗塞组治疗3～4周后sTM水平与对照组相比无显 著性差异(P>0.05)。结论:AECA、TM的检测可作为急性脑梗塞血管内皮损伤的观察指标,有助于脑血管病变的 诊断和治疗。

细胞外信号调节蛋白激酶在人胃癌细胞Fas介导的凋亡信号通路中的作用

目的 分析在胃癌细胞系SGC 790 1中,细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)在Fas介导的信号通路中的表达及其作用,探讨该信号通路与胃癌发生和发展的关系。方法 利用同位素标记法和特异性识别磷酸化ERK抗体进行Western印迹杂交,检测Fas抗体孵育不同时间点胃癌细胞ERK的活性;利用流式细胞术检测胃癌细胞在各处理因素作用下细胞凋亡情况。结果 经抗Fas抗体处理后,胃癌细胞中ERK活性升高,在30min时达高峰;在MEK1抑制剂PD980 5 9作用下,ERK活性明显下降。抑制剂预处理组sub G1 细胞占30 .5 %±2 .6 %,单纯抗Fas抗体处理组sub G1 细胞占3.1 %±0 .2 %,对照组为3.0 %±0 .1 %。结论 在胃癌细胞中,抗Fas抗体可介导ERK活性的升高,导致细胞对Fas介导的凋亡信号脱敏;MEK1抑制剂可使胃癌细胞对Fas介导的凋亡信号敏感;胃癌细胞通过Fas介导的ERK的活化,逃逸免疫监视,持续生长。

血清ACA、sTM及Copeptin水平对脑梗死患者神经功能缺损程度的评估价值

目的探讨血清抗心磷脂抗体(ACA)、可溶性血栓调节蛋白(sTM)及和肽素(Copeptin)水平对脑梗死患者神经功能缺损程度的评估价值。方法选取脑梗死患者60例(梗死组),根据神经功能缺损评分(NDS)[5]将患者分为中型(NDS评分16~30分)23例、重型(NDS评分>31分)37例。采用酶联免疫法检测血清ACA、Copeptin,采用双抗体夹心法检测血清sTM;采用Spearman相关分析法分析血清ACA、sTM及Copeptin水平与NDS评分的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析ACA、sTM及Copeptin对脑梗死患者神经功能缺损程度的评估价值。结果梗死组血清ACA、sTM及Copeptin水平高于对照组(P均<0.05),重型组血清ACA、sTM及Copeptin水平高于中型组(P均<0.05)。血清ACA、sTM、Copeptin水平与NDS评分呈正相关(r分别为0.776、0.876、0.634,P均<0.05)。中型组血清ACA、sTM、Copeptin及三者联合检测评估脑梗死患者神经功能缺损程度的曲线下面积分别为0.512、0.603、0.692、0.775,重型组分别为0.654、0.792、0.778、0.832。结论血清Copeptin、sTM、ACA水平可评估脑梗死患者神经功能缺损程度。

中西结合治免疫不孕

男子的精液进入女子体内,个别妇女体内就会产生一种抵抗精子的物质(医学上称它为抗精子抗体)。它能破坏精子活动力,使精子不能成功地与女子体内的卵子相结合,以致不孕。这就是免疫不孕症。然而体内这种抗体是怎样产生的呢?这个问题医学界至今尚未明确,但已知与人体内的免疫球蛋白(是一种抵御疾病的物质)有关。

β2-糖蛋白Ⅰ与慢性病毒性肝病的关系

β2糖蛋白Ⅰ（β2-glycoproteinⅠ,β2-GPⅠ）,初期发现时又称载脂蛋白H（APOH）。自1961年Sehuhze等首次从人血浆中发现以来,有关它的生物学特性及作用等各方面的研究得到飞速发展,但其中大部分研究着眼于β2-GPⅠ参与脂代谢调节、凝血与纤溶系统调节、与抗磷脂抗体综合征的关系、

高压氧治疗对缺血性卒中患者ACA-IgG及TM水平的影响

目的 探讨高压氧治疗对缺血性卒中患者抗心磷脂抗体（ACA-IgG）及血栓调节蛋白（TM）水平的影响及其临床作用. 方法 选择广州医学院第二附属医院神经内科自2009年9月至2010年9月收治的缺血性卒中患者100例,根据TOAST分型分为3组：动脉粥样硬化血栓型组（A组）、心源性栓塞型组（B组）及小动脉病变型组（C组）,依照缺血性卒中药物治疗指南采用单纯药物治疗或在其基础上联合高压氧治疗.在治疗前后应用斯堪的纳维亚卒中量表（SSS）进行神经功能缺损评分.另选择同期门诊体检健康自愿者50例做为健康对照组,采用ELISA法在治疗前后检测各组对象外周血ACA-IgG及TM水平. 结果 A、B、C组患者治疗前ACA-IgG结合指数及TM水平均较健康对照组明显增高,差异均有统计学意义（P＜0.05）；B组治疗前ACA-IgG结合指数及TM水平较A、C组增高,差异均有统计学意义（P＜0.05）.A、B、C组中联合高压氧治疗的患者SSS评分、ACA-IgG结合指数及TM水平均较单纯药物治疗患者明显降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）；而分别在各组患者间比较差异无统计学意义（P＞0.05）. 结论 高压氧能够通过影响与凝血功能相关的ACA-IgG结合指数及TM水平,从而改善缺血性卒中患者的临床神经功能缺损程度,利于患者的神经功能康复.但针对不同病因所致的缺血性改变其效果无明显差异.

类风湿关节炎患者自身反应性B细胞异常表达相关分子的检测和分析

目的:分析类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者自身反应性B细胞及与之功能相关的自身抗体和信号分子的表达。方法:采用流式细胞仪分析22例RA患者及10例正常对照者的外周血自身反应性B细胞比率及RA和骨关节炎(OA)患者(n=10)外周血单个核细胞(PBMC)Th2的表达。用荧光定量PCR(FQ-PCR)检测RA患者及正常对照者PBMC细胞外信号调节激酶(ERK)、黏着斑激酶(FAK)基因的相对表达量,并采用蛋白印迹法检测NF-κB信号通路的磷酸化格局;用ELISA法检测和分析RA及OA患者血清及关节滑膜液抗Ⅱ型胶原抗体水平,同时检测RA患者血清及关节滑膜液中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的表达状况。结果:相对于正常对照者,RA患者外周血中存在高表达CD19+的自身反应性B细胞;同时其PBMC中ERK基因相对表达量提高、NF-κB信号通路磷酸化活跃。相对于OA患者,RA患者关节滑膜液中抗Ⅱ型胶原抗体水平显著升高。RA患者关节滑膜液中MMP-3及TIMP-1等水平较其自身血清中升高。结论:RA患者自身反应性B细胞及相关分子的异常表达可能是介导RA发病的又一重要因素。