双膦酸盐对破骨细胞分化及抗酒石酸酸性磷酸酶的影响

背景:抗酒石酸酸性磷酸酶是破骨细胞分化及骨吸收功能的特异性标志酶,是破骨细胞分化成熟的标志。目的:观察双膦酸盐对破骨细胞分化及骨吸收功能相关因子抗酒石酸酸性磷酸酶的影响。方法:小鼠单核巨噬细胞RAW264.7诱导培养破骨细胞。实验分2组:对照组开始时加入质量浓度100μg/L核因子kB受体活化因子配体进行诱导至收获细胞,双膦酸盐组在对照组的基础上加入10-7 mol/L阿仑膦酸盐处理至收获细胞。培养第7天检测各组破骨细胞生成和骨吸收功能,免疫荧光检测两组抗酒石酸酸性磷酸酶表达的差异,Western blot检测抗酒石酸酸性磷酸酶蛋白表达情况。结果与结论:各组细胞均有抗酒石酸酸性磷酸酶阳性多核破骨细胞生成,并在牙本质磨片上形成吸收陷窝;但对照组抗酒石酸酸性磷酸酶阳性多核细胞数目、吸收陷窝数目及陷窝面积均大于双膦酸盐组(P<0.01)。免疫荧光检测显示,对照组抗酒石酸酸性磷酸酶表达均强于双膦酸盐组(P<0.01)。Western blot检测显示,双膦酸盐组抗酒石酸酸性磷酸酶蛋白的表达低于对照组(P<0.01)。说明双膦酸盐通过抑制抗酒石酸酸性磷酸酶蛋白的表达,阻碍破骨细胞分化生成及骨吸收功能。

阿仑膦酸盐对破骨细胞生成的抑制及钙离子激动剂的拮抗效应

目的:研究阿仑膦酸盐(ALN)对破骨细胞(OC)生成及骨吸收功能的影响,并探讨钙离子激动剂对ALN的拮抗效应。方法:用小鼠单核巨噬细胞RAW264.7诱导法培养OC。实验分为:A组(对照组)、B组(ALN组)、C组(ALN+Calciumlonophore组)、D组(Calcium lonophore组)。于处理第6天检测各组OC生成和骨吸收功能,以及NFATc1、c-Fos基因表达情况。结果:各组细胞均有TRAP阳性多核OC生成,并在牙本质磨片上形成吸收陷窝;但D组TRAP阳性多核细胞数目、吸收陷窝数目及陷窝面积最高,C组、A组次之,B组最差。Real-time PCR和Western blot检测表明,NFATc1、c-Fos表达D组最高,C组次之,B组最差;与A组比较差异均有显著性(P<0.01)。结论:ALN能抑制OC生成和骨吸收,下调相关基因NFATc1、c-Fos的表达;Ca2+激动剂Calcium lonophore对ALN引起的OC抑制具有拮抗效应,其机制与细胞内Ca2+浓度调节有关。

镓盐对大鼠维甲酸致骨质疏松血清ALP和TRAP的影响

为观察镓盐对维甲酸致大鼠骨质疏松动物模型血中碱性磷酸酶 (AL P)和抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRAP)水平及其变化趋势 ,选用 3月龄 SD雌性大鼠 45只 ,随机分为两组 :正常组 (13只 )和骨质疏松组 (32只 ) ,骨质疏松组按 85 mg/ kg· d维甲酸灌胃 15天 ,然后进入治疗阶段。实验分为四组 :正常组 (6只 ) ,骨质疏松组 (6只 ) ,正常喂养 ;氯化镓治疗组 (9只 ) ,2 5 mg/ kg·d氯化镓灌胃 ;雌激素治疗组 (6只 ) ,雌激素 0 .2 μg/ kg,3次 /周 ,腹腔注射 ,治疗两个月。结果显示模型期骨质疏松组 AL P和 TRAP显著升高 ,镓盐治疗后 AL P和 TRAP降低 ,与正常组接近 ,提示镓盐能抑制破骨细胞活性 ,降低骨转化率。

阿伦膦酸盐在不同分化阶段对破骨细胞生成及骨吸收功能的影响

目的:研究阿伦膦酸盐作用在不同分化阶段对破骨细胞生成及骨吸收功能的影响。方法:体外分离骨髓单核细胞,用30μg/L M-CSF对其预诱导3d,然后将细胞分为A、B、C、D四组。A组(对照组),用50μg/L M-CSF+100μg/L RANKL进行破骨细胞诱导;B、C、D组除加入上述诱导因子外,在不同时间点加入0.1μmol/L阿伦膦酸盐(ALN),加入时间分别为:B组第0～2天加入,C组第3～4天加入,D组第5～6天加入。检测每组细胞正式诱导第6天TRAP染色情况及牙本质磨片吸收陷窝情况。结果:各组细胞均有TRAP阳性多核破骨细胞生成,并在牙本质磨片上形成吸收陷窝;但A组TRAP阳性多核细胞数目、吸收陷窝数目及陷窝面积最高,D组次之,B组最差。结论:阿伦膦酸盐在破骨细胞分化阶段作用越早,对破骨细胞生成的抑制效应越大,所形成破骨细胞骨吸收能力越差。

双膦酸盐对破骨细胞分化中组织蛋白酶K及骨吸收功能的影响

背景:有研究表明双膦酸盐可抑制破骨细胞的骨吸收功能,但对其骨吸收功能关键细胞因子组织蛋白酶K是否产生作用,至今少有报道。目的:观察双膦酸盐对破骨细胞分化中组织蛋白酶K及骨吸收功能影响。方法:用小鼠单核巨噬细胞RAW264.7诱导培养破骨细胞。实验分2组:对照组加入质量浓度100μg/L核因子κB受体活化因子配体进行诱导至收获细胞,双膦酸盐组在对照组的基础上加入10-7 mol/L阿仑膦酸盐处理至收获细胞。培养第7天检测各组破骨细胞生成和骨吸收功能,培养72 h免疫荧光检测两组组织蛋白酶K表达差异,Western blot检测组织蛋白酶K蛋白表达情况。结果与结论:两组均有抗酒石酸酸性磷酸酶阳性多核破骨细胞生成,并在牙本质磨片上形成吸收陷窝;但对照组抗酒石酸酸性磷酸酶阳性多核细胞数目、吸收陷窝数目及陷窝面积均大于双膦酸盐组(P<0.01)。免疫荧光检测组织蛋白酶K表达对照组强于双膦酸盐组(P<0.01);Western blot检测组织蛋白酶K表达双膦酸盐组低于对照组(P<0.01)。结果证实,双膦酸盐通过抑制组织蛋白酶K因子的表达,阻碍破骨细胞的骨吸收功能。

激光照射对兔正畸牙齿牙周组织中TRAP表达的影响

目的 :观察氦氖激光照射对兔正畸牙齿移动牙周组织中抗酒石酸酸性磷酸酶表达的影响 ,探讨氦氖激光照射对正畸骨改建的作用。方法 :选择体质量 (1.5± 0 .2 )kg的大耳白兔 ,随机分为未加力组及加力 1、3、5、7、14、2 1d组 ,每组 5只 ,共 3 5只。 0 .0 5mol/L戊巴比妥钠经耳缘静脉麻醉 (2ml/kg) ,分别在兔左右上颌切牙和第一磨牙间放置不锈钢螺簧 ,力值为 7.84N。右侧作为实验侧 (氦氖激光照射侧 ) ,左侧作为对照侧。对实验组动物右上颌第一磨牙相应的颊部进行氦氖激光照射。标本处理后进行抗酒石酸酸性磷酸酶的染色 ,光镜下观察破骨细胞的变化。对破骨细胞中TRAP染色阳性颗粒计数并进行统计学分析。结果 :氦氖激光照射侧和对照侧相比 ,各组抗酒石酸酸性磷酸酶的表达均增高 ,3、7d组抗酒石酸酸性磷酸酶的表达有显著差异 (P <0 .0 5)。结论 :氦氖激光照射可以增强正畸牙移动过程中牙周组织内抗酒石酸酸性磷酸酶的表达 。

抗RANKL多克隆抗体抑制T细胞介导的破骨细胞形成的体外研究

目的:探讨抗核因子-КB受体活化因子配体(RANKL)多克隆抗体对T细胞介导的破骨细胞形成的影响。方法:制备兔抗鼠RANKL多克隆抗体,使用不同浓度的抗体(1、5及10μg/mL),观察小鼠重组RANKL诱导的破骨细胞形成,显微镜下计数抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)阳性多核细胞数/孔;体外分离、纯化、扩增大鼠的颈T淋巴细胞,给予不同浓度的兔抗鼠RANKL特异性抗体进行干预,取其上清和T细胞,分别与RAW264.7细胞共同培养,TRAP法测定T细胞介导的破骨细胞形成,显微镜下计数TRAP(+)多核细胞数/孔;ELISA测定细胞上清中的可溶性RANKL浓度(sRANKL,pg/mL)。实验结果采用SPSS11.5软件包进行统计学分析。结果:兔抗鼠RANKL抗体既可减少RANKL诱导的TRAP(+)多核细胞数,也可减少T细胞介导的TRAP(+)多核细胞数,5μg/mL及10μg/mL抗体组差异显著(P<0.05),且呈浓度依赖性;上清中检出sRANKL的浓度与不加抗体对照组相比明显降低,具有统计学意义(P<0.05)。结论:抗RANKL特异性抗体可通过减少sRANKL的表达水平,直接阻断RANKL与核因子-КB受体活化因子(RANK)的结合,降低T细胞介导的破骨样细胞吸收。

PERK-eIF2α-ATF4信号通路参与调控磷酸三钙磨损颗粒诱导的假体周围骨溶解

目的探讨蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)-真核细胞起始因子2α(e IF2α)-活化转录因子4(ATF4)介导的内质网应激通路在磷酸三钙(TCP)磨损颗粒诱导假体周围骨溶解中的作用。方法取雄性ICR小鼠30只,随机分为3组:假手术组(sham,n=10)、TCP磨损颗粒组(模型组,n=10)和salubrinal干预组(SAL,n=10)。采用TCP磨损颗粒诱导小鼠颅骨溶解模型,于术后第2天颅顶局部注射SAL(1 mg/kg),每隔2 d 1次,持续干预2周。实验结束后处死动物取颅骨和外周血。Western blotting法检测TCP磨损颗粒植入部位周围骨组织中内质网应激分子伴侣葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)表达水平及PERK-e IF2α-ATF4信号通路的活化情况;HE染色和抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察SAL对假体周围骨溶解和破骨细胞形成的影响;Real-time PCR检测SAL对破骨细胞活化相关基因抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和c-fos的mRNA水平;ELISA法检测SAL对血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和前列腺素E2(PGE2)水平的影响。结果 TCP磨损颗粒可诱导假体周围骨组织发生内质网应激反应,同时激活PERK-e IF2α-ATF4信号通路,表现为TCP磨损颗粒组小鼠颅骨组织中内质网应激通路蛋白GRP78、CHOP和磷酸化PERK(pPERK)、磷酸化e IF2α(p-e IF2α)和ATF4蛋白表达均显著上调,而PERK和e IF2α蛋白明显下调(P<0.05);而颅顶局部注射e IF2α特异性抑制剂SAL可明显阻止TCP磨损颗粒诱导假体周围破骨细胞形成和骨溶解,减少TRAP、MMP-9和cathepsin K的mRNA水平(P<0.05);同时抑制TNF-α、PGE2和IL-1β等炎症因子的产生(P<0.05)。结论 PERK-e IF2α-ATF4介导的内质网应激通路参与调控TCP磨损颗粒诱导的小鼠颅骨溶解;抑制该信号通路可减轻TCP磨损颗粒诱导的假体周围骨溶解和关节松动。

Toll样受体4信号通路过度激活在大鼠激素性股骨头坏死中的作用

目的建立大鼠激素性股骨头坏死模型并研究Toll样受体4(TLR4)信号通路在激素性股骨头坏死中的作用机制。方法成年雄性SD大鼠随机分为模型组、干预组,每组各24只,按照甲强龙20mg/kg的剂量给予双侧臀大肌交替肌注造模,1周1次,共8周。其中干预组在每次激素注射后,同时给予10mg/kg TAK242药物静脉注射;另12只大鼠设为对照组,仅在同等条件下给予生理盐水肌注。在激素注射后的8、10、12周时分别以过量麻醉法处死各组动物,采用ELISA测定血清中抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)的含量,并对股骨头进行组织病理学观察和TRAP特异性染色观察。分别提取各组大鼠股骨头总mRNA和总蛋白,采用RT-PCR和Western blot技术检测TLR4、髓样细胞分化因子88(MyD88)、NF-κB p65和单核细胞趋化蛋白(MCP-1)的mRNA及蛋白的表达。结果模型组股骨头坏死的组织病理学表现明显,其中血清TRAP含量、TRAP特异性染色面积、各因子的mRNA和蛋白含量表达均较其他两组有统计学差异(P<0.05)。干预组与空白对照组的各指标检测结果差异均无统计学意义(P>0.05)。结论大剂量激素的使用可以引起TLR4信号通路过度激活从而介导激素性股骨头坏死的发生。

RANKL诱导小鼠单核细胞RAW264．7分化成成熟破骨细胞

目的观察小鼠的单核／巨噬细胞RAW264．7的一般生物学特征及在RANKL诱导下形成成熟破骨细胞的特征。方法 RANKL诱导RAW264．7细胞6d后,用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP) 染色法观察TRAP阳性多核细胞,吖啶橙染色激光共聚焦显微镜(LCSM)观察多核细胞形态;诱导RAW264．7细胞9d后,RT-PCR检测RAW264．7细胞的破骨细胞表型和功能基因表达及其 RANKL诱导后变化;诱导RAW264．7细胞12d后,钙磷覆盖的破骨细胞活性分析板观察破骨细胞的骨吸收功能。结果 RAW264．7细胞TRAP染色阴性,单核或2个核,能表达破骨细胞表型和功能基因,无骨吸收功能。RANKL可诱导RAW264．7细胞形成TRAP阳性成熟的多核破骨细胞, 上调CathepsinK、CAⅡ、integrinβ3等基因。mRNA的表达。结论 RAW264．7具有破骨细胞特征性基因表达谱,是一种较好的破骨前体细胞模型。RANKL可诱导RAW264．7细胞形成成熟破骨细胞。

精骨补肾颗粒对地塞米松诱导骨质疏松症大鼠的保护作用

目的观察精骨补肾颗粒(黄精、骨碎补、桑葚等)对糖皮质激素性骨质疏松症(glucocorticoid induced osteoporosis,GIOP)大鼠的骨密度(BMD)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、碱性磷酸酶(ALP)、肌钙蛋白(Tn)、血清降钙素(CT)、雌二醇(E2)的影响及可能的作用机制。方法将72只雌性大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,阳性对照组(仙灵骨葆胶囊),精骨补肾颗粒低、中、高剂量组。除正常对照组外,其余各组大鼠每周2次肌肉注射地塞米松2.5 mg/kg,同时每日灌胃给药连续9周。实验结束后眼球取血,用酶联免疫法测定大鼠Tn、TRAP、ALP、CT、E2指标,用双能X线骨密度仪对大鼠离体股骨上1/3 BMD进行检测。结果 GIOP大鼠对照组的TRAP、ALP明显升高,BMD、Tn、CT、E2明显降低,与正常对照组比较,有显著性差异(P<0.01);精骨补肾颗粒低、中、高剂量组可显著降低GIOP大鼠TRAP、ALP含有量,显著升高BMD、Tn、CT、E2值,且存在一定的剂量依赖关系,与模型对照组比较有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。结论精骨补肾颗粒对骨质疏松症大鼠具有一定的治疗作用。

纳米羟基磷灰石对破骨细胞功能代谢影响的研究

目的比较纳米羟基磷灰石(nHA)和常规羟基磷灰石(cHA)对破骨细胞功能代谢影响方面的差异。方法将Wistar乳鼠体外分离培养的破骨细胞接种于所制备的nHA和cHA的表面,分别在3、5、7d时检测细胞在材料表面的吸收陷窝量和TRAP活性。结果第3、5和7dnHA表面吸收陷窝数量分别多于同时期相应的cHA。第5d和7d,nHA表面附着的成骨细胞TRAP活性高于相应的cHA。结论与相应的cHA比较,nHA更能增强破骨细胞的功能及代谢活动。

骨水泥颗粒促进肿瘤坏死因子α诱导的破骨细胞形成及其骨吸收作用

目的:验证骨水泥颗粒对肿瘤坏死因子α(TNFα)诱导的破骨细胞形成及其生物学活性的影响。方法:体外培养外周血单核细胞,对照组加入TNFα和白细胞介素-1α(IL-1α)及巨噬细胞克隆集落刺激因子(M-CSF),实验组并分别加入含有或不含有硫酸钙的骨水泥(PMMA±BaSO4)颗粒。对培养终末细胞作组织化学染色检测破骨细胞标志物抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)的表达,并以象牙磨片上虫蚀样骨吸收陷窝的形成为指标检测破骨细胞的生物学活性;并比较各实验组中TRAP阳性多核细胞(multinucleatedcells,MNCs)及虫蚀样骨吸收陷窝形成时间的早晚。结果:各组TRAP阳性MNCs的数量无明显差异;PMMA±BaSO4组象牙磨片上骨吸收陷窝的面积均较对照组大,差异具有显著性(P<0.01);并且PMMA±BaSO4组TRAP阳性的MNCs及虫蚀样骨吸收陷窝的形成均较对照组早。结论:PMMA±BaSO4颗粒能够促进TNFα诱导的破骨细胞分化提早发生并促进其骨吸收活性。

血清Tracp5b在乳腺癌骨转移诊断和治疗效果监测方面的临床价值

目的:探讨血清抗酒石酸酸性磷酸酶5b(tartrate-resistant acid phosphatase 5b,Tracp5b)在诊断乳腺癌骨转移以及评价乳腺癌骨转移治疗效果方面的价值。方法:采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immumosorbent assay,ELISA)检测30例无骨转移乳腺癌患者及22例乳腺癌骨转移患者的血清Tracp5b水平,并检测骨转移患者应用化疗或内分泌治疗同时加用双膦酸盐治疗4个月后血清Tracp5b水平,对检测结果的差异性进行比较。结果:相对于乳腺癌无骨转移组,骨转移组血清Tracp5b的水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);在化疗或内分泌治疗同时加用双膦酸盐治疗4个月后,骨转移组患者的血清Tracp5b水平明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:血清Tracp5b在发生乳腺癌骨转移时明显升高,在治疗显效后显著下降,Tracp5b可作为诊断乳腺癌骨转移和评价乳腺癌骨转移治疗效果的血清学指标。

失神经支配对牙周组织中P物质及破骨细胞的影响

目的探讨切断大鼠下牙槽神经后,牙周组织中P物质的表达变化及其对破骨细胞的影响。方法将30只雄性Wistar大鼠随机分为6组,每组5只,分为正常组(0 d)和术后第3、7、14、21、28天组。在下颌孔处切断大鼠左侧下牙槽神经,分别在相应的观测时点取材,常规制备大鼠牙周组织石蜡切片,行免疫组织化学染色观察P物质的表达情况,同时行抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察破骨细胞的分布,并对免疫组织化学染色的平均光密度值和破骨细胞计数进行统计分析。结果切断大鼠下牙槽神经后牙周组织中的P物质在第3天表现出明显的下降趋势,第7天达到最低值,第21天恢复到正常水平;破骨细胞的变化趋势与P物质的变化具有一致性。结论切断大鼠下牙槽神经后,牙周组织中P物质与破骨细胞的变化呈正相关。P物质可能具有刺激并调节破骨细胞分化的作用,参与牙槽骨的代谢。

氨基多糖对RANKL诱导的RAW264.7向破骨细胞样细胞分化的抑制作用观察

目的探讨氨基多糖(GAGs)对核因子κB受体活化因子配体(RANKL)诱导的RAW264.7向破骨细胞分化的影响。方法采用RANKL单独诱导RAW264.7细胞(对照组),分别采用不同浓度肝素、高分子量透明质酸(HA)、硫酸软骨素(CS)C联合RANKL诱导RAW264.7分化(分别为肝素组、HA组、CSC组)。细胞培养第3、5、7、8天采用抗酒石酸酸性磷酸酶染色法(TRAP)检测破骨细胞样细胞并计数;ELISA法检测第8天各组培养液上清中抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRAP5b)含量。结果与对照组比较,诱导第3、5、7、8天,破骨样细胞数均明显减少(P<0.05);其中肝素组随浓度的增大而减少(P<0.05)。第8天培养液中TRAP5b含量与细胞计数结果相符。结论氨基多糖对RANKL诱导下RAW264.7向破骨细胞样细胞的分化具有抑制作用;肝素的作用具有剂量依赖性。

阿仑膦酸钠对绝经后骨质疏松症患者骨代谢指标的影响

目的观察抗骨吸收药物双膦酸盐对绝经后骨质疏松症患者骨代谢状态的影响。方法本研究为回顾性研究,共收集在我院骨质疏松门诊数据库中临床资料完整的女性绝经后骨质疏松症患者152例,其中阿仑膦酸钠治疗组93例(A组),每周给予阿仑膦酸钠70 mg,一次口服;未服用阿仑膦酸钠对照组59例(B组)。分别观察治疗前和治疗后3、6、12个月骨转换生化指标:骨特异性碱性磷酸酶(BAP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP-5b)及25羟维生素D(25(OH)VD)的变化。结果 A组患者经阿仑膦酸钠治疗3个月后BAP和TRAP-5b水平分别较治疗前下降30.60%和32.95%(P<0.001)治疗6个月时完全降至女性绝经前水平,并一直维持在此水平至治疗后12个月。B组患者治疗前后BAP和TRAP-5b水平差异无统计学意义。结论绝经后骨质疏松症患者骨代谢处于高转换状态,其BAP及TRAP-5b水平较绝经前明显升高;经阿仑膦酸钠治疗3个月后高转换状态可以明显改善,骨转换指标BAP和TRAP-5b水平回落到绝经前水平。

大鼠双侧卵巢切除术后不同时期血清骨生化标志物与骨小梁三维结构变化之间的研究

目的观察双侧卵巢切除(OVX)SD大鼠不同时期血清骨生化标志物与骨小梁三维结构变化之间的关系。方法分别于6月龄雌性SD大鼠假手术(Sham)组和双侧卵巢切除术(OVX)组术后2、4、8、12周随机取样,每组每个时间点处死4只,取血清测量雌二醇(E_2)、骨碱性磷酸酶(BALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)水平,取胫骨用显微CT(Micro-CT)和组织学HE染色观察胫骨骨小梁微结构变化。结果术后2周,OVX组E_2较Sham组开始下降,4周时差异有统计学意义(P<0.05),一直持续到12周,Sham组E_2水平随时间变化不大;OVX组血清BALP在术后2周达峰值,然后迅速下降,12周时降至术前水平;OVX组血清TRAP活性在术后迅速升高,术后4周达峰值,然后下降,术后12周时仍高于Sham组及术前水平;Micro-CT分析胫骨干骺端相对骨体积(BV/TV)、骨小梁数目(Tb.N)、骨小梁分离度(Tb.Sp)、Conn.Dn、骨密度(BMD)在2周时与Sham组比较差异无统计学意义,第4周开始出现明显差异,12周差异更加明显,骨小梁厚度(Tb.Th)始终无明显差异;Micro-CT重建显示术后12周OVX组骨小梁较Sham组稀疏,缺失严重;HE染色显示术后12周OVX组大鼠胫骨干骺端骨骺板下骨小梁变细且排列稀疏,骨小梁结构不成熟,骨小梁间连接差,部分断裂,出现大量骨小梁盲端,小梁壁厚度不一致。结论 OVX术骨质疏松模型建立过程中大鼠成骨及破骨细胞活跃度先增高后降低,破骨细胞相对而言上升周期更长且下降后能维持在更高水平,比成骨细胞更活跃,骨吸收大于骨生成导致骨质疏松,主要体现为骨小梁BV/TV、Tb.N、Conn.Dn、BMD下降,Tb.Sp升高,组织学表现为骨小梁结构不成熟,骨小梁间连接差,部分断裂,出现大量骨小梁盲端。

骨松汤对去卵巢小鼠骨质疏松影响的实验研究

目的:建立去卵巢小鼠骨质疏松模型,观察骨松汤对去卵巢小鼠骨质疏松骨代谢指标及骨密度的影响,并探讨骨松汤对去卵巢骨质疏松影响的机制。方法:将40只雌性小鼠随机分为空白组、模型组、骨松汤组、钙尔奇组,每组各10只。除空白组外,其余各组经双侧卵巢切除术建立骨质疏松小鼠模型。骨松汤组在造模后灌胃骨松汤水煎剂每天早晚各3 m L(1.72 g/10 g),钙尔奇组给予钙尔奇灌胃每天早晚各3 m L(0.42 g/10 g)、空白组和模型组灌胃等量生理盐水,共12 w。12 w后测各组定小鼠血清碱性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、骨钙素(BGP)和雌二醇(E2)及骨密度。结果:1.血清碱性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、骨钙素(BGP)和血清雌二醇(E2):骨松汤组治疗前后比较血清碱性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、骨钙素(BGP)明显降低,雌二醇(E2)明显升高,P<0.05,差异显著,有统计学意义。钙尔奇组治疗前后比较的血清碱性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、骨钙素(BGP)明显降低,雌二醇(E2)明显升高,P<0.05,差异显著,有统计学意义。治疗后骨松汤组和钙尔奇组2组比较,血清碱性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、骨钙素(BGP)明显降低,雌二醇(E2)明显升高,P<0.05,差异显著,有统计学意义。骨松汤可以升高去卵巢小鼠骨质疏松的血清雌二醇(E2),降低血清碱性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、骨钙素(BGP),改善去卵巢骨质疏松小鼠骨密度。2.骨密度:治疗后骨松汤组和钙尔奇组的骨密度与空白组接近,与模型组相比差异显著,有统计学意义。2组组间比较差异显著,P<0.05。结论:骨松汤可以改善去卵巢小鼠骨密度,其机制与其减缓雌激素水平有关。

糖尿病模型小鼠拔牙后对颌牙[牙合]向伸长过程中根周骨密度及相关因子的变化

背景:牙列缺失是常见的口腔疾病,若得不到及时有效的治疗,就会出现邻牙倾斜、对颌牙伸长等不良影响,造成牙合紊乱以及牙合干扰,严重影响后期修复。尤其是糖尿病患者牙列缺失后,对颌牙在牙合向伸长过程中,糖尿病对其有何影响?骨连接蛋白在此过程如何变化?目前尚不清楚。目的:通过建立糖尿病小鼠对颌牙牙合向伸长运动实验模型,研究糖尿病对小鼠牙齿牙合向伸长运动过程的影响。方法:向C57 BL/6J小鼠(购买于山西医科大学动物实验中心)腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病模型,以腹腔注射柠檬酸钠缓冲液的小鼠为对照。取建模成功的糖尿病小鼠与对照组小鼠各30只,拔除右上颌3颗磨牙建立对颌牙牙合向伸长运动实验模型,术后0,3,6,9,12 d,取右侧下颌骨,利用Micro CT测量骨密度,抗酒石酸酸性磷酸酶染色计数破骨细胞数量,RT-qPCR检测骨连接蛋白基因的表达。实验方案经山西医科大学伦理委员会批准。结果与结论:①随着时间的延长,两组右侧下颌骨的骨密度逐渐增加,糖尿病组术后3,6,9,12 d的骨密度低于对照组(P<0.05);②随着时间的延长,两组右侧下颌骨的破骨细胞数量逐渐增多,糖尿病组术后3,6,9,12 d的破骨细胞数量少于对照组(P<0.05);③随着时间的延长,两组右侧下颌骨的骨连接蛋白基因表达量逐渐升高,糖尿病组术后0,3,6,9,12 d的骨连接蛋白基因表达量高于对照组(P<0.05);④结果表明,糖尿病可降低牙齿牙合向伸长运动过程中的骨改建能力并提高骨连接蛋白基因表达。