鸟氨酸脱羧酶抗酶2在结直肠癌中的表达及临床意义

目的:研究鸟氨酸脱羧酶抗酶2(ornithine decarboxylase antizyme 2,OAZ2)在结直肠癌组织中的表达及其临床意义。方法:收集80例结直肠癌组织及其配对癌旁组织,采用实时定量逆转录酶聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测组织中OAZ2 mRNA表达,分析OAZ2 mRNA表达与结直肠癌临床病理特征的关系。结果:结直肠癌组织中OAZ2 mRNA表达水平低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。中、低分化结直肠癌组织中OAZ2 mRNA表达低于高分化结直肠癌,有淋巴结转移结直肠癌组织中OAZ2 mRNA表达低于无淋巴结转移结直肠癌组织,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:OAZ2 mRNA在结直肠癌组织中低表达,与肿瘤分化程度及淋巴结转移相关。

siRNA靶向抗酶抑制剂下调前列腺癌细胞PC3中鸟氨酸脱羧酶表达

目的探讨抗酶抑制剂(AZIN)对前列腺癌细胞PC3鸟氨酸脱羧酶(ODC)表达水平及增殖的影响。方法将siRNA-AZIN转染前列腺癌PC3细胞,分别用RT-PCR及Western blot检测抗酶(AZ)、AZIN及ODC在mRNA和蛋白水平的表达,MTT检测细胞增殖。结果 siRNA-AZIN转染前列腺癌PC3细胞后,AZIN RNA表达水平降低(P<0.01);PC3细胞AZIN蛋白表达水平降低(P<0.05),且使ODC的表达水平降低(P<0.05);PC3细胞增殖能力明显减弱(P<0.05)。结论 siRNA-AZIN可下调前列腺癌细胞PC3中ODC的表达。

抗酶解淀粉的研究进展及其在食品工业中的应用

抗酶解淀粉是一种新型的碳水化合物。笔者对抗酶解淀粉的分类、形成及其在食品工业上的应用进行了综述。

HeLa细胞内DNA的抗酶(DNase I)组分和AFM直接观察

从ＨｅＬａ细胞提取的ＤＮＡ经ＤＮａｓｅⅠ酶解后，发现有两种抗酶组分（Ｂ和Ｃ）。凝胶电泳结果显示组分Ｂ的分子大小要超过２００００ｂｐ，而组分Ｃ的分子大小相当于４０～５０ｂｐ。这两种组分在原子力显微镜下的形态都明显不同于标准的双链ＤＮＡ，其中组分Ｂ与以前观察到的λ－ＤＮＡ变异结构较为相似，组分Ｃ则未见报道，根据其分子的表观宽度和高度推测可能为四链结构。此外，荧光实验还表明这两种组分可与ＥＢ相互作用。

抗酶抑制因子结构、功能与代谢的研究进展

抗酶抑制因子是一种热不稳定蛋白,与鸟氨酸脱羧酶同源,但不具有鸟氨酸脱羧酶活性,经泛素依赖途径被降解。抗酶抑制因子与抗酶高度亲和,抑制抗酶功能,恢复鸟氨酸脱羧酶活性。研究发现,抗酶抑制因子还能够调节多胺转运,抑制细胞周期蛋白D1的降解,以及加速中心粒复制,从而促进细胞增殖及肿瘤发生。

机械力化学效应对马铃薯淀粉消化性能和抗酶解性能的影响

采用In－Vitro消化模型和美国谷物化学协会(AACC)的76－13标准方法，研究被机械球磨微细化的马铃薯淀粉的消化性能和抗酶解性能，探讨机械力化学效应对马铃薯淀粉酶反应活性的影响。结果表明，微细化使得马铃薯淀粉颗粒的消化速度大大加快，抗酶解淀粉含量降低。机械力化学效应可提高淀粉颗粒对酶的敏感性，增加反应活性。

机械活化玉米淀粉及其酯化淀粉的消化性能和抗酶解性能

采用In-Vitro消化模型模拟人体消化环境,对机械活化淀粉及其醋酸酯淀粉的消化速度进行了研究;并用美国谷物化学协会(AACC)的76-13标准方法,测定机械活化淀粉及其醋酸酯淀粉的抗酶解淀粉含量。结果表明,机械活化使玉米淀粉颗粒的消化速度大大加快,抗酶解淀粉的含量降低,且活化时间越长,消化速度越快,抗酶解淀粉的含量越低。醋酸酯化加快了活化淀粉颗粒的消化速度,随取代度的提高消化速度下降,但醋酸酯化降低其糊的消化速度。醋酸酯淀粉中的抗酶解淀粉含量低于活化淀粉,取代度越高含量越低。

羧甲基化对淀粉消化性能和抗酶解性能的影响

淀粉经羧甲基化变性，不仅能改变理化性质，而且会影响其消化性能和抗酶解性能．研究结果表明，羧甲基基团的引入可以加快淀粉颗粒的总碳水化合物平均消化速度，但却大大降低淀粉糊的这一速度．羧甲基淀粉中的抗酶解淀粉含量低于原淀粉，取代度越高含量越低．

抗酶1基因转染对HeLa细胞增殖及细胞周期的抑制作用

研究抗酶(antizyme)1对人宫颈癌HeLa细胞增殖与细胞周期的影响,并分析抗酶1对细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达影响.采用定点突变技术,将抗酶1的frameshift位点缺失,随后将突变基因重组至真核表达载体pEGFP-N1中,鉴定后转染HeLa细胞.通过MTT法检测细胞增殖变化,流式细胞术分析抗酶1对细胞周期的影响.RT-PCR和Western印迹检测抗酶1转染对细胞周期蛋白D1基因表达的影响.酶切结果显示,抗酶1突变基因成功克隆至pEGFP-N1中.成功转染HeLa细胞后,检测结果显示,抗酶1能够减慢HeLa细胞增殖速度,并使细胞停滞于G0/G1期,细胞周期蛋白D1基因的表达同时受到抑制.实验说明,抗酶1基因能够抑制HeLa细胞增殖,通过降低细胞周期蛋白D1的表达阻滞细胞周期.

抗酶解淀粉的研究进展及其在食品工业中的应用

抗酶解淀粉是食品工业中新发现的一种特殊的碳水化合物。本文对抗酶解淀粉的分类、形成及其在食品工业上的应用进行了综述。

酶法处理和超声波作用对抗酶解淀粉形成的影响

本文以木薯淀粉为原料,研究了α-淀粉酶、普鲁兰酶和超声波作用对抗酶解淀粉形成的影响。结果表明,酶作用对抗酶解淀粉形成的最佳条件为:淀粉浓度为5%,耐热α-淀粉酶量为10mL(酶活力为3U/mL),普鲁兰酶量为30mL(酶活力为22.5NPUN/mL),冷却升温次数为2次。得到的产品中抗酶解淀粉含量可达到14.52%。超声波频率为25kHz,作用时间为120s时,产品中抗酶解淀粉含量最高,为19.19%。

鸟氨酸脱羧酶抗酶1基因的结构和功能

鸟氨酸脱羧酶抗酶1(OAZ1)基因可通过特殊的+1移码机制翻译全长的功能蛋白。研究发现,OAZ1能与鸟氨酸脱羧酶(ODC)结合并降解ODC,负调控细胞内多胺的水平;OAZ1还能降解Cyclin D1、Cyclin E1和Smad1周期蛋白,阻滞细胞周期;此外,近年来研究表明,OAZ1还具有抗肿瘤效应和调控动物繁殖的功能。抗酶抑制因子能竞争性结合ODC-OAZ1复合体中的OAZ1,从而阻止ODC降解;天门冬酰胺也能通过抑制OAZ1的翻译来调节ODC的活性。本文就OAZ1基因结构和功能的研究现状作一综述。

鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制因子-1高表达抑制黑素瘤细胞在小鼠体内的生长

鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制因子-1(ornithine decarboxylase antienzyme inhibitor-1,OAZI-1)是细胞内调节多胺代谢的重要蛋白质因子。已有研究发现,OAZI-1高表达的黑素瘤细胞在体外能更有效地被抗原提呈细胞识别和吞噬,提示OAZI-1在肿瘤免疫治疗中具有潜在的应用价值。为进一步分析OAZI-1高表达对黑素瘤细胞在小鼠体内生长的影响,高表达OAZI-1的黑素瘤细胞(B16/OAZI-1)被接种到实验小鼠体内,结果发现,接种瘤出现先成瘤随后逐渐消退的现象,至第24 d时,接种瘤的平均体积为36±25 mm3~,而对照细胞接种瘤的平均体积为326±309 mm^3。为探索上述现象的机制,随后分析了B16/OAZI-1在小鼠体内诱导的抗肿瘤免疫效应,结果发现:1)B16/OAZI-1接种显著增加了小鼠脾脏细胞对B16-F1瘤细胞的杀伤活性;2)源于B16-F1的细胞抗原能更有效地促进B16/OAZI-1接种小鼠脾脏细胞的增殖;3)B16/OAZI-1接种小鼠的脾脏细胞具有更强的分泌IFN-γ的能力;4)当在预接种B16/OAZI-1 30 d后的小鼠体内再次接种B16-F1活细胞时,新接种瘤细胞的生长受到显著抑制,小鼠的存活率增加。上述研究结果提示,高表达OAZI-1的黑素瘤细胞在实验动物体内的生长受到显著抑制,其机制可能与OAZI-1能促进肿瘤抗原提呈和诱导抗肿瘤免疫效应相关。

改性皮胶原的抗酶能力探索

在天然皮胶原中的间质被除去的过程中,其结构也受到较大的破坏,导致Ts降低,抗酶能力下降。采用甲醛、戊二醛、氨基硅、烷基磺酰氯及亚硝酸钠5种材料对天然皮胶原进行改性处理,对这些改性后的皮胶原进行外观、收缩温度、物理强度及抗酶水解测试。结果表明用3%甲醛、1%戊二醛及40%烷基磺酰氯改性后胶原有较好抗酶能力;用烷基磺酰氯改性后的胶原还有柔软及易回湿的特点。

微波处理法玉米淀粉抗酶性的研究

抗酶性淀粉是一类重要的淀粉衍生物,本文利用微波加热的方法,讨论了加热功率、加热/冷却的次数、时间以及玉米淀粉的含水量对淀粉抗酶性的影响,经DSC和X- 衍射等测定表明,经微波处理过的样品晶体发生了变化, 产生了较强的抗酶性。

猪抗酶基因1(AZ1)5’调控区单核甘酸多态性与屠宰性状的相关性分析

通过PCR-RFLP方法检测了长白与蓝塘猪F2代群体抗酶基因1(AZ1)5’调控区-792^-433单核苷酸多态性,共获得3个SNP:-731C>T,-584A>C和-476G>A。-713位点处T为优势等位基因,频率为0.777,优势基因型TT频率为0.598;-584位点处A为优势等位基因,频率为0.769,优势基因型AA频率为0.599;-476位点处G为优势等位基因,频率为0.872,优势等位基因型GG频率为0.776。单倍型分析结果表明TAG(-713、-584和-476)的频率较高,为74.2%,表明这3处突变T、A和G碱基的连锁程度很高。3个SNP多态性与猪屠宰性状相关性分析结果表明,-713位点处,后躯瘦肉重和眼肌面积均是TT型大于TC型,差异极显著;而对于中躯皮脂重,TC型显著高于TT型,大理石评分则是TT型最低。-584位点处,CC基因型大理石纹型评分最高,与AA型差异显著,与CA型差异不显著。-476位点处,AA型的中躯皮脂重最小,与AG型差异显著。

siRNA干扰鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制因子-1的表达抑制黑素瘤细胞增殖

目的:研究siRNA干扰鸟氨酸脱羧酶抗酶抑制因子-1(ornithine decarboxylase antizyme inhibitor-1,OAZI-1)的表达对小鼠黑素瘤B16-F1细胞增殖的影响。方法:构建OAZI-1特异性siRNA表达质粒psilencer2.1-U6/OAZI-1及对照psilenc-er2.1-U6/scrambled质粒,脂质体转染法将质粒转染入B16-F1细胞,Western blotting和定量PCR检测B16-F1细胞中OAZI-1的表达。MTT法和流式细胞术检测psilencer2.1-U6/OAZI-1对B16-F1细胞增殖和细胞周期的影响;MTT法检测干扰OAZI-1表达后B16-F1细胞对抗肿瘤药物紫杉醇(docetaxel)的敏感性。结果:成功获得稳定转染psilencer2.1-U6/OAZI-1质粒的B16-F1细胞(B16/OAZI-1细胞),B16/OAZI-1细胞中OAZI-1 mRNA和蛋白表达分别为阴性对照B16/scrambled细胞的25.0%和18.9%。干扰OAZI-1的表达抑制B16-F1细胞的增殖,G0/G1期细胞比例增加[(57.0±0.8)%vs(63.5±0.7)%,P<0.01],而S期和G2/M期细胞比例减少[(31.5±0.7)%vs(27.5±0.3)%,P<0.05;(11.5±0.3)%vs(9.1±0.6)%,P<0.01]。干扰OAZI-1的表达能降低B16-F1细胞对紫杉醇的敏感性。结论:siRNA干扰OAZI-1的表达能抑制黑素瘤B16-F1细胞的增殖,并降低其对紫杉醇的敏感性。

抗酶的研究进展

抗酶(antizyme)是当细胞内多胺水平升高时刺激机体合成的一种小分子量调节蛋白,能特异性地与鸟氨酸脱羧酶(ornithine decarboxylase,ODC)结合,经泛素非依赖途径被26S蛋白酶体降解,从而使多胺合成减少;抗酶还可以调节多胺转运,以稳定细胞内多胺水平。近年来随着生物技术的不断发展,对抗酶的认识也逐步深入,本文综述了抗酶家族、合成、作用及定位等方面的研究进展。

外源精脒和精胺可诱导大鼠早期再生肝抗酶的表达

目的探讨精脒和精胺对大鼠早期再生肝抗酶(AZ)表达的影响,及在肝再生中的作用。方法外源多胺(溶于0.9%NaCl)皮下注射雄性SD大鼠(180～200g),进行部分肝切除(PH)诱导。采用RT-PCR和Western blotting方法进行PH后大鼠再生肝中AZ基因转录量和蛋白表达量的分析。结果对照组完整肝脏(PH后0h)中,AZ基因转录量、蛋白表达量较低,PH后均快速升高,3h达到峰值,5h出现明显下降,7h再次升高并达到峰值,之后缓慢下降。外源多胺处理后,两种剂量精脒(0.03mg/kg和0.15mg/kg)和精胺(0.06mg/kg和6mg/kg)处理组AZ mRNA及蛋白表达水平变化趋势与对照组相似,但低剂量处理组远远低于相应时间点高剂量处理组。精胺的作用效果更明显,作用时间更持久。结论外源多胺对大鼠早期再生肝AZ mRNA及蛋白表达具有剂量依赖性促进作用,而精胺的作用较强,精脒较弱。