酒酒球菌抗酸相关基因RAPD标记的筛选

对影响RAPD反应体系的主要因素进行优化,建立适合本实验室的RAPD反应体系。在此基础上以33株抗酸性酒酒球菌和9株酸敏性菌株为试材,采用BSA法和RAPD技术,通过对45个随机引物的筛选以及在单菌株中的筛选验证,最终获得与酒酒球菌抗酸性状相关的3个RAPD标记:S40-1400、S333-2500、S333-650。

植物乳杆菌抗酸相关基因的序列特征性扩增区域(SCAR)标记

以11株抗酸性和8株酸敏性植物乳杆菌为实验菌株,采用群体分组分析法(BSA)和随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对55条引物进行筛选,并对基因池中扩增出差异性条带的引物进行单菌株验证,最终获得1个抗酸性RAPD标记:S116-680;将抗酸性RAPD特异片段回收,与pGEM-T Easy载体连接后测序;根据序列信息设计了一对特异性引物,该对引物能在11株抗酸性菌株中稳定扩增出一条680bp的特异性条带,命名为SA-680抗酸性相关标记。