抗-CD38单克隆抗体对输血前检测试验的干扰及其处理措施

目的探讨抗-CD38单克隆抗体对输血前检测实验的干扰及其处理措施。方法收集2名接受抗-CD38单克隆抗体治疗的多发性骨髓瘤患者血样,分别进行ABO和Rh血型抗原定型、直接抗人球蛋白实验、不规则抗体筛选和鉴定、交叉配血实验;将不规则抗体筛选用试剂红细胞、抗体鉴定谱细胞、交叉配血用的献血者红细胞、平行对照用的O型K(+)E(+)红细胞与0.2 mol/L的DTT按照红细胞:DTT为1∶4的比例进行混合后,放入37℃水浴箱水浴30 min;再用上述DTT处理后的红细胞分别对患者血浆进行不规则抗体筛选实验、抗体鉴定实验和交叉配血实验。结果2名患者的ABO和Rh血型均为O,CCDee;直接抗人球蛋白实验分别为阴性和阳性;未经DTT处理的抗体筛选红细胞、抗体鉴定细胞和献血者红细胞与患者血浆反应均呈阳性;DTT处理后的抗体筛选红细胞、抗体鉴定细胞和献血者红细胞与患者血浆反应均呈阴性;平行对照用的O型K(+)E(+)红细胞经DTT处理后转变为O型K(-)E(+)。结论抗-CD38单克隆抗体治疗多发性骨髓瘤,可干扰患者的血型血清学实验,用0.2 mol/L的DTT灭活红细胞表面的CD38抗原后,可以较好的去除这种干扰。

抗-CD47单克隆抗体干扰输血相容性检测1例

目的 探讨抗-CD47单抗对输血相容性检测的影响及处理措施。方法 对1名具有抗-CD47单抗用药史的患者血液标本进行输血相容性检测,分析抗-CD47单抗效价,鉴定巯基试剂对抗-CD47单抗的洗脱效果,利用中和抗体及抗球蛋白筛选与患者相配合的血液成分。结果 患者血型鉴定为A型,RhD(+),不规则抗体筛查、DAT试验、交叉配血均为3+或4+。利用中和抗体或Gamma-clone抗球蛋白均可为患者筛选到主侧配血相合的红细胞。患者输注后无不良反应,贫血状况得到明显改善。结论 利用中和抗体或Gamma-clone抗球蛋白处理患者血液标本,可以消除抗-CD47单抗对输血相容性检测的影响,保障临床用血的安全性、及时性和有效性。

单克隆抗-CD38抗体对红细胞血型血清学检测的干扰及解决方法现状

CD38分子高表达于多发性骨髓瘤(MM)细胞表面,但在红细胞、正常淋巴细胞和骨髓细胞上仅少量表达,因此CD38可作为 MM治疗的新靶点。单克隆抗-CD38抗体(中文名:达雷妥尤,Daratumumab)因为其高效性和良好的安全性被广泛应用于治疗复发难治性MM。但是,达雷妥尤会对红细胞血型血清学检测产生干扰。随着单克隆抗体治疗的日益普及,输血实验室收到此类患者血液标本的可能性也随之增加,为输血服务带来重大挑战。本文将结合已发表的临床文献资料,综述国内外解决这一问题的各种方法,最后提出优化输血管理的建议。

抗人CD38单克隆抗体的制备、鉴定及其功能的初步研究

目的 研制抗人CD38抗原分子的单克隆抗体 ,进一步研究其生物学功能。方法 采用高表达CD38抗原的Daudi细胞免疫Balb c小鼠 ;取其脾细胞与SP2 0细胞融合 ;用间接免疫荧光法进行杂交瘤筛选 ;流式细胞术、免疫沉淀法与CD38分子原核表达产物的Western blot分析鉴定单克隆抗体的特异性。以MTT(四甲基偶氮唑盐 )法检测单克隆抗体抑制细胞增殖以及介导补体杀伤靶细胞的功能。结果 获得了一株抗人CD38分子的单克隆抗体 1C6 ,流式细胞术显示它具有CD38抗原特异的细胞反应谱 ,其识别的抗原分子质量为 4 5 0 0 0u。与CD38分子原核表达产物的Western blot分析表明 ,其可特异识别CD38分子胞外结构域。MTT法显示其可介导补体杀伤靶细胞。结论 成功制备了抗人CD38分子的单克隆抗体 ,并进行了初步的功能研究。

CD38单克隆抗体对输血相容性检测干扰及其应对方案的专家共识

随着肿瘤免疫靶点的不断发现及抗体研发技术的持续变革,抗体药物在临床上的应用越来越广泛。但有些靶点不仅在肿瘤细胞上表达,而且在红细胞上也有表达,故临床上针对相应靶点抗体的应用可能会对输血相容性检测产生干扰,导致配血困难或输血延迟。本共识总结了目前克服CD38单克隆抗体(简称CD38单抗)干扰输血相容性检测的方法,并经过对不同方法的优缺点分析后,推荐在中国患者人群中使用凝聚胺和巯基还原剂[二硫苏糖醇(Dithiothreitol,DTT)或2-巯基乙醇(2-mercaptoethanol,2-Me)]处理红细胞,作为解决CD38单抗干扰输血相容性检测的方法,以消除CD38单抗带来的输血问题,为临床医师和输血科技术人员提供相应输血前工作流程的解决方案。

抗-CD47单克隆抗体对输血前检测试验的干扰及处理措施——附1例报告

目的探讨抗-CD47单克隆抗体对输血前检测试验的干扰及处理措施。方法收集1名接受抗-CD47单克隆抗体治疗的骨髓增生异常综合征受试者标本,进行ABO和Rh血型抗原鉴定,直接抗球蛋白试验,不规则抗体筛选和抗体鉴定试验,交叉配血试验;收集多人份O型献血者血小板制备成压积血小板,与受试者血浆进行吸收试验;收集Rh抗原分型分别为CCDee、ccDEE和ccdee的O型红细胞各1人份,分别与受试者血浆进行吸收试验;使用缺乏IgG4的抗球蛋白试剂Gamma-clone进行抗体筛选与交叉配血试验,使用Immucor Capture-R固相凝集试剂盒进行不规则抗体筛选试验。结果受试者直接抗球蛋白为阳性,游离抗体筛选和鉴定试验在所有介质中均为阳性(3+~4+);血浆与红细胞多次吸收后,抗体筛选和抗体鉴定为阴性;与多次血小板吸收后,抗体筛选和抗体鉴定仍为阳性;使用Gamma-clone抗球试剂进行不规则抗体筛选和配血试验,结果均为阴性;Immucor Capture-R固相凝集试剂盒进行不规则抗体筛选试验,结果为阴性。结论抗-CD47单克隆抗体可干扰输血前检测及交叉配血,使用缺乏检测IgG4的抗球蛋白试剂Gamma-clone和Immucor capture-R固相凝集法可较好去除抗-CD47干扰。

抗人CD38分子单克隆抗体生物学功能研究

目的研究抗人CD38单克隆抗体(1C6)的生物学功能。观察1C6对多种肿瘤细胞系生长增殖的影响,利用不同刺激原诱导的淋巴细胞增殖反应,观察抗人CD38单克隆抗体(1C6)在人外周血淋巴细胞增殖反应中的作用。方法以MTT法检测单克隆抗体抑制细胞增殖以及介导补体杀伤靶细胞的功能。利用抗人CD3单克隆抗体刺激人外周血淋巴细胞增殖、同种异型抗原诱导混合淋巴细胞反应,在加入或未加入抗人CD38单克隆抗体(1C6)的情况下,观察细胞形态并检测3H-TdR掺入量。结果加入不同浓度的1C6的实验组与对照组相比,多种细胞系的生长受到不同程度的抑制。不同刺激原诱导的淋巴细胞增殖反应中,加入1C6的实验组细胞克隆明显减少,3H-TdR掺入量明显下降,细胞增殖受抑。结论1C6可抑制多种肿瘤细胞的生长,可介导补体杀伤多种靶细胞。1C6对抗CD3刺激的外周血淋巴细胞增殖以及混合淋巴细胞培养均具有明显的抑制效应。

抗-CD36单克隆抗体对人CD34^+造血干(祖)细胞增殖和分化的影响

目的探讨抗-CD36单克隆抗体对人CD34^+造血干(祖)细胞体外增殖和分化的影响。方法选择无各种产科并发症的健康足月产妇3名,取脐带血20 mL/(人)份,以Ficoll细胞分离液(1.077 g/mL)密度梯度800 g离心30 min后,流式细胞仪分选CD34^+造血干(祖)细胞,培养2—3代,四唑盐(MTT)比色法检测抗-CD36单克隆抗体对CD34^+细胞生长的影响;流式细胞术检测细胞凋亡,Annexin V/PI双染法和碘化丙啶(PI)单染法检测细胞周期。观察抗-CD36单克隆抗体对CD34^+造血干(祖)细胞凋亡和细胞周期的影响、对造血干(祖)细胞红系分化能力以及对红系集落形成单位(CFU-E)和红系爆式集落形成单位(BFU-E)生成的影响。结果流式细胞仪分选出经Ficoll分离脐带血获得的单个核细胞中约0.44%CD34^+造血干(祖)细胞。2、8、32、64、128μg/mL抗-CD36单克隆抗体分别与CD34^+造血干(祖)细胞体外共培养:单纯CD34^+造血干(祖)细胞培养(正常)组、抗-CD36单克隆抗体2及32μg/mL组,IgG(对照)组的OD值分别为1.05±0.12 vs 0.9±0.15 vs 0.81±0.11 vs 1.06±0.18(P<0.01)。Annexin V流式检测凋亡率(%):正常组、对照组与2μg/mL抗-CD36单克隆抗体组分别为10.13SymbolqB@1.42 vs 10.51SymbolqB@1.75 vs 24.57SymbolqB@2.75(P<0.05)。G_1/S值:正常组、对照组与2μL/mL抗-CD36单克隆抗体组分别为3.95±0.25 vs 4.36±0.55 vs 7.35±0.65(P<0.05)。CD34^+造血干(祖)细胞定向分化红系(CFU-E/BFU-E克隆形成数):正常组、对照组与抗-CD36单克隆抗体组分别为169±12、172±12和85±6(P<0.05)。结论抗-CD36单克隆抗体诱导人CD34^+造血干(祖)细胞凋亡,细胞增殖减少和红系CFU-E/BFU-E克隆能力降低。

抗CD38单克隆抗体:复发难治性系统性轻链型淀粉样变性患者的福音

系统性轻链(AL)型淀粉样变性是由异常单克隆免疫球蛋白轻链形成淀粉样蛋白,沉积于组织器官,进而造成组织结构损伤、器官功能障碍的系统性疾病[1]。从异常单克隆免疫球蛋白轻链的来源看,大部分都是浆细胞所产生,来源于淋巴细胞的仅占2%[2],故针对异常克隆性浆细胞的治疗是AL型淀粉样变性治疗的主要方式之一。目前,自体外周血干细胞移植(ASCT)和基于硼替佐米的化疗方案是初治AL型淀粉样变性的主要一线选择。联合硼替佐米于移植前诱导及移植后的巩固治疗,可使60%患者获得血液学完全缓解率[3],且取得完全缓解的患者中超过50%总生存期超过15年[4]。对于不适合移植的初治AL型淀粉样变性患者,硼替佐米联合环磷酰胺和地塞米松(CyBorD)的方案也有一定的疗效,在一项纳入915例患者的大型回顾性研究中[5],CyBorD方案的总体血液学反应率为65%,其中完全缓解率(CR)25%;非常好的部分缓解率(VGPR)24%,33%的患者获得心脏反应,15%的患者获得肾脏反应。

抗CD38 单克隆抗体治疗多发性骨髓瘤的作用机制及研究进展

多发性骨髓瘤(MM)的发病率约占所有恶性血液系统疾病的10%,其骨髓检查主要以浆细胞克隆性增生为主,目前仍然很难治愈,且复发性/难治性MM预后效果很差,因此,针对治疗MM的新型药物的研究和开发尤为重要。CD38是MM免疫治疗的重要靶点,抗CD38单克隆抗体药物在MM靶向治疗中已经发挥重要作用,通过了解其免疫效应机制可以更好地预测患者对于治疗的敏感性并对治疗措施进行优化。本文对抗CD38单克隆抗体治疗MM的作用机制及其研究进展进行综述。

抗CD38单克隆抗体治疗系统性轻链型淀粉样变性

近年来轻链型淀粉样变性的治疗手段日益丰富。抗CD38单克隆抗体已成功应用于浆细胞疾病和多发性骨髓瘤的治疗,系列研究报道了其对轻链型淀粉样变性的疗效,本文拟简述该药治疗系统性轻链型淀粉样变性的临床应用进展。

抗-CD47单抗对输血相容性检测的干扰及处理

目的 评估抗-CD47单克隆抗体对输血相容性检测的干扰,研究去干扰方法,并对受试者输注效果进行评价。方法 收集本院参与接受天境和信达公司生产的抗-CD47单克隆抗体药物治疗的8名临床试验受试者标本,使用缺乏IgG4的抗人球蛋白试剂Gamma-clone、ZZAP试剂和药物独特型中和试剂等进行血型检测、意外抗体筛查、直接抗人球蛋白试验和交叉配血试验。结果 使用抗-CD47单抗治疗后,8名受试者中有5名ABO血型检定受到干扰;所有受试者直接抗人球蛋白凝集强度呈现2+~4+,且所有受试者意外抗体筛查结果都呈3+~4+。采用缺乏IgG4的抗人球蛋白试剂Gamma-clone的试管法进行意外抗体筛查试验,结果均呈现阴性,交叉配血试验均相合。采用药物独特型中和抗体进行意外抗体筛选,试验结果显示均为阴性,交叉配血试验均相合。使用CD47单抗药物导致贫血的患者均输注2U悬浮红细胞,评价经抗干扰处理后配血相合患者的输血效果,结果显示患者输血有效。结论 受试者使用CD47单抗药物后会干扰输血相容性检测,使用缺乏IgG4的抗人球蛋白试剂和药物独特型中和抗体可去除抗-CD47干扰,受试者输血效果良好。

抗CD38单克隆抗体对多发性骨髓瘤患者交叉配血干扰及输血疗效的影响

目的多发性骨髓瘤(MM)患者应用抗CD38单克隆抗体治疗,影响红细胞(RBC)交叉配血结果,评估经二硫苏糖醇(DTT)处理RBC后交叉配血的结果及输血疗效。方法对40例使用抗-CD38单克隆抗体治疗的MM患者血浆与经DTT处理后的供者RBC、抗筛细胞及自身细胞进行交叉配血,并对其输血前后实验室指标进行统计分析。结果40例患者输注RBC后血红蛋白、血细胞比容和RBC[(75.60±11.80)g/L,(22.39±3.53)%,(2.46±0.42)×10^(12)/L]比输血前[(66.60±10.47)g/L,(19.81±3.10)%,(2.15±0.38)×10^(12)/L]明显提高,差异有统计学意义(P<0.01);患者总胆红素、直接胆红素、间接胆红素及乳酸脱氢酶输注前后差异无统计学意义(P>0.05)。患者输血有效率为62.5%,部分有效率为20.0%,无效率为17.5%。结论DTT处理RBC对使用抗CD38单克隆治疗的MM患者配血不相合有效,经这种配血方法选择RBC为患者输注,其实验室指标表明输血疗效较为明显。

CD40-CD40L信号通路在移植免疫中的应用与进展

CD40-CD40L信号通路在特异性免疫中是一条重要的细胞信号传导通路,它参与体液免疫和细胞免疫的调节。动物实验表明抗CD40L单克隆抗体(m Ab)阻断CD40与CD40L的结合,从而阻断CD40-CD40L信号的传导,具有抑制器官移植排斥反应的作用。近年来抗CD40Lm Ab在临床试验中出现的血栓并发症导致其应用受到了质疑。随着人们对CD40-CD40L信号通路的认识不断深入,尤其是新的抗CD40m Ab的应用,使得克服与之相关的血栓并发症成为可能,加之其在动物器官移植模型中表现出良好的应用前景,相信这将会进一步推动器官移植免疫耐受及免疫抑制剂方案的发展。本文就CD40-CD40L信号通路在器官移植方面取得的进展进行综述。

复发难治性多发性骨髓瘤的单抗治疗研究进展

多发性骨髓瘤(Multiple myeloma,MM)是一种血液系统恶性肿瘤,过去十年对于的治疗有明显的进步,但是仍然无法达到令人满意的地步。单克隆抗体药物的出现成为治疗MM的新的治疗方向。如达雷妥尤单抗、埃罗妥珠单抗、艾沙妥昔单抗、MOR202对难治性多发性骨髓瘤(Relapsed and refractory multiple myeloma,RRMM)的治疗呈现良好的功效。本文总结了单克隆抗体以及衍生的相关疗法在RRMM领域中的应用。

Isatuximab 治疗多发性骨髓瘤的研究进展

Isatuximab是一种抗CD38单克隆抗体,可通过多种途径诱导肿瘤细胞凋亡。该药用于既往至少接受过两种治疗方法的多发性骨髓瘤患者的治疗。大量研究证明,isatuximab联合泊马度胺和地塞米松治疗多发性骨髓瘤及复发难治性多发性骨髓瘤均具有良好的疗效,不良反应可控且耐受性较好。

多发性骨髓瘤最新研究进展

近些年多发性骨髓瘤（MM）的治疗取得了令人瞩目的进展,特别是2015年,美国食品药品监督管理局（FDA）批准了多个新药治疗复发难治MM.在丹麦哥本哈根举办的第21届欧洲血液学会年会上,关于MM的议题得到了与会各国专家学者的广泛关注.文章就MM的最新进展进行简要综述.