人GOR基因重组体的构建及其在C_(os)—7细胞内的表达

目的构建能正确表达人GOR蛋白的真核重组体，制备人源性GOR蛋白。方法将人GOR基因片段亚克隆到真核表达载体PCDNA31（－）／Myc－HisA，B，C系统，PCR法和EC。RⅠ酶切筛选重组体，KpnⅠ酶切鉴定重组体方向，正向重组体用磷酸钙共沉淀法分别转染Cos－7细胞。用PCR法和ELISA法分析重组体是否转入Cos—7细胞并能正确编码人GOR蛋白。最后制备人GOR蛋白。结果所构建的人GOR基因重组体A、B、C分别转染Cos—7细胞后，都能在细胞内转录；但只有重组体A能正确表达人GOR蛋白。结论 本研究所构建的人GOR基因真核重组体能正确表达人GOR蛋白。