通过定量检测血清抗-HBc-IgM和HBV DNA水平区分两种乙型肝炎病毒相关急性肝衰竭

乙型肝炎病毒(HBV)相关肝衰竭(HBV-ALF)可发生在急性HBV感染(AHBV-ALF)之后或慢性HBV感染急性发作(CHBV-ALF)期间。如果没有明确的HBV感染病史,临床区分两者常常是很困难的。定量检测血清抗-HBc IgM和HBV DNA水平可区分这两种疾病。在1602名急性肝衰竭患者中,60名符合AHBV-ALF临床诊断,27名符合CHBV-ALF临床诊断,两组中分别有47名和23名患者留取了血清样本,应用定量免疫试剂检测其抗-HBc IgM水平,实时定量PCR方法检测HBV DNA水平了解其病毒水平。AHBV-ALFs患者抗-HBc IgM水平明显高于CHBV-ALFs患者(信噪比[S/N]:中位数88.5 vs 1.3;范围0～1120 vs 0～750;P<0.001),如果将S/N比5.0作为界值能够准确诊断44名(44/46,96%)AHBV-ALFs患者和16名(16/23,70%)CHBV-ALFs患者,ROC曲线下面积为0.86(P<0.001)。AHBV-ALF患者病毒载量中位数为3.9(0～8.1)log10IU/ml,而CHBV-ALF患者为5.2(2.0～8.7)log10IU/ml(P<0.025)。本研究中20%(12/60)AH-BV-ALF患者检测不到乙肝表面抗原(HBsAg),而CHBV-ALF患者没有HBsAg消失的。所有患者均未行肝移植,AHBV-ALF患者存活率为33%(20/60),而CHBV-ALF患者为11%(3/27)(P=0.03)。结论:AHBV-ALF和CHBV-ALF患者在抗-HBc IgM、HBV DNA水平以及预后方面有明显不同,这些提示一种疾病两种表现形式确实不同,可能有其不同的发病机制。

定量检测抗-HBs在评价儿童乙肝疫苗接种效果中的作用

目的:分析定量检测抗-HBs在评价儿童乙肝疫苗接种效果中的作用。方法:在罗氏E170电化学发光仪上,利用微粒子免疫吸附的相关原理来对全程免疫过乙肝疫苗进行定量分析,用酶联免疫吸附(即ELISA)来对其中的76份抗-HBs儿童血清样本中的抗-HBs进行定性检测。结果:通过ELISA定性检测,76份抗-HBs儿童血清样本,抗-HBs超过10Miu/ml的样本有41份,抗-HBs低于10Miu/ml的样本有22份,抗-HBs低于2.1Miu/ml的样本有13份。结论:儿童在接种乙肝疫苗后,ELISA定性检测的结果显示,在儿童的抗-HBs样本血清中,还有54%的抗-HBs含量处于乙肝病毒感染的预防水平。由此可见,仅仅依靠ELISA定性检测来对乙肝疫苗在注入人体后的免疫效果进行判断,其准确性较低,而抗-HBs的定量检测在确定乙肝疫苗的接种方案以及对其接种效果进行评价这两方面具有十分重要的价值。

污水处理过程中抗生素抗性基因的检测及其水平转移机制的研究进展

抗生素的滥用使得近年来环境中抗生素频繁检出,同时污水处理厂接纳不同来源的污水后也促进了抗性基因的水平转移.现阶段抗性基因和水平转移的定性、定量检测手段多样化,尤其是水平转移的机制也备受关注.本文介绍了抗生素抗性基因和水平转移的检测方法以及抗性基因水平转移的研究进展,展望了今后的发展方向,以期为抑制抗性基因的扩散提供技术参考.

乙肝抗-HBe及抗-HBs阳转后血清中HBV-DNA的存在状态

由HBV引起的慢性肝炎经抗病毒治疗或自然转归后，用斑点杂交方法和聚合酶链反应（PCR）检测血清中的HBV－DNA。对128名患者进行观察，其中HBeAg阴转者27例，半年、一年后分别用PCR方法检测HBV－DNA,阳性例数分别为20例和18例，阳性率分别是74％和67％（P＞0．1）。而HBsAg阴转两个月后HBV－DNA阳性率为42％，一年后HBV－DNA阳性率为5％。结果表明，血清中的HBV－DNA检测阴性时多伴有抗－HBs出现，其它生化指标也相应改善，而抗－HBe出理时HBV－DNA仍有半数以上阳性。乙肝病毒复制水平HBeAg阴转者明显高于HBsAg阴转者、一般规律是在HBsAg阴转后乙肝病毒复制大部分消失。

定量检测血清HBV标志物不同阳性组合模式与HBVDNA定量之间的关系

目的 探讨定量检测乙型肝炎病毒血清标志物(HBVM)与HBVDNA定量之间的关系。方法 采用实时荧光定量PCR仪检测HBVDNA ,采用时间分辨荧光免疫分析仪检测HBVM。结果 3 71例乙型肝炎患者表现12种阳性模式,除常见模式外,发现3种HBVM特殊模式,即抗 HBe与HBeAg共存,即抗 HBs与HBeAg或与HBsAg共存模式。含有HBeAg的各种模式病毒含量高,病毒复制活跃,HBVDNA阳性率多数较高。结论 时间分辨荧光免疫分析法是一种敏感、特异方法,HBVM各项指标中,抗原意义远大于抗体意义,只要有HBeAg存在的模式,就代表病毒复制活跃及传染性强。抗 HBe与HBeAg共存或抗 HBs与HBeAg或与HBsAg共存时,抗 HBs不能清除HBV ,抗 HBs及抗 HBe也不代表病毒复制减少。

HBsAg阳性人群家庭成员中抗-HBs水平观察与研究

目的:通过对HBsAg阳性人群家庭成员中大于15岁HBsAg阴性成员进行抗-HBs水平的定量检测,了解其免疫前后抗-HBs水平的变化,为慢性HBV感染者人群密切接触者免疫预防与控制和成人乙肝疫苗免疫策略提供重要的科学依据。方法:采用微粒子酶免疫分析技术(MEIA)[1]。结果:2010年对我市的两个自然村HBsAg阳性人群家庭成员中大于15岁HBsAg阴性成员共30人进行了抗-HBs水平的定量检测,其中免疫前<10 mIU/ml 8人,占26.7%;10 mIU/ml～50 mIU/ml 9人,占30.0%;50 mIU/ml～100 mIU/ml 7人,占23.3%;>100 mIU/ml 6人,占20.0%;平均GMT为112.48 mIU/ml;免疫后<10 mIU/ml 1人,占3.3%;>100 mIU/ml 29人,占96.7%;平均GMT为712.51 mIU/ml。结论:经过乙肝疫苗的接种后,抗-HBs水平都呈明显的上升,因而HBsAg阳性人群家庭成员可通过接种乙肝疫苗来预防与控制HBsAg阳性人群通过水平或性传播等方式造成家庭成员的HBV的感染。

丙型肝炎病毒IgG抗体阳性患者血清抗HCV IgM、ALT及HCV RNA的对比分析

目的:探讨丙型肝炎(H C V)IgG阳性患者的血清抗-H C V IgM、丙氨酸转移酶(A LT)水平与H C V R N A之间的关系。方法:通过第三代E IA试剂盒检测抗-H C V IgG、抗-H C V IgM,全自动生化分析仪检测丙型肝炎患者A LT水平,荧光定量逆转录聚合酶链反应(R T-PC R)方法检测H C V R N A,并进行比较。结果:在丙型肝炎IgG阳性患者中,抗-H C V IgM阳性率为8.3%,H C V R N A阳性率为41.7%。H C V R N A的检出在A LT异常情况下较正常明显高(P<0.05),但A LT水平与H C V R N A含量无线性相关性(r=0.346,P>0.05)。结论:抗-H C V IgM不能反映病毒复制,A LT异常情况下H C V R N A检出率高,但A LT水平与H C V R N A含量无线性相关性,H C V R N A仍是反映H C V复制的可靠指标。

乙型肝炎表面抗原定量检测在抗乙型肝炎病毒治疗中的应用

既往检测HBsAg主要用于临床诊断，近年来的研究表明，HBsAg定量水平可作为其血清转换的预测和治疗终点的评估，尤其是在应用干扰素治疗HBeAg阴性慢性乙型肝炎（CHB）患者时，较低的HBsAg基线水平和治疗后显著的下降，预示患者治疗效果较好。据此，一些学者建议将HBsAg定量检测纳入抗HBV治疗的检测体系中，以更好地评价抗病毒治疗尤其是干扰素治疗的效果。但是，由于HBsAg的水平受到诸多因素的影响，其与HBVDNA水平变化的相关性目前认识也并不一致，因此，其应用价值尚需进一步的临床观察。在此，对HBsAg定量检测在抗HBV治疗中的应用进行探讨。

乙型肝炎病毒标志物与病毒载量的关系

目的:探讨乙型肝炎病毒标志物(HBV-M)与HBV载量(HBV-DNA)的关系,为临床正确诊治乙型肝炎提供科学依据。方法:采用免疫发光和荧光定量聚合酶链反应技术分别检测了670例患者血清中的HBV-M和HBV-DNA。结果:HBeAg阳性模式HBV-DNA>5.0×104 cps/mL占96.3％(363/377),HBeAg阴性模式HBV-DNA>5.0×104 cps/mL占74.8％(160/214)。HBeAg阳性模式HBV-DNA载量显著高于HBeAg阴性模式(p<0.05)。1,3,5模式HBV-DNA载量显著高于1,4,5模式(P<0.01)。HBsAg阴性的模式中:14例HBV-DNA>5.0×104 cps/mL占18.8％(12/64),抗-HBs阳性模式中,HBV-DNA>5.0×104 cps/mL占16.7％(7/42)。结论:HBeAg阳性模式HBV-DNA载量显著高于HBeAg阴性模式。但少数HBeAg阳性模式中病毒水平很低及HBeAg阴性模式病毒水平很高。还存在着HBsAg阴性或/及抗-HBs阳性的HBV感染。故临床上只有将HBV-M与HBV载量检测相结合,才能正确判断病情及预后。

幼儿820例乙肝疫苗免疫应答的分析

分析 1岁半以内的幼儿接种乙肝疫苗后免疫应答率及其应答结果与影响免疫应答因素的关系。在乙肝疫苗全程接种结束后一年内进行抗 -HBs的定量检测。检测发现 82 0例幼儿的免疫应答率为 99 2 6 8% ,其中 1岁以内 2 94例的免疫应答率为 10 0 %。为了进一步提高乙肝疫苗的免疫应答率 ,强调 2 4小时内接种第一针是提高免疫应答的关键 ;全程接种结束后 1月检测应答结果 。

ISGF3:IFN-α抗乙型肝炎病毒信号转导机制的重要因子

目的 研究干扰素 α(IFN α)抗乙型肝炎病毒(HBV)的信号转导机制。方法 用定量聚合酶链反应(PCR)检测IFNα2b处理前、后的HepG2 2 15细胞上清的乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBVDNA)水平。半定量逆转录聚合酶链反应(RT PCR)检测IFNα2b处理后不同时点的HepG2 2 15细胞和其母源细胞HepG2 细胞内信号转导和转录活化因子1(STAT1)、STAT2、干扰素刺激基因因子3γ(ISGF3γ)、2′5′寡腺苷酸合成酶(2′5′OAS)、RAN依赖蛋白激酶(PKR)的mRNA表达水平。WesternBlot检测ISGF3γ的蛋白质表达水平。并用染料木黄酮阻断IFNα2b信号转导后再次检测上述指标。结果 IFNα2b处理8h后,HepG2 2 15细胞上清HBVDNA平均减少0 72log 10copies ml,而加染料木黄酮后则无减少。IFNα2b处理后,HepG2 和HepG2 2 15细胞中STAT1、STAT2、ISGF3γ、2′5′OAS和PKRmRNA水平明显升高;加染料木黄酮后前3个因子mRNA水平仍然能检测到,而2′5′OAS和PKRmRNA则受到抑制。WesternBlot检测也提示IFNα2b处理后ISGF3γ蛋白质水平升高,加染料木黄酮后其表达受到抑制。结论 Janus酪氨酸激酶(JAK) STAT途径在IFN α抗HBV中发挥主要作用,而ISGF3是该途径的一个重要因子。