皖北地区1025例孕妇抗-HPA抗体的初步研究

目的:探讨皖北地区孕妇血小板抗体的产生与基因型分布情况,为中国孕妇是否进行产前血小板抗体筛查提供基础数据和统计学依据。方法:选择2016年12月至2017年12月在本院进行产检的1025例孕妇为研究对象,收集其外周血,用单克隆抗体特异性血小板抗原固定术对孕妇血清进行血小板抗体初筛,对于初筛阳性标本用二磷酸氯喹去除人类白细胞抗原(HLA)的作用后重复进行初筛实验,仍为阳性的标本利用抗原捕获酶联免疫吸附试验进行血小板抗体抗原特异性分析。对于抗-HLA抗体阳性标本用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)法进行HLA基因型检测,对人类血小板抗原(抗-HPA)抗体阳性标本用PCR-SSP法进行HLA和HPA基因型检测。结果:1025例孕妇中血小板抗体阳性者共45例,总阳性率为4.39%,其中41例为抗-HLA抗体阳性,4例为抗-HLA抗体和抗-HPA抗体同时阳性;初次妊娠孕妇(410例)与多次妊娠孕妇(615例)比较,血小板抗体阳性者分别为6例和39例,阳性率分别为1.46%和6.34%,差异具有统计学意义(χ2=13.95,P<0.05);在多次妊娠孕妇中,有2次妊娠史(388例)、3次妊娠史(188例)、4次及以上妊娠史(89例)孕妇血小板抗体阳性者分别为18例、10例、11例,阳性率分别为4.64%、7.25%、12.36%,三组比较差异具有统计学意义(χ2=7.51,P<0.05)。结论:皖北地区孕妇血小板抗体阳性率为4.39%,其中抗-HLA抗体阳性率为4.39%,抗-HPA抗体阳性率为0.39%,且抗-HPA抗体阳性孕妇同时伴有抗-HLA抗体阳性;孕妇血小板抗体的产生与妊娠次数有着密切的关系,抗体阳性率随着妊娠次数的增加而增高;在皖北地区人群中致新生儿同种免疫性血小板减少症发生的致病抗体可能为抗-HPA-5b抗体;皖北地区血小板抗体阳性孕妇的基因分型中,频率较高的HLA-A特异性抗原有A2、A24、A11、A33,HLA-B特异性抗原有B46、B13、B60、B62、B58,HLA-DQ特异性抗原有DQ6、DQ2、DQ9、DQ5、DQ7,HLA-DR特异性抗原有DR9、DR4、DR15、DR7、DR12、DR13。

血小板特异性糖蛋白抗体在血小板输注无效患者中分布的研究

目的探讨血小板输注无效(PTR)患者的血小板特异性糖蛋白抗体的表达及PTR与血小板特异性抗原的相关性。方法采用ELISA方法检测27名临床上确诊为PTR患者的血小板特异性糖蛋白抗体,应用PCR-SSP的方法检测其HPA-1～17基因分型。结果 27名PTR患者的HPA基因频率为HPA-1a(0.900),1b(0.100);HPA-2a(0.926),2b(0.074);HPA-3a(0.648),3b(0.352);HPA-4a(0.981),4b(0.019);HPA-5a(0.940),5b(0.060);HPA-6a(0.815),6b(0.185);HPA-7a～14a、16a、17a(1.000),7～14、16、17b(0.000);HPA-15a(0.463),15b(0.537);PTR患者的HPA抗原分布与健康献血者的基因频率无统计学差异(P>0.05)。血小板抗体阳性的27名PTR患者中,血小板特异性糖蛋白GPⅡb/Ⅲa抗体阳性表达者占78%(21/27)、GPⅠa/Ⅱa抗体阳性占70%(19/27)。对3名PTR患者作血小板特异性抗原分析发现:患者产生的血小板特异性糖蛋白抗体与HPA基因型密切相关,以抗-HPA-3b、-5b为常见。结论多次输注血小板无效的患者,应选择与其HPA基因型一致的血小板供者,以提高血小板输注疗效,避免血液资源的浪费。

恶性血液病及肿瘤患者的血小板输注疗效观察和无效输注的干预处理

目的了解恶性血液病和肿瘤患者输注滤白机采血小板的疗效,并探讨免疫性无效输注的干预方法。方法调查肿瘤及血液病住院且需要输注血小板的患者523人次;分析血小板输血疗效,对于2次输注无效、排除非免疫性因素的患者,应用MACE分析有无抗-HLA和抗-HPA,以确定有抗体的患者应用血小板配合性输血方法。对存在抗体的患者应用SSP方法确定其HLA和HPA型。结果恶性血液病及肿瘤患者的血小板输注有效率为67.7%(354/523),输注无效的患者中,非免疫性因素占69.23%(117/169);排除非免疫性因素后,抗-HLA阳性占输注无效的15.38%(8/52),抗-HPA阳性率为1.92%(1/52)。13人次采用配合性输注10次达到了输血有效。结论恶性血液病及肿瘤患者输注血小板时宜常规做抗体筛查,对于可能反复输血的患者还应鉴定其HLA和HPA基因鉴定,选择配合性输注有利于提高这类患者血小板的输血疗效。

血小板捐献者血型资料数据库的建设与应用展望

供受者血小板配合输注可有效解决免疫性血小板输注无效问题。由于受HLA和HPA基因系统多态性、人群中CD36抗原缺乏个体比例及临床应用需求时限性等因素的影响,需要提前建立有一定规模的血小板捐献者血型资料库,才可能在临床需要时及时提供配合性血小板。血小板捐献者血型资料库涉及HLA-A,-B基因型资料库、HPA基因型资料库和CD36抗原阴性资料库;国内部分血站已建立200—4 000(人)份捐献者血小板血型资料库。建库中献血者选择、HLA-C位点覆盖问题、HPA系统最适检测范围和检测方法选择仍有待标准化。血小板捐献者血型资料库具有良好的应用前景,但仍需要通过扩大血小板捐献者基因型资料库规模、缩短配合血小板制备发放流程所需时间和加强临床沟通等措施,来提升基因型配合血小板的临床应用。

父母血小板血型不合引起新生儿同种免疫性血小板减少症的初步研究

目的探讨由于父母血小板血型不合产生血小板抗体,诱导新生儿发生同种免疫性血小板减少症的相关性。方法收集22例临床上确诊为新生儿免疫性血小板减少症(NIT)的患儿为研究对象,采用ELISA方法检测患儿及其父母的血小板相关抗体,应用PCR-SSP法对患儿及父母进行HLA及HPA基因分型,根据相应的抗原进行抗体特异性分析。结果 22例NIT患儿中,14例是由于同种免疫性因素引起的,其中27.3%(6例)由HLA抗体引起,13.6%(3例)由HPA抗体引起,22.7%(5例)由HLA+HPA抗体引起;9.1%(2例)由于被动免疫性因素引起;27.3%(6例)由自身抗体引起。其中,同种免疫性抗体以抗HLA-A2、19,抗-B40及抗HPA-3a多见。结论在新生儿免疫性血小板减少症中,主要以父母血小板血型不合引起新生儿同种免疫性血小板减少症为主,临床产前诊断预防和产后治疗具有重要意义。