抗白细胞介素-5单克隆抗体治疗哮喘效果的Meta分析

目的:系统评价抗白细胞介素-5(IL-5)单克隆抗体治疗哮喘的临床效果。方法:在PubMed、Embase和Cochrane对照试验中央注册中心检索有关抗IL-5单克隆抗体治疗哮喘的随机对照试验文献,检索时间为截至2024年3月,对数据采用CMA 2.0软件进行Meta分析。结果:纳入21篇文献,共8717例患者,试验组4593例,对照组4124例。Meta分析结果显示,在第1秒用力呼气容积(FEV1)、哮喘生活质量问卷评分、不良事件发生情况方面,试验组优于对照组。结论:抗IL-5单克隆抗体治疗哮喘的临床效果较好,可改善患者FEV1、生活质量,且安全性较高。

胞外囊泡DNA中5-羟甲基胞嘧啶分子标志物对突发性聋的疗效预判研究

目的 突发性聋(sudden sensorineural hearing loss, SSNHL)是一种急性感音神经性聋,部分患者治疗效果较差,目前无有效疗效预测指标。5-羟甲基胞嘧啶(5hmC)是一种稳定的表观遗传标志,因其在不同身体状态下富集含量不同的特点可作为预测疗效的生物标志物,本研究通过寻找5hmC标志物,探索其对SSNHL疗效进行预测的可能性。方法 选取2021年7月—2023年6月中国人民解放军总医院海南医院耳鼻咽喉头颈外科收治的SSNHL患者57例,其中男性26例、女性31例;根据治疗前后的听力结果将患者分为有效组27例和无效组30例。使用队列研究方法,寻找5hmC富集水平与SSNHL疗效之间的相关性。利用5hmC-Seal技术在患者治疗前的血浆胞外囊泡DNA中生成全基因组5hmC谱,比较两组不同治疗效果的5hmC谱,筛选出有价值的5hmC标志物,并进行相关功能和传导通路的初步探索。结果 共鉴定出11个5hmC标志物来预测治疗结果(曲线下面积为0.998),预测准确性较高。GO功能分析表明,调节GTPase活性、神经元投射发育、神经细胞发育等信号通路可能与内耳疾病的发病机制有关。结论 SSNHL治疗有效组和无效组的5hmC谱存在明显差异,胞外囊泡DNA来源的5hmC有可能作为有效的表观遗传生物标志物,用于SSNHL的微创疗效预测。

补肾活血方对抗磷脂抗体阳性复发性流产患者外周血microRNA-423-5p表达的影响及疗效分析

目的 探讨抗磷脂抗体阳性复发性流产(RSA)患者外周血miR-423-5p表达及补肾活血方的干预效果。方法 选取2017年5月—2019年12月河南大学淮河医院收治的92例抗磷脂抗体阳性RSA患者。将患者分为对照组和研究组,每组46例。对照组给予常规西医治疗,研究组在对照组基础上另给予补肾活血方干预,两组均持续治疗8周,并自治疗起始随访2年。对比两组患者治疗前后中医证候评分、血管生成因子及蜕膜化标志因子变化情况,统计两组患者治疗前后miR-423-5p表达及凝血功能变化情况,记录两组患者治疗期间药物安全性,统计两组患者随访期间妊娠及成功分娩情况。结果 研究组治疗前后的主证、次证中医证候评分的差值高于对照组(P <0.05)。研究组治疗前后的转化生长因子β1、血管内皮生长因子、胰岛素样生长因子结合蛋白1、miR-423-5p、凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间、D-二聚体的差值高于对照组(P <0.05)。两组不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者妊娠率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。研究组活产率高于对照组(P <0.05)。结论 补肾活血方干预可减轻抗磷脂抗体阳性RSA患者病情,改善血管生成因子、蜕膜化标志因子、凝血功能,抑制miR-423-5p表达也较明显,可提升活产率,且安全性良好。

基于5-甲基胞嘧啶抗体的DNA甲基化电化学检测

目的:构建一种基于5-甲基胞嘧啶(5-mC)抗体的电化学生物传感器,用于DNA多甲基化位点的定量分析。方法:采用纳米金修饰金电极(AuNPs/Au),以自组装方式依次将单链DNA(ssDNA)、巯基己醇(MCH)和靶DNA连接到AuNPs/Au上制备DNA电化学传感器,经过电化学表征检测电极修饰效果;再以5-mC抗体特异性识别靶DNA中的甲基化位点,并以辣根过氧化物酶标记二抗(HRP-IgG)为信号示踪物,优化杂交时间及抗5-mC抗体浓度;采用差分脉冲伏安法(DPV)分别检测非甲基化与不同数量甲基化DNA的电化学信号,同时考察该方法的重复性与稳定性。结果:电化学表征结果表明电极修饰成功,优化实验条件结果显示最优杂交时间为90 min、最佳抗体浓度为10 mg/L,在该条件下DNA电化学传感器能有效区分甲基化与非甲基化DNA,并且DPV峰电流的大小与DNA甲基化位点的数量呈线性关系,具有较好的重复性与稳定性。结论:制备的DNA电化学传感器能对多个位点的DNA甲基化定量检测,有望成为临床DNA甲基化位点定量检测的有效手段。

抗3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶抗体阳性特发性炎性肌病的临床及病理分析

目的本研究旨在检测抗3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMG-CoA reductase,HMGCR)抗体在特发性炎性肌病(idiopathic inflammatory myopathies,IIM)患者中的阳性率,并分析抗体阳性者的临床特点。方法用酶联免疫法检测2012—2022年就诊于中日友好医院的1020例IIM患者的抗HMGCR抗体。回顾分析抗体阳性患者的临床资料、肌肉病理及治疗反应。结果43例(4.2%)携带抗HMGCR抗体,主要以女性为主(65%),25.6%的患者有他汀类药物暴露史,33例(76.7%)渐进性出现肌肉无力,约1/3出现吞咽困难,27.9%出现间质性肺疾病和皮疹。肌酸激酶平均水平(6220.2±4818.9)U/L。80%的患者肌肉MRI可见弥散性炎性渗出。他汀暴露患者与非暴露者平均发病年龄分别为60.6岁、40.3岁(P=0.001)。回顾分析32例患者的肌肉病理,25例(78.1%)表现为明显的肌细胞坏死,伴或不伴少量炎性细胞浸润。随访的35例患者,30例(85.7%)治疗后获得改善。结论抗HMGCR抗体阳性的IIM主要表现为肌无力,大部分患者肌肉病理符合免疫介导坏死性肌病。少数患者与应用他汀类药物有关。大多数对免疫抑制治疗有反应,预后良好。

基于双向门控循环单元的5-甲基胞嘧啶位点预测

5-甲基胞嘧啶(5-methylcytosine,m5C)是一种重要的转录后修饰,大量证据表明,m5C在许多生物学过程中起着至关重要的作用.准确鉴定m5C位点有助于更好地了解其生物学功能.为此提出了一个名为pm5C-BGRU的模型,该模型通过拼接独热编码(One-hot encoding)和核苷酸化学性质(nucleotide chemical property,NCP)进而对RNA序列进行特征提取,并基于双向门控循环单元(Bidirectional Gated Recurrent Unit,BiGRU)来识别m5C位点.将该方法在人类、小鼠和拟南芥三个物种的m5C数据集上进行建模和测试,并对照已有的预测模型进行评估.结果表明,pm5C-BGRU在交叉验证和独立数据集测试中均取得优异效果,该模型有望成为鉴定m5C位点的有力工具.

5-羟甲基胞嘧啶高通量检测在原发性肝癌中的诊断价值

目的探讨5-羟甲基胞嘧啶(5hmc)高通量检测在原发性肝癌中的诊断价值。方法选取2019年7月至2021年7月赣州市第五人民医院健康体检人群50名作为对照组,选取同期本院原发性肝癌患者50例作为观察组,收集两组血液样品进行5-羟甲基胞嘧啶(5hmc)高通量检测,评估两组检测结果对原发性肝癌的诊断价值。结果观察组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期5hmc表达水平均高于对照组,且TNM分期越高5hmc表达越高(P<0.05);有远处转移患者外周血中5hmc表达高于无远处转移患者,差异有统计学意义(P<0.05);肿瘤直径>5 cm患者外周血中5hmc表达高于肿瘤直径≤5 cm患者,差异有统计学意义(P<0.05);5hmc表达随分化程度的加深逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC结果显示,5hmc高通量检测的灵敏度为82.11%,特异度为89.44%,AUC为0.887。结论5hmc与病变程度有一定关系,5hmc高通量检测在原发性肝癌的诊断中具有较高的灵敏度及特异度,具有诊断价值。

大黄素对胰腺癌细胞5-甲基胞嘧啶表达的影响及对抑癌基因ppENK去甲基化的作用

目的 探讨大黄素对胰腺癌细胞Panc1基因组5-甲基胞嘧啶(5 mc)表达的影响及对抑癌基因ppENK启动子区CpG岛的去甲基化作用。方法 CCK8用于检测不同浓度大黄素对Panc1胰腺癌细胞生长的影响,摸索最佳用药浓度;Dot-blot法检测不同浓度大黄素作用下胰腺癌Pancl基因组5 mc和5-羟甲基胞嘧啶(5hmc)的改变;mRNA-Seq检测不同浓度大黄素对基因表达谱的影响,利用甲基特异性PCR(MSP)检测不同浓度大黄素对ppEnK基因甲基化状态的影响。结果 大黄素以浓度梯度和时间梯度依赖性抑制Panc1细胞生长,其半数抑制率(IC_(50))约40μmol/L。Dot-blot结果证实40μmol/L的大黄素可以明显抑制Pancl细胞基因组5mc的表达(P<0.05),但是对5hmc的表达无明显影响。mRNA-Seq表明不同浓度大黄素可使基因表达谱发生差异改变,MSP证实大黄素可使ppENK甲基化状态减弱,非甲基化状态增强。结论 大黄素可以降低胰腺癌细胞Panc1基因组5mc的表达,并对抑癌基因ppENK发挥一定程度的去甲基化作用,抑制胰腺癌细胞生长。

抗黑色素瘤分化相关蛋白-5抗体、抗Ro-52抗体双阳性的皮肌炎临床特征分析

目的探讨抗黑色素瘤分化相关蛋白-5(melanoma differentiation associated protein-5,MDA5)抗体、抗Ro-52抗体双阳性皮肌炎的临床特征及预后情况。方法收集2018年8月~2022年7月空军军医大学第二附属医院唐都医院收治的抗MDA5抗体阳性的47例皮肌炎患者,根据抗Ro-52抗体是否阳性,分为MDA5+Ro-52阳性组(n=23),MDA5+Ro-52阴性组(n=24),回顾性分析其临床资料,比较两组患者的临床特征、实验室指标、快速进展性肺间质病变发生率及病死率的差异。结果两组比较,MDA5+Ro-52阳性组Gotton疹、声音嘶哑发生率高于MDA5+Ro-52阴性组,差异均有统计学意义(P均<0.05);皮肤破溃、甲周红斑、向阳疹、披肩征、发热、关节疼痛、咽痛等发生率比较,差异均无统计学意义(P均>0.05);MDA5+Ro-52阳性组淋巴细胞计数[0.65(0.50,0.81)×10^(9)/L vs 1.18(0.91,1.63)×10^(9)/L,z=-3.821,P=0.001]、血清白蛋白[33.40(29.40,35.67)g/L vs 37.25(32.65,40.27)g/L,z=-3.325,P=0.001]、动脉氧分压[66.60(58.60,86.80)mmHg vs 88.60(75.67,95.72)mmHg,z=-2.373,P=0.018]、血氧饱和度[90.40%(89.00%,95.00%)vs 94.90%(90.50%,97.73%),z=-2.353,P=0.019]低于MDA5+Ro-52阴性组,差异有统计学意义(P<0.05),红细胞沉降率[41.00(30.00,62.50)mm/h vs 28.50(21.50,48.75)mm/h,z=2.161,P=0.031]、血清乳酸脱氢酶水平[426.00(335.50,605.50)U/L vs 260.00(217.50,373.25)U/L,z=3.313,P=0.011]、血清铁蛋白水平[1210.00(465.50,2749.00)μg/L vs 366.00(150.25,629.25)μg/L,z=2.856,P=0.004]、快速进展性肺间质病变发生率(73.91%vs 25.00%,χ^(2)=11.245,P=0.001)及病死率(43.47%vs 8.33%,χ^(2)=7.63,P=0.006)均高于抗MDA5+Ro-52阴性组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论抗MDA5抗体、抗Ro-52抗体双阳性的皮肌炎患者易出现血清乳酸脱氢酶、铁蛋白水平增高,血清白蛋白、外周血淋巴细胞计数减低,且更易合并快速进展性肺间质病变、出现低氧血症,预后差,病死率高,需引起临床医师的重视。

5-甲基水杨酸的免疫原和抗体的制备与应用

通过活性酯与碳二亚胺联合法或混合酸酐法将5-甲基水杨酸与牛血清白蛋白偶联制得偶联比分别为14.6和3.4的免疫原(简称1和2)。用1和2分别免疫雄性新西兰大白兔得到两种多克隆抗体(简称3和4)。用间接竞争ELISA测得3和4的抗体效价分别为1∶256 000与1∶128 000。用3建立了测定5-甲基水杨酸的间接竞争ELISA法。该方法的IC50为149.04 ng·mL-1,最低检测限为4.19 ng·mL-1;3与苯酚、对甲酚和邻氨基四甲基苯酚的交叉反应率均<0.1%。

5-羟甲基糠醛抗氧化性及其抗细胞增殖活性的研究

本文采用ABTS法、DPPH法和红细胞溶血试验来评价5-羟甲基糠醛的抗氧化性,并在溶血试验中,通过环境扫描电镜(ESEM)对血红细胞的形貌进行直观的观察;同时,采用MTT实验考察5-羟甲基糠醛的抗细胞增殖活性。结果表明,当5-羟甲基糠醛浓度为6.4 mM时,5-HMF对ABTS自由基和DPPH自由基的清除率分别为53.98±0.016%和17.80±0.010%,说明5-羟甲基糠醛具有清除ABTS和DPPH自由基的能力;且当5-羟甲基糠醛浓度为12.0 mM时,其对红细胞的溶血抑制率高达89.95±0.001%,说明它可以抑制AAPH诱导的血红细胞氧化损伤,并通过环境扫描电镜(ESEM)观察血红细胞的形貌进一步验证了这一结论。5-羟甲基糠醛能抑制人正常肝细胞L02、皮肤黑色素瘤细胞A375和结肠癌细胞SW480的增殖,其中对A375细胞具有最大的活性,这一结论通过倒置显微镜观察细胞形态变化得到进一步验证。

DNA修饰碱基5-甲基胞嘧啶和8-羟基鸟嘌呤的毛细管气相色谱分析及质谱鉴定

探索了GC/FID定量分析DNA修饰碱基 5 甲基胞嘧啶和 8 羟基鸟嘌呤的实验条件 ,用GC/MS鉴定各有关成分。结果表明 ,DNA水解物中不同成分可被成功地衍生和分离 ;5 甲基胞嘧啶和 8 羟基鸟嘌呤的相对摩尔反应因子分别为 3 0和 1 3;灵敏度分别为 5 50× 1 0 9mV·s/ g和 7 59× 1 0 1 0 mV·s/ g ;检测限可分别达 36 4pg/s和 1 5 8pg/s ;整个分析流程的相对标准偏差小于 2 0 %。

鳜鱼传染性脾肾坏死病毒的胞嘧啶5-甲基转移酶基因结构及其序列分析

对鳜鱼传染性脾肾坏死病毒 (infectiousspleenandkidneynecrosisvirus,ISKNV)的胞嘧啶 5 -甲基转移酶(MTase)基因的结构及序列进行了分析。序列比较分析表明 ,ISKNVMTase编码区全长 6 84bp ,编码长 2 2 7个氨基酸的蛋白质 ,推测分子量为 2 5 85 5D。与一些细菌的MTase比较 ,ISKNVMTase也含有负责转移甲基的 4个保守区 ,但缺乏识别靶序列的保守区。比较ISKNV与其它 6种脊椎动物虹彩病毒的MTase序列并建立系统树 ,ISKNV显著不同于蛙病毒属和淋巴囊肿病毒属。 7种脊椎动物虹彩病毒MTase具有高度保守区 ,可以此设计引物用PCR方法鉴定脊椎动物虹彩病毒。

5-甲基胞嘧啶水解反应机理的理论研究

采用密度泛函理论方法,在B3LYP/6-31G**水平下研究了5-甲基胞嘧啶(m5C)水解反应的微观机理和势能剖面.计算结果表明,5-甲基胞嘧啶的水解反应有两条反应途径:(A)水分子进攻m5C生成中间体IM1,然后氨分子充当桥生成终产物胸腺嘧啶;(B)水分子进攻m5C首先生成四配位的中间体IM2,然后中间体分解成终产物胸腺嘧啶和氨分子.能量计算结果表明,5-甲基胞嘧啶的水解反应决速步的活化能垒较高,在自发状态下,5-甲基胞嘧啶的水解反应难于进行.

5-甲基胞嘧啶-BH_3复合物构型及异构化机理的理论研究

用B3LYP/6-311+G(d)及MP2/6-311+G(d)计算方法,对5-甲基胞嘧啶与BH3所形成复合物及异构化反应进行了研究,获得了6种复合物及4个异构化过渡态.在考虑基组重叠误差校正基础上,得到了结合能及变形能等信息,并用自然键轨道分析法讨论了其相互作用情况.结果表明,BH3与5-甲基胞嘧啶中N(3),O及N(4)相连形成稳定复合物a,b1,b2和c,其结合能分别为104.58,92.25,63.49和43.41kJ·mol-1;复合物a,b1,b2,c和d既可通过BH3与5-甲基胞嘧啶不同部位结合直接生成,也可通过BH3整体迁移实现相互转化;甲基化对复合物稳定性及相互异构化能垒无明显影响.

N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺聚合物-5-氟尿嘧啶接合物的体外释药规律、体内分布及抗肿瘤活性研究

考察本实验室合成的N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺[N-(2-hydroxypropyl)methacrylamide,HPMA]聚合物-5-氟尿嘧啶(5-flurouracil,5-FU)接合物(P-FU)的体外释药、体内分布及抗肿瘤活性。以小鼠血浆为介质,考察P-FU中5-FU的释放规律;以小鼠H22肝癌实体瘤模型(皮下型)为肿瘤模型,考察接合物在荷瘤小鼠体内的分布情况、药代动力学规律及抑瘤活性。结果表明,37℃时P-FU在小鼠血浆中具有一定的稳定性,半衰期(t1/2)为32.4 h。与5-FU相比,P-FU在荷瘤小鼠体内的循环时间明显延长(血浆中t1/2为原药的166倍),在肿瘤中的沉积量(AUC为5-FU的3.3倍)及滞留时间(t1/2为5-FU的2.3倍)均有明显增加。体内药效学研究表明,P-FU组对荷瘤小鼠的肿瘤生长抑制率(69.09%)显著高于5-FU组(56.49%,P<0.05),瘤块组织病理学观察结果也显示P-FU组小鼠肿瘤组织中细胞凋亡程度大于5-FU组。HPMA聚合物可被用于为5-FU构建一种新型实体瘤高分子给药系统。

低聚蔗果糖及其5-羟甲基糠醛抗氧化能力研究

目的:研究微波辅助合成低聚蔗果糖(W-FOS)及其在合成过程中产生的5-HMF(5-hydroxymethylfurfural)抗氧化能力。方法:测定W-FOS及5-HMF清除DPPH、ABTS+能力;清洁级昆明小鼠60只,随机分6组:对照组、高脂组(脂肪含量20%)、高脂+0.5%E-FOS(酶法合成低聚果糖)组、高脂+0.5%W-FOS+5-HMF组(5-HMF含量分别为0.20%、0.02%、0.0%)。饲喂5w后测定机体抗氧化指标水平。结果:W-FOS具有清除DPPH、ABTS+能力,且5-HMF能提高其清除力;E-FOS、W-FOS+5-HMF组能使高脂日粮小鼠血脂水平得到显著恢复(P<0.05);W-FOS+5-HMF组能使高脂日粮小鼠血脂水平显著降低(P<0.05);添加含中低、高水平5-HMF的W-FOS分别能显著恢复高脂日粮小鼠血浆T-AOC、CAT、MDA、ROS和CAT、ROS水平;含中低水平5-HMF的W-FOS对高脂日粮小鼠肝脏GSH-Px、MDA、ROS的保护作用优于高水平5-HMF的W-FOS。结论:W-FOS和5-HMF都具有清除DPPH、ABTS+的能力;0.5%W-FOS及其5-HMF水平为0.00%～0.02%时,对高脂日粮小鼠的血脂水平、血浆、肝脏的抗氧化能力均具有良好的保护作用。

积累5-甲基四氢叶酸双抗突变株的选育及条件优化

目的选育积累5-甲基四氢叶酸(5-MTHF)的双重药物抗性高产突变株,探讨发酵时间和温度对叶酸积累形式的影响。方法紫外线和EMS联合诱变;磺胺、甲氨蝶呤药物培养基筛选菌株;单因素实验检测发酵条件对叶酸积累形式的影响;HPLC检测叶酸含量和存在形式。结果获得稳定性良好的抗性突变株,其叶酸产量是原始菌株的2.2倍。适合5-MTHF积累的发酵时间为16 h,积累量为68.94μg/g干菌。结论抗性突变株能提高菌株产叶酸能力,5-MTHF含量受发酵时间影响大,而发酵温度对产物形式和产量影响不显著。

2-甲基-5-(E)-(邻甲氧基苯亚甲基)环戊酮Mannich碱类化合物的合成及其抗炎活性

目的设计合成 2 甲基 5 (E) (邻甲氧基苯亚甲基 )环戊酮曼尼希碱类化合物 ,并对其抗炎活性进行初步评价。方法以N 环戊烯基吗啉、邻甲氧基苯甲醛及多种胺类为原料 ,经多步反应合成目标化合物 ,并以二甲苯致小鼠耳肿胀模型测试目标化合物的抗炎活性。结果共合成 8个新化合物 ,经IR ,1H NMR和MS确证其结构。其中两个化合物的抗炎活性与阿司匹林相当。结论羰基α位被烷基取代的环戊酮曼尼希碱仍具有较强的抗炎作用。

5-羟甲基胞嘧啶及其TET氧合酶在神经系统发育和相关疾病中的研究进展

神经系统的正常发育是多种因素相互协调作用的结果,一旦特定因素失衡将引起相关疾病的发生。近年来不断有研究发现,DNA去甲基化过程的一类中间产物5-羟甲基胞嘧啶(5-hydroxymethylcytosine,5hm C)作为一种新的表观遗传标记,在神经系统中高水平分布,并参与认知、记忆等重要的神经功能。5hm C的形成由氧合酶家族分子(ten-eleven translocation protein,TET)催化,在多种神经系统相关疾病中,5hm C水平和TETs分子的表达都发生改变,提示TET-5hm C表观遗传机制在复杂的神经系统发生发展过程中发挥了重要的调控作用。此外,作为基因表达调控的DNA标记物,5hm C的基因定位与基因表达水平的关系也是重要的研究方向。本文就近年来5hm C和TET家族蛋白分子在神经系统发育和相关疾病方面的重要研究发现进行了综述总结,希望为相关领域研究人员深入开展研究提供重要的思路,并为相关疾病设计治疗策略提供理论支持。