B亚型患者血清不规则抗B抗体的检测分析

目的分析B亚型(Bw)患者血清中存在IgM型不规则抗B抗体的血型血清学检测结果及其临床意义。方法对ABO血型正反定型不一致或交叉配血不相合的患者血标本,采用抗A、抗B、抗AB、抗H定型试剂和不同试验方法进行正反定型,采用吸收放散试验、直接抗人球蛋白试验及ABO血型以外不规则抗体筛查进行检测鉴定。对需要输血的B亚型及血清中存在不规则抗B抗体的患者,选择O型悬浮红细胞或洗涤红细胞进行配合性输血治疗。结果15例患者红细胞与抗B定型试剂在22℃立即离心,凝集强度弱于1+(1+^(w)),置4℃反应15min,离心2次,凝集强度强于1+(1+^(s))~2+(2+^(s))。患者红细胞与抗AB定型试剂的凝集强度大于抗B定型试剂,与抗H定型试剂的凝集强度小于O型红细胞。在试管法反定型中,患者血清与B型试剂红细胞混合,在22℃立即离心,凝集强度为1+^(w)~1+^(s);置4℃反应15min,离心2次,凝集强度为1+^(s)~2+。结果显示患者血清中存在凝集强度为1+~2+的IgM型不规则抗B抗体。结论B亚型患者B抗原性表达很弱或血清中存在IgM型不规则抗B抗体,在22℃以下进行检测可引起ABO血型正反定型不一致或交叉配血不相合,B亚型不配合的输血可产生不规则抗B抗体或引起溶血性输血反应。

抗B血型物质单克隆抗体的研制及其免疫学特性的研究

应用杂交瘤技术,分别以人B血型红细胞,B血型红细胞加纯化的B血型物质和B血型物质为抗原,采用不同免疫程序免疫BALB/C小鼠,从6次细胞融合中筛选建立起3株分泌高滴度,高特异性抗人B血型物质单克隆抗体的杂交瘤细胞株:3—3—D_9(IgG_1),3—5—D_(12)(IgG_1)和6—1—G_(11)(IgA),用Takatsy微量血凝滴定法测得它们的96孔板组织培养上清液的血凝滴度分别为4096,4096和16384。经过凝血特异性试验,凝血抑制试验以及抗体稀释试验等广泛免疫化学研究证明这些单克隆抗体仅对人B型血特异。杂交瘤细胞在液氮中贮存数月,分泌抗体能力不变。抗体经56℃保温30minA-20℃和37℃反复冻融试验凝血活性保持稳定。这些单克隆抗体为进一步研究B血型抗体结合部位结构的多样性提供了条件,并且使在临床血液分型试验时用单克隆抗体替代人多克隆抗血清成为可能。

海南文昌清澜港红树林真菌抗B16肿瘤细胞活性菌株的筛选

从海南文昌清澜港红树林采集78份植物组织和土壤样品。对样品进行真菌分离,共分离得到真菌608株,采用目测法对其体外抗肿瘤细胞活性进行检测,发现81株红树林真菌对小鼠黑色素瘤B16细胞有不同程度的抑制作用,占总分离菌株的13.32%。结果表明,从红树植物杯萼海桑中分离得到真菌菌株的数量最多,而从红树植物银叶树分离得到的抗肿瘤细胞活性菌株数量最多。

抗bcr/abl mRNA特异性核酶作用于靶基因的细胞内外切割实验

目的 将已构建的具有抗慢性粒细胞性白血病(CML)融合基因bcr/abl mRNA的含核酶载体,进行细胞内外实验,了解抗bcr/abl mRNA核酶的切割效应。方法 含有抗靶基因的真核表达载体pAVGS4经酶切后,其中抗CML核酶M1-GS RNA的DNA序列被构建到pUC19上得到pGS210,并经酶切和测序鉴定;合成bcr/abl融合位点前后的一段靶序列,克隆到pGEM-7zf(+)上得到p bcr-abl经测序鉴定,将pGS210和p bcr-abl进行体外转录,获得 M1-GS RNA及其作用底物,将两者混合、孵育,通过放射自显影术检测切割的效果;将pAVGS4转染到CML细胞株K652细胞内,通过RT-PCR方法了解核酶对于目标 RNA的作用效应。结果 p bcr-abl经酶切电泳及测序证实载体中含有目标序列,Ml-GS RNA作用于底物后,放射自显影术检测显示底物 RNA被有效切割。pAVGS4转染到K562细胞48和72h后,RT-PCR显示bcr/abl mRNA被有效切割。结论 pAVGS4可以有效地切割K562细胞内的bcr/abl mRNA,预期可作为CML分子靶向治疗的工具。

抗A和抗B血型定型试剂稳定性观察及对亚型检测的影响

目的检测国产单克隆抗A(B)试剂质量,观察对ABO亚型检测的影响。方法测定四个厂家"单抗A、抗B"试剂效价、亲和力等,并检测稀有的ABO亚型红细胞与单克隆试剂反应情况,同时用人源抗A、抗B试剂作对照。结果所有厂商的试剂均符合国家标准,单克隆抗体仍有漏检ABO亚型现象。结论目前市场销售的单克隆抗A、抗B血型定型试剂,质量基本可靠,但应定期测定其效价、亲和力,受检者ABO血型检测必须用ABO反定型试验复核。

抗Bt棉棉铃虫幼虫Bt受体氨肽酶N(APN2)基因克隆

通过对Bt棉抗性和敏感棉铃虫幼虫中肠氨肽酶N的克隆和测序 ,鉴定了氨肽酶N基因家族的 1个成员Haapn2 ,其cDNA序列具有 32 0 9个核苷酸 ,含有 30 96bp的开放阅读框 ,编码产生1 0 32个氨基酸的蛋白质。其推定氨基酸序列具有锌结合模体HEXXHX18E ,N 末端具有 1 7个氨基酸的疏水性信号序列 ,C 末端还具有 2 2个氨基酸的糖基磷酯酰肌醇 (GPI)添加信号肽。比对抗性和敏感棉铃虫cDNA的开放阅读框 ,抗性品系的开放阅读框中 ,有 5 7个点突变 ,共导致了 1 5个氨基酸的改变 ,其中 2个突变 (谷氨酰胺13 7→谷氨酸、缬氨酸173 →苏氨酸 )位于Cry1A毒素结合区域 ,可能与棉铃虫对转Bt基因棉产生抗性有关。报道的氨肽酶cDNA序列已提交GenBank ,AY346383和AY2 795 35分别是Bt抗性和敏感品系的Haapn2。

HLA抗体与IgG型抗A、抗B共存对胎儿的影响

目的：了解HLA抗体与IgG型抗A、抗B共存对胎儿的影响。方法：应用国际标准微量淋巴细胞毒试验检测HLA抗体；间接抗人球蛋白试验检测IgG型抗A、抗B。结果：母儿ABO血型不相台32例，母亲皆为O型，其中16例母亲血清IsG抗A效价为1：64—1：256，HLA抗体效价为1：4，胎儿全部存活；12例母亲血清IgG抗B效价1：64—1：128，HLA抗体效价为1：2，其中2例死胎，其余10例胎儿存活；4例母亲血清IgG型抗A、抗B效价为1：64，HLA抗体效价为1：2，1例死胎，3例胎儿存活。结论：HLA抗体与IgG型抗A、抗B共存未加重对胎儿的损害。

抗B7-H3单克隆抗体抑制雨蛙肽诱导的小鼠急性胰腺炎炎症反应和组织损伤

目的探究抗B7-H3单克隆抗体(m Ab)在雨蛙肽诱导的急性胰腺炎(AP)中的作用。方法将小鼠随机分为对照组、AP组、抗B7-H3 m Ab治疗组。采用腹腔注射雨蛙肽的方法制备小鼠AP模型,治疗组于造模前1 h皮下注射抗B7-H3 m Ab,于造模后6、12、24 h,收集各组小鼠血液、胰腺及肺组织。采用Western blot法和免疫组织化学染色检测对照组及AP组小鼠胰腺组织B7-H3蛋白表达。应用全自动生化免疫分析仪检测各组小鼠血清淀粉酶及脂肪酶活性;胰腺组织湿干比评估各组小鼠胰腺组织水肿变化;HE染色评估各组小鼠胰腺及肺组织病理变化,利用ELISA检测各组小鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-1β水平。结果 B7-H3蛋白在AP模型小鼠胰腺组织高表达,且在12 h左右达到高峰;AP组血清淀粉酶及脂肪酶明显高于对照组,抗B7-H3 m Ab处理后明显降低;AP组胰腺及肺组织出现明显炎症反应,治疗组炎症反应明显减弱,胰腺组织湿干比大幅降低;AP组TNF-α、IL-6、IL-1β水平随时间延长而升高,12 h达到高峰后开始下降,而治疗组促炎因子水平相对降低。结论 B7-H3在雨蛙肽诱导的AP模型中存在高表达,抗B7-H3 m Ab可以减弱炎症反应,缓解胰腺及肺组织的损伤。

血清药理学方法研究蛇葡萄素抗B16黑色素瘤的作用

目的:研究蛇葡萄素对黑色素瘤的抑制作用。方法:以血清药理学方法考察不同剂量的蛇葡萄素含药血清对B16黑色素瘤细胞的抑制作用,分别用MTT法及流式细胞术进行评价。结果:0.420mmol/kg、0.560mmol/kg剂量组的C57BL/6小鼠含药血清能有效抑制黑色素瘤B16细胞,与空白血清中加入浓度相当的蛇葡萄素的抑制率相同;两个剂量组的含药血清使肿瘤细胞的分裂增殖指数分别降低了19.1％、21.7％。结论:蛇葡萄素在血药浓度达峰期对小鼠黑色素瘤B16细胞的抑制可能以原型物形式起作用,抑制细胞的DNA合成。

新型凝血酶原复合物中抗A、抗B凝集素效价的分析

新型凝血酶原复合物中抗Ａ、抗Ｂ凝集素效价的分析６１００８１中国医学科学院中国协和医科大学输血研究所余蓉宋宁赵青蓉凝血酶复合物制品（ＰＣＣ）在临床上广泛用于治疗乙型血友病和由肝脏疾患而继发的依赖维生素Ｋ凝血因子（ＦⅡ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ等）的缺乏症，国外对ＰＣ...

抗A抗B血型定型试剂(单克隆抗体)国家参考品的建立

ABO血型系统是人类第一个血型系统,也是人类血型系统中抗原免疫性最强的[1]。至今人们已发现红细胞上有36个血型系统,300多种血型抗原。ABO血型系统是临床输血和器官移植中最重要的血型系统,对献血者和受血者ABO血型的预先确认是输血工作中最为重要的实验,错误的ABO血型定型将导致严重的输血反应[2-3]。

凝聚胺技术在IgG类抗A、抗B效价测定中的应用

目的应用凝聚胺技术测定孕妇、新生儿血清(浆)中的IgG类抗A、抗B效价,以预防或诊断ABO血型不合引起的新生儿溶血病。方法同时应用凝聚胺法和间接抗人球蛋白法(以下简称抗人球蛋白法)对46份申请IgG类抗A和(或)抗B效价测定的标本进行检测,结果用统计学方法处理。结果两法测得的IgG类抗A、抗B效价差异有统计学意义(P<0.01),凝聚胺法测得IgG类抗A、抗B效价低于抗人球蛋白法0～2个滴度水平,平均1个滴度水平。结论凝聚胺法可以常规用作IgG类抗A、抗B效价测定的过筛试验,仅当IgG类抗A、抗B效价≥16时需加做抗人球蛋白试验。

抗CD3/抗B细胞肿瘤的双功能小抗体的抗肿瘤活性研究

为评价已研制的抗CD3/抗B细胞肿瘤 (CD2 0 + )双功能小抗体的生物学活性 ,采用多种实验方法在体内外对其进行研究。结果表明 :该型双功能小抗体能同时与Ju rkat和Daudi细胞结合 ,并交联两种细胞形成玫瑰花环。它与Jurkat(CD3+ )和Daudi细胞 (CD2 0 + )的结合的亲和常数Ka分别为 3.2× 10 8M- 1和 8.9× 10 8M- 1。在体外该抗体能激活并介导T细胞杀伤Daudi细胞。裸鼠体内分布实验结果表明 :该型抗体可在移植瘤部位富集 ;在人B淋巴瘤裸鼠移植瘤腹腔模型中 ,联合人的PBMC和IL 2 ,该抗体可以杀灭人B淋巴瘤细胞 ,明显延长荷瘤裸鼠的生存时间。