抗B7-H3单克隆抗体抑制雨蛙肽诱导的小鼠急性胰腺炎炎症反应和组织损伤

目的探究抗B7-H3单克隆抗体(m Ab)在雨蛙肽诱导的急性胰腺炎(AP)中的作用。方法将小鼠随机分为对照组、AP组、抗B7-H3 m Ab治疗组。采用腹腔注射雨蛙肽的方法制备小鼠AP模型,治疗组于造模前1 h皮下注射抗B7-H3 m Ab,于造模后6、12、24 h,收集各组小鼠血液、胰腺及肺组织。采用Western blot法和免疫组织化学染色检测对照组及AP组小鼠胰腺组织B7-H3蛋白表达。应用全自动生化免疫分析仪检测各组小鼠血清淀粉酶及脂肪酶活性;胰腺组织湿干比评估各组小鼠胰腺组织水肿变化;HE染色评估各组小鼠胰腺及肺组织病理变化,利用ELISA检测各组小鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-1β水平。结果 B7-H3蛋白在AP模型小鼠胰腺组织高表达,且在12 h左右达到高峰;AP组血清淀粉酶及脂肪酶明显高于对照组,抗B7-H3 m Ab处理后明显降低;AP组胰腺及肺组织出现明显炎症反应,治疗组炎症反应明显减弱,胰腺组织湿干比大幅降低;AP组TNF-α、IL-6、IL-1β水平随时间延长而升高,12 h达到高峰后开始下降,而治疗组促炎因子水平相对降低。结论 B7-H3在雨蛙肽诱导的AP模型中存在高表达,抗B7-H3 m Ab可以减弱炎症反应,缓解胰腺及肺组织的损伤。

抗B7-H3单克隆抗体对中性粒细胞哮喘小鼠模型的作用研究

目的 探讨阻断型抗小鼠B7-H3单克隆抗体对中性粒细胞哮喘（neutrophilic asthma, NA）小鼠模型的干预作用.方法 BALB/c雌性小鼠24只,随机分成4组,分别为磷酸缓冲盐溶液（PBS）对照组（A组）、中性粒细胞哮喘组（B组）、抗B7-H3单克隆抗体干预组（C组）、同型对照IgG组（D组）.B、C、D组均给予OVA联合LPS致敏,OVA雾化激发,A组给予同等剂量的PBS注射和激发,C组和D组在诱导期分别注射50 μg抗B7-H3单克隆抗体和同型对照IgG.观察各组小鼠雾化时的症状;收集支气管肺泡灌洗液（BALF）和肺组织;显微镜下进行BALF细胞总数及分类计数;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠BALF上清中IFN-γ、IL-4、IL-6、IL-17、TNF-α、G-CSF细胞因子的水平;小鼠肺组织病理切片HE染色观察肺组织病理改变;PAS染色观察气道黏液的分泌;同时肺组织免疫组化法检测B7-H3表达水平.结果 （1）B组和D组小鼠雾化激发后出现呼吸急促、烦躁不安、频繁搔抓头面部等表现,C组喘息症状较B组有所缓解,A组活动自如.（2）B组、C组、D组BALF细胞总数、中性粒细胞百分比及嗜酸性粒细胞百分比较A组均明显升高（P均〈0.05）;C组BALF细胞总数、中性粒细胞百分比和嗜酸性粒细胞百分比较B组、D组降低（P均〈0.05）;B组与D组比较无显著差异.（3）B组、C组、D组BALF中IFN-γ、IL-4、IL-6、IL-17、TNF-α、G-CSF水平较A组均显著性上升,其中B组、D组IL-6、TNF-α、IL-17和G-CSF水平比C组明显增高（P均〈0.05）;IL-4水平B组和D组低于C组（P均〈0.05）.（4）A组肺组织病理染色示无明显炎症细胞及黏液分泌;B组和D组炎症细胞、中性粒细胞浸润和黏液分泌较A组明显增多,C组较B组、D组有所减轻.（5）肺组织免疫组化显示A组几乎无表达B7-H3阳性细胞,B组和D组B7-H3阳性细胞数明显增多,C组较B组、D组阳性细胞数明显减少（P〈0.05）.结论 阻断型抗小鼠B7-H3单克隆抗体通过早期阻断B7-H3表达能够减轻NA小鼠喘息症状,减少肺组织炎症细胞浸润和黏液的分泌,下调Th17相关细胞因子分泌,从而减轻NA小鼠肺组织炎症损伤、全身炎症反应,部分阻断NA免疫致病机制的发生发展.