梅花鹿α干扰素基因在MDBK细胞中表达及抗BVDV活性检测

采用基因工程技术克隆出梅花鹿α干扰素(IFN-α)成熟肽基因序列,并将其定向插入到真核表达载体pcDNA3.0(+),经酶切、PCR及测序鉴定,成功构建了pcDNA3.0-IFN-α真核重组表达质粒。将鉴定正确的阳性重组质粒经非脂质体法转染至MDBK细胞,间接免疫荧光试验检测其具有较高转染效率;Western blot法检测IFN-α蛋白在MDBK细胞中得到有效表达;病变抑制试验检测转染后的MDBK细胞具有明显抗BVDV活性;抗BVDV活性的定量试验表明转染pcDNA3.0-IFN-α质粒的MDBK细胞与感染未转染的MDBK细胞相比抗BVDV活力提高了66192倍。本试验在MDBK细胞中成功表达了梅花鹿IFN-α,并检测出其具有明显抗BVDV作用,这为梅花鹿IFN-α活性机理研究以及开发更高效的抗梅花鹿病毒性疾病干扰素制剂提供物质和理论基础。

“一锅”三组分合成新型1,5-苯并二氮杂䓬类化合物与抗牛病毒性腹泻病毒(BVDV)活性

以特氨酸、邻苯二胺和芳香醛为原料,乙醇为溶剂,对甲苯磺酸为催化剂,多组分一锅法构建了一系列含有吡咯烷酮的1,5-苯并二氮杂䓬类化合物.该方法反应条件温和,操作简单,产物收率高.探索了抗牛病毒性腹泻病毒(BVDV)病毒活性,结果显示合成的苯二氮䓬类衍生物具有显著的抗BVDV活性,EC_(50)值好,且无明显的细胞毒性,为抗BVDV制剂的研究提供了有意义的参考物.

吗啉核苷类似物及其磺胺衍生物的合成及初步抗牛病毒性腹泻病毒(BVDV)活性研究

以核糖核苷为原料,通过糖环的结构转化合成了系列吗啉核苷类似物,再与磺胺类药物的母核偶联得到吗啉核苷磺胺衍生物.所得化合物均经HRMS、^(1)H NMR和^(13)C NMR谱分析确证.以牛病毒性腹泻病毒(BVDV)感染的牛肾细胞为模型对目标化合物抗病毒活性进行筛选,结果显示此类化合物无明显抗病毒活性.