25份抗BmNPV家蚕育种素材对人工饲料育的适应性

为选育出对人工饲料育适应性优良的抗BmNPV家蚕品种,对云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所保存的25份抗BmNPV家蚕育种素材进行了人工饲料育适应性研究,调查分析了这些家蚕育种素材24 h疏毛率、2眠蚕体质量及3龄蚕存活率。结果表明:供试的25份家蚕育种素材中,24 h疏毛率在90.10%~100%之间的有18份,在80.10%~90.00%之间的有5份;人工饲料育2眠蚕体质量多数低于桑叶育,但是其中有5份高于桑叶育,明8C高出桑叶育43.08%;3龄蚕存活率在90.10%~100%之间的有6份,在80.10%~90.00%之间的有13份,在60.10%~80.00%之间的有6份;24 h疏毛率在80.00%以上且与3龄蚕存活率差距在10个百分点以内的有11份,对该11份家蚕育种素材的24 h疏毛率和3龄蚕存活率相关性分析结果表明,它们的相关系数为0.634,呈显著相关。通过本试验,筛选出24 h疏毛率高和3龄蚕存活率高的家蚕育种素材,为选育出对人工饲料育具有良好适应性的抗BmNPV家蚕新品种打下基础。

适于省力化饲养的抗BmNPV蚕品种选育研究

针对浙江省农村粗放养蚕及血液型脓病为害较为严重的现状,引进抗BmNPV蚕品种资源,以优良实用品种与抗病品种杂交后自交、回交及利用抗病品种组配四元杂交组合等不同途径,开展适于省力化饲养的抗BmNPV蚕品种选育研究。经两年半研究,自交、回交途径各抗病育种材料主要经济性状表现优良,正通过检测实现抗病基因的纯合固定。同时确定一对组合综合经济性状表现优良,对BmNPV抵抗性比对照种显著提高,已提请参加省实验室鉴定。

家蚕抗菌肽CD高效表达及其抗BmNPV感染作用

通过大肠杆菌JM109诱导家蚕,提取其脂肪体总mRNA后,通过RT-PCR得到cDNA,根据GenBank上家蚕抗菌肽CecropinD的cDNA序列,设计并合成引物,然后PCR扩增得到CecropinD肽基因并克隆到pGEM-T载体中,经过EcoRΙ和XhoI酶切,连接并将CecropinD肽基因插入pET32a表达载体中。用重组质粒pET32a-ecropinD转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下,融合蛋白Trx-CecropinD以可溶形式得到高效表达,经SDS-PAGE检测显示分子量为23kDa与预期大小相符,表达量约为总蛋白的30%。融合蛋白经Ni2+柱纯化后通过肠激酶切割后释放为Trx(18kDa)和CecropinD(5kDa),最后通过超滤管分离得到重组抗菌肽。通过抑菌实验测得重组CecropinD对于革兰氏阴性及阳性菌均有抑菌活性。并将重组CecropinD与家蚕病毒BmNPV作用混合4h后,一起投喂家蚕,发现病毒感染力有明显降低,说明其有抗病毒感染作用。

抗BmNPV家蚕新品种粤蚕11号的育成

【目的】选育适于广东蚕区饲养的抗BmNPV家蚕新品种,为BmNPV病易发季节提供稳产性能好的家蚕品种。【方法】通过累代病原胁迫、航空诱变的方法创制抗性家蚕种质,再采用杂交与系统选育的方法,分别育成中系品种和日系品种,在此基础上进行中·中×日·日四元杂交组合的组配,以广东省现行家蚕品种两广二号为对照,进行实验室品比、抗BmNPV能力检测和连续2年的实验室共同鉴定、农村生产鉴定。【结果】育成中系家蚕品种芙抗、春5N和日系家蚕品种航7、7532N,并组配获得四元杂交组合芙抗·春5N×航7·7532N,命名为粤蚕11号。该品种对BmNPV的抗性极显著高于对照,在实验室共同鉴定试验中的综合表现为:龄期经过与对照品种两广二号相当,生命力强,虫蛹率97.58%,全茧量1.712 g,茧层量0.369 g,茧层率21.55%,万蚕收茧量16.874 kg、万蚕茧层量3.636 kg,一粒茧丝长942 m、解舒率80.15%,茧丝纤度2.568 dtex、净度93.5分。【结论】粤蚕11号发育、眠起齐一,对BmNPV具较强抗性,产量高,茧丝质优良,是一个易繁易养、综合性状优良的家蚕新品种,于2019年10月通过广东省农作物新品种鉴定,适宜在广东蚕区全年饲养。

粘质沙雷氏菌对抗BmNPV家蚕品种皖·丰×润康的致病力测定

为了解细菌对抗核型多角体病毒(BmNPV)家蚕品种皖·丰×润康的致病力,以秋丰×白玉为对照家蚕品种,粘质沙雷氏菌为试验菌,设置1×10^(7)、1×10^(6)、1×10^(5) cfu/mL等3个浓度梯度的粘质沙雷氏菌悬液采用体壁穿刺法接种5龄起蚕,以接种无菌水的幼虫为对照。接种后正常桑叶饲养,1 h观察1次发病情况,连续观察24 h,调查半数致死时间(LT_(50)),以此衡量粘质沙雷氏菌对皖·丰×润康和秋丰×白玉的致病力。结果表明,粘质沙雷氏菌对皖·丰×润康和秋丰×白玉均具有较强的致病力,浓度越高致病力越强。粘质沙雷氏菌3个浓度梯度菌液对皖·丰×润康正反交的LT_(50)在14.4 h和16.9 h之间,对秋丰×白玉的LT_(50)在15.7 h和17.0 h之间,皖·丰×润康在相同粘质沙雷氏菌浓度下的LT_(50)均略短于秋丰×白玉,表明粘质沙雷氏菌对皖·丰×润康的致病力略大于秋丰×白玉。该研究结果为合理饲养抗BmNPV家蚕品种提供了科学依据。

家蚕Tret1-X1基因对家蚕核型多角体病毒(BmNPV)的基因表达和基因组复制的影响

家蚕促海藻糖转运蛋白1异构体X1(Bombyx mori facilitated trehalose transporter Tret1-like isoform X1,BmTret1-X1)主要参与家蚕糖代谢过程。为探究其在家蚕抗BmNPV感染过程中的作用,克隆BmNPV抗性家蚕品系AN与易感品系C108的BmTret1-X1基因,发现基因编码区存在4个SNP导致的氨基酸改变,两者的预测蛋白质结构存在差异。利用pIZT/V5-His-mCherry表达载体在BmN细胞中过表达BmTret1-X1,BmNPV感染后24 h、48 h的BmNPV增殖受到抑制,BmNPV基因lef-3、vp39、p10和gp64的转录水平低于对照组(P<0.05),其中感染后24 h vp39基因的表达量与对照组相比差异达1 089倍,细胞中病毒基因组DNA复制也受到明显抑制。转染BmTret1-X1基因siRNA使BmN细胞中该基因表达量降低约一半,BmNPV的lef-3、vp39、p10和gp64转录水平升高,但BmNPV增殖和基因组DNA复制水平未见明显变化。综上所述,BmN细胞中BmTret1-X1基因的高表达对BmNPV的基因表达、DNA复制及病毒增殖具有抑制作用,该基因在家蚕对BmNPV的抗性形成过程中具有一定作用。

家蚕新品种“桂蚕11号”的育成

桂蚕11号是广西壮族自治区蚕业技术推广站育成的春秋用抗血液型脓病(BmNPV)天然黄色茧桑蚕品种。2018—2019年广西省级实验室鉴定结果显示,该品种结茧率为96.64%,比对照“两广二号”高2.54个百分点;虫蛹生命率94.02%,比对照高3.85个百分点;万头产茧量14.539 kg,比对照高8.40%;万头茧层量为3.058 kg,比对照高11.20%;茧层率为21.02%,比对照高0.50个百分点;一茧丝长957 m,比对照长43 m;鲜茧出丝率16.33%,比对照高0.50个百分点;解舒率72.2%,净度94.0分,抗BmNPV能力比两广二号高1000倍以上;农村生产鉴定:张种产茧量38.31 kg,比对照提高1.88 kg,增产5.16%;健蛹率达97.44%。

家蚕品种“明丰×春玉”改良系农村饲养初报

家蚕品种"明丰×春玉"抗Bm NPV改良系在农村试养中,表现出蔟中不利气候条件下结茧率偏低的现象。针对存在的问题,对品种特性进行进一步改良。改良品种的农村试养对比结果表明,改良系抗病毒病性状优良,各项经济性状优于对照品种。