临床前类风湿关节炎人群肠道菌群对造血和免疫系统影响的研究

目的:探讨临床前类风湿关节炎人群(抗CCP抗体阳性健康人群)肠道菌群对小鼠肠道屏障、黏膜免疫及造血和免疫系统影响。方法:提取抗CCP抗体阳性健康人群(Pre-RA)、RA和抗CCP抗体阴性健康人群的粪便菌液,分别用以上三组人群的菌液灌胃小鼠,通过FITC-conjugated dextran在血清中的荧光强度检测肠道通透性,HE染色观察小鼠小肠中炎症浸润及通透性改变情况;采用流式细胞术分别检测骨髓造血干细胞、前体细胞及中性粒细胞在骨髓及外周血中的比例;小鼠脾脏、骨髓、派氏淋巴结、肠系膜淋巴结、腹股沟淋巴结的B淋巴细胞表达情况;检测肠内容物中SIgA包裹细菌的比例。结果:①与移植健康人群菌液组比较,移植Pre-RA和RA人群菌液能显著增加小鼠肠道通透性。②移植Pre-RA和RA人群菌液可导致小鼠小肠结构发生变化,小肠发育不良,绒毛粗短稀疏。③与移植健康人群菌液组比较,移植Pre-RA和RA人群菌液组小鼠肠内容物中SIgA包裹细菌阳性表达明显增加。④与健康对照组相比,移植Pre-RA和RA人群菌液组小鼠髓系祖细胞(CMP)和小鼠骨髓中粒单核细胞系祖细胞(GMP)在骨髓中的比例均增加,移植RA人群菌液组差异具有统计学意义;移植RA人群菌液组小鼠外周血中性粒细胞比例明显增加。⑤与健康对照组相比,移植Pre-RA和RA人群菌液组小鼠脾脏中B淋巴细胞表达明显增加,Pre-RA和RA组小鼠派氏淋巴结部位B淋巴细胞表达增加。结论:肠道菌群紊乱可出现于RA临床症状之前,且Pre-RA人群的肠道菌群可通过破坏小鼠肠道黏膜屏障,引起肠道通透性增加,菌群穿透黏膜移位,造成机体局部肠黏膜免疫反应以及全身免疫系统失衡。