抗CD3/抗B细胞肿瘤的双功能小抗体的抗肿瘤活性研究

为评价已研制的抗CD3/抗B细胞肿瘤 (CD2 0 + )双功能小抗体的生物学活性 ,采用多种实验方法在体内外对其进行研究。结果表明 :该型双功能小抗体能同时与Ju rkat和Daudi细胞结合 ,并交联两种细胞形成玫瑰花环。它与Jurkat(CD3+ )和Daudi细胞 (CD2 0 + )的结合的亲和常数Ka分别为 3.2× 10 8M- 1和 8.9× 10 8M- 1。在体外该抗体能激活并介导T细胞杀伤Daudi细胞。裸鼠体内分布实验结果表明 :该型抗体可在移植瘤部位富集 ;在人B淋巴瘤裸鼠移植瘤腹腔模型中 ,联合人的PBMC和IL 2 ,该抗体可以杀灭人B淋巴瘤细胞 ,明显延长荷瘤裸鼠的生存时间。

癸酸能够活化CD8^(+)T细胞并提高其抗肿瘤免疫反应能力

目的:探究中链脂肪酸癸酸对CD8^(+)T细胞活化的影响,及其对CD8^(+)T细胞介导的抗肿瘤免疫反应的作用和机制。方法:建立C57BL/6小鼠黑色素瘤B16F10皮下荷瘤模型,随机分为癸酸组(10 mg/kg癸酸灌胃)和对照组(等量溶剂灌胃),观察癸酸对小鼠肿瘤生长以及生存率的影响,采用流式细胞术检测肿瘤微环境中浸润CD8^(+)T细胞的活化水平。建立B16F10-OVA和OT-I T细胞共培养体系,采用流式细胞术检测癸酸对CD8^(+)T细胞的肿瘤细胞杀伤能力的影响。采用α-CD8抗体清除B16F10荷瘤小鼠体内CD8^(+)T细胞,观察对小鼠肿瘤体积的影响。小鼠原代CD8^(+)T细胞经癸酸处理后,采用WB、ELISA及qPCR、流式细胞术检测T细胞受体(TCR)活化、效应细胞因子产生以及增殖和代谢水平。在B16F10荷瘤小鼠模型中,观察α-PD-1抗体联合癸酸给药对小鼠肿瘤生长以及生存率的影响。结果:在小鼠黑色素瘤荷瘤模型中,与对照组相比,癸酸组小鼠移植瘤体积显著降低且生存率显著提高(均P<0.05),肿瘤浸润CD8^(+)T细胞IFN-γ和TNF-α的表达水平显著升高(P<0.01)。经癸酸处理的OT-I T细胞对B16F10-OVA细胞的杀伤水平显著升高(P<0.01)。在荷瘤小鼠模型中用α-CD8抗体清除CD8^(+)T细胞后,癸酸对移植瘤的抑制作用显著降低(P<0.0001)。小鼠原代CD8^(+)T细胞经癸酸处理后,TCR活化水平显著升高、细胞因子IL-2和IFN-γ的产生增多、线粒体代谢水平显著上调(均P<0.05)。在黑色素瘤荷瘤小鼠模型中,癸酸与α-PD-1抗体联用,能够显著抑制小鼠移植瘤生长并提高其生存率(均P<0.05)。结论:癸酸能够促进CD8^(+)T细胞活化、增强其抗肿瘤免疫反应能力。

CD_3AK细胞的诱导及其体外抗肿瘤活性的实验研究

本研究采用抗ＣＤ３单克隆抗体（ＣＤ３ＭｃＡｂ）辅以少量的基因重组人白细胞介素２（γＩＬ—２）和植物血凝素（ＰＨＡ）诱导外周血淋巴细胞，成功地研制出具有抗瘤活性的ＣＤ３ＭｃＡｂ激活的杀伤细胞（ＣＤ３ＡＫ细胞）。结果表明：微量的ＣＤ３ＭｃＡｂ辅以少量的γＩＬ—２和ＰＨＡ就能诱导并大量扩增ＣＤ３ＡＫ细胞。３０ｎｇ／ｍｌ的ＣＤ３ＭｃＡｂ就能一次性激活ＣＤ３ＡＫ细胞，当ＣＤ３ＭｃＡｂ浓度提高到３００ｎｇ／ｍｌ时，ＣＤ３ＡＫ细胞的扩增能力明显高于ＬＡＫ细胞；ＣＤ３ＡＫ细胞是以ＣＤ３＋、ＣＤ８＋和ＣＤ４＋细胞为主的异质性细胞群，ＣＤ３＋和ＣＤ８＋细胞百分率随培养时间延长而增加，培养第４天至第１６天的ＣＤ３ＡＫ细胞均有很强的杀瘤活性，而最佳时期在第７天至第１０天；其体外杀瘤活性明显高于ＬＡＫ细胞（Ｐ＜０．０５）。本实验研究表明：ＣＤ３ＡＫ细胞是继ＬＡＫ、ＴＩＬ后又一更为有效的杀瘤细胞。

CD3AK细胞的生物学特性及其抗肿瘤作用

CD3AK细胞是用抗T细胞表而CD3分子的单克隆抗体激活的新型杀伤细胞，在肿瘤的免疫疗法中愈来愈受到重视。本文用抗CD3单克隆抗体(北医太免疫室提供)和rIL-2(日本盐野义制药株式会社产品)共同刺激人外周血单个核细胞(PBMC)，诱导CD3AK细胞，系统地研究了其生物特性及其体外抗肿瘤活性并与LAK细胞作比较。

CD_3AK细胞抗肿瘤作用与MHC限制性关系

目的 研究抗CD3 单克隆抗体激活的杀伤细胞 (anti-CD3 McAbactivatedkillercells ,CD3 AK细胞 )杀伤肿瘤细胞作用与MHC限制性的关系。方法 采用微量淋巴细胞毒实验方法测定CD3 AK细胞及肿瘤细胞MHC表型 ,用MTT法测定CD3 AK细胞杀伤活性。结果 (1)不同人来源的CD3 AK细胞 ,其MHC表型不同 ,但对同种肿瘤传代细胞都有很强的杀伤作用 ,且不同人来源的CD3 AK细胞间杀伤作用差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;(2 )同一来源CD3 AK细胞对不同肿瘤传代细胞株 (MHC表型不同 )的杀伤作用差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;(3)人外周血诱导的CD3 AK细胞对鼠肿瘤细胞株 (Yac - 1)与对人肿瘤传代细胞株 (K - 5 6 2 ,Raji)一样具有很强的杀伤作用。结论 CD3 AK细胞杀伤肿瘤的作用是非MHC限制的 ,在临床应用中可用正常人外周血诱导得到的CD3 AK细胞体外培养增殖后输给肿瘤病人进行治疗。该效应细胞来源方便 ,可用于肿瘤术后清除残留肿瘤细胞 ,具有重要应用价值。

CD_3AK细胞冻融提取液的抗肿瘤活性研究

为研究 CD3AK细胞冻融提取液的抗肿瘤作用 ,作者采集正常人外周血分离单个核细胞 (PBMC) ,先用抗 CD3的单克隆抗体 (CD3Mc Ab)和 r IL - 2诱导和激活 ,使之成为 CD3Mc Ab激活的杀伤细胞 (CD3AK ) ,再制备 CD3AK的冻融提取液 ,然后进行体内、外抗肿瘤实验。结果 :低剂量的 CD3Mc Ab和 r IL- 2能明显诱导 PBMC的活化和增殖 ;激活后的 CD3AK细胞冻融提取液可抑制小鼠肝癌实体瘤细胞 H2 2在小鼠体内生长 ,其抑瘤率达6 8.2 0 % (肿瘤局部注射 )和 6 0 .38% (腹腔注射 ) ;在体外实验中 ,该提取液能有效杀伤 K5 6 2和 Raji瘤细胞 ,其杀瘤活性分别为 83.32 %和 6 6 .83%。以上研究说明

人脐带血CD34^+细胞体外诱导树突状细胞及其激活T细胞抗肿瘤免疫反应的实验研究

To induce the growth and differentiation of dendritic cells (DCs) from human cord blood, CD34 + cells isolated from human cord blood by mini MACS were cultured in a liquid culture system with rhSCF, rhGM CSF, rhTNF α and rhFL for 10 days. Then the induced cells were characterized by DC′s morphological and phenotypic properties. In addition, they stimulated the proliferation of allogeneic T cells and possessed an efficient capacity for initiating T cell dependent antitumor immune responses in vitro. It is concluded that mature DCs could be obtained from human cord blood CD34 + cells.

CD_3AK细胞介导细胞因子抗肿瘤作用机制的研究

目的 :探讨 CD3AK细胞介导细胞因子抗肿瘤作用的机制。方法 :将卵巢癌细胞株 (A2 780 )分成两组 ,实验组采用 CD3AK+ A2 780 ,对照组采用 L AK+ A2 780 ,分别共育 2 4h并于作用前和作用后每 4h收集一次上清液以检测 TNF- α和 IFN- γ分泌水平。结果 :实验组和对照组共育前、后上清液中均有 TNF- α和 IFN- γ分泌 ,但共育后 TNF- α和 IFN- γ分泌水平显著高于共育前 (P <0 .0 1) ,且同一效靶比的实验组 TNF- α和 IFN- γ分泌水平明显高于对照组 (P <0 .0 5 )。结论 :CD3AK细胞可通过分泌细胞因子 TNF- α和 IFN- γ杀伤肿瘤细胞。

T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3与抗肿瘤免疫

T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(TIM-3)是一种免疫检查点分子,在T细胞、自然杀伤(NK)细胞和树突状细胞(DC)等多种免疫细胞上表达,并通过与多种配体结合而发挥免疫抑制作用。作为一种免疫负调节分子,TIM-3可以通过抑制CD8+T细胞的作用,增强调节性T(Treg)细胞的免疫效应,从而影响机体抗肿瘤免疫反应。阻断TIM-3信号通路、联合阻断TIM-3与PD-1,以及抑制TIM-3和半乳凝素9(Gal-9)之间的相互作用,均可增强免疫细胞的抗肿瘤作用。目前,TIM-3抗体和小分子抑制剂等药物分子正处在临床前研究阶段,显现出巨大应用价值。本文综述了TIM-3的结构、与配体和细胞的相互作用,深入探索了TIM-3在肿瘤进展中的作用及作为治疗靶点的潜力,发掘其在抗肿瘤免疫中的应用前景,为开发新的肿瘤治疗策略提供了理论基础和潜在靶点。

CD_3AK细胞及其抗肿瘤研究进展

抗CD_3抗体激活的杀伤细胞——CD_3AK是一种新型抗癌免疫活性细胞。T细胞经抗CD_3单克隆抗体激活后,采用极低剂量IL-2维持即可长期活性增殖,发挥明显的抗肿瘤细胞效应。依诱导培养过程中CD_3单抗持续存在与否,形成CD_3AK^+和CD_3AK^-两种亚类,其作用及方式亦有所差异。CD_3AK的体内外广谱、高效抗肿瘤作用明显优于LAK细胞,临床初步应用亦显示出良好疗效。

CD_3AK细胞体内外抗肿瘤活性及其临床应用

以TIL、LAK细胞联合rIL-2为代表的肿瘤过继免疫治疗在近年来的临床应用中取得了较为令人满意的临床疗效。特别是在肾癌、黑色素瘤、癌性浆膜转移等。但由于LAK、TIL前体细胞来源困难，且对IL-2呈现强依赖性，因此获得足量有效且1L-2依赖性低的抗肿瘤效应细胞是肿瘤生物治疗的主要研究内容之一。

α－CD_3单克隆抗体对肿瘤特异性T细胞的扩增和杀瘤活性的影响

为寻找更有效的肿瘤过继性免疫治疗的方案，用α－ＣＤ３单克隆抗体（单抗）激活ＦＢＬ－３红白血病肿瘤细胞免疫的小鼠脾细胞获取肿瘤特异性Ｔ细胞，并观察α－ＣＤ３单抗对肿瘤特异性Ｔ细胞的增殖、杀瘤活性及表型的影响。体外实验结果显示，免疫小鼠脾细胞经α－ＣＤ３单抗激活后，采用低剂量ＩＬ－２即可维持其长期高度的、持续的增殖；又培养过程中α－ＣＤ３单抗持续存在可大大促进其对肿瘤的特异性杀伤。细胞分型分析结果也支持了α－ＣＤ３单抗的持续存在对维持肿瘤特异性Ｔ细胞的抗瘤活性具有很重要的意义，是肿瘤过继免疫疗法中颇有前景的治疗方案。

CD_3抗体激活的杀伤细胞及其抗肿瘤作用

CD_3AK 细胞是继LAK 细胞之后又一广泛研究的更为有效的抗肿瘤细胞。几乎所有的T 细胞都可以被CD_3抗体激活扩增,其中1/3具有细胞毒活性,可以杀伤肿瘤细胞。CD_3AK 体外扩增迅速,体内外抗肿瘤效能显著优于LAK 细胞,而且无需大剂量外源性IL-2维持其活性,显示了广泛的应用前景。本文介绍了CD_3AK 的生物学特性及其抗肿瘤作用。

CD3AK细胞抗肿瘤作用的研究进展

抗ＣＤ３单克隆抗体激活的杀伤细胞ＣＤ３ＡＫ是一种新型抗肿瘤免疫活性细胞，具有体外扩增能力强，细胞毒活性高，体内抗肿瘤效果好，低依赖ＩＬ－２等特点。本文综述了ＣＤ３ＡＫ细胞的诱导和扩增、形态学和免疫学特性、体内外抗肿瘤作用和ＣＤ３ＡＫ细胞的活性增强物质。

CD_3AK细胞抗肿瘤作用的实验研究

ＣＤ_３ＡＫ细胞抗肿瘤作用的实验研究福建省肿瘤医院微生物研究室宋墨琴，芦林，郑秋红，陈晖自１９８０年Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ等人首次提出用ＩＬ－２／ＬＡＫ细胞治疗恶性肿瘤以后，引起国内外学者浓厚兴趣，近年来临床应用已取得十分可喜成果。但由于ＩＬ－２／ＬＡＫ?..

小鼠CD_3AK细胞抗肿瘤作用初步观察

目的：通过小鼠ＣＤ３ＡＫ细胞体外对靶细胞的杀伤活性及其体内抗肿瘤作用的观察，了解ＣＤ３ＡＫ细胞的体内外抗肿瘤效应。方法：采用ＭＴＴ法检测小鼠ＣＤ３ＡＫ细胞体外抗肿瘤细胞毒活性，并通过实体瘤的大小、瘤组织病理切片形态观察等分析小鼠ＣＤ３ＡＫ细胞的体内抗肿瘤作用。结果：小鼠ＣＤ３ＡＫ细胞不仅体外具有较强的细胞毒作用，且能在小鼠体内抑制Ｓ１８０肿瘤细胞的生长和扩散，并诱导Ｓ１８０细胞坏死，与生理盐水对照组比较有显著差异。

抗CD43单克隆抗体对B细胞增殖及抗体分泌的影响

目的 :研究抗CD4 3mAb (DFT1)对B细胞增殖及其抗体分泌的影响。方法 :细胞培养 ,3 H TdR掺入法测定不同时间抗CD4 3mAb对B细胞增殖的影响 ,ELISA测定其对PWM诱导系统内抗体分泌的水平。结果 :单独加入抗CD4 3mAb对B细胞增殖无影响 ,但在TPA诱导系统内加入抗CD4 3mAb,培养72h可见显著增殖反应 ,为单独加入TPA引起增殖反应的 3倍。在培养开始加入抗CD4 3mAb可引起显著的增殖反应 ,而延迟加入抗CD4 3mAb对B细胞增殖的影响不显著。抗CD4 3mAb对PWM诱导系统内B细胞的抗体分泌不产生影响。结论 :抗CD4 3抗体可引起TPA诱导系统内B细胞的显著增殖。

肝癌细胞凋亡-抗HBx/抗CD3双功能抗体介导细胞毒性T细胞对靶细胞的杀伤

研究发现，针对效应细胞毒性T淋巴细胞[CTL]表面受体[TCB／CD3复合物]与肿瘤相关抗原的双功能抗体能有效地介导CTL对靶肿瘤细胞的杀伤。为此，我们通过细胞融合法经流式细胞仪[FACS]无菌分选建立了抗HBx／抗CD3二次杂交瘤，应用该二次杂交瘤所分泌的双特性单克隆抗体[BsAb]介导CTL在LTNM4裸鼠人肝癌模型进行了实验性治疗研究。

PHA、抗CD_3单克隆抗体、LI-2诱导牌细胞培养上清液抗肿瘤效应的研究

本文探讨了PHA、CD_3单克隆抗体、IL-2体外诱导正常人脾细胞培养上清液抗肿瘤效应及其对LAK细胞抗肿瘤效应的增强作用。结果显示，IL-2诱导脾细胞的培养上清液在体外不仅具有直接杀伤肿瘤细胞效应，并且能增强LAK细胞的抗肿瘤作用。PHA、抗CD_3单克隆抗体和IL-2联合刺激可增强脾细胞培养上清液杀伤肿瘤细胞效应。

可溶性肿瘤抗原对小鼠CD_3AK细胞生物免疫功能的影响

目的:观察可溶性肿瘤抗原(STA———由S180 细胞提取)对小鼠CD3AK细胞的体外增殖、体外杀瘤活性以及体内抑瘤作用的影响。方法:采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法),分别检测小鼠脾脏单个核细胞的体外增殖活性和杀瘤效应细胞体外杀瘤活性,并通过测定实体瘤质量来分析杀瘤效应细胞的体内抑瘤作用。结果:STA协同增强小鼠CD3 单抗诱导的小鼠脾脏单个核细胞的体外增殖活性。由STA联合小鼠CD3 单抗共同诱导的T- AK细胞,不仅在体外对S180 细胞杀瘤活性强于CD3AK细胞,且在小鼠体内抑制S180 肿瘤细胞的生长和扩散作用也强于CD3AK细胞。