烟草抗CMV突变体的抗病性分析

在突变体植株 Ea201主、Ea201侧、Aa201侧 的5～6叶期接种CMV汁液,并按优选法去除病症最严重的病株,6周后将剩余植株分别移栽到田间露地和防虫网内,到盛花期分别统计植株的感病情况.其结果为:在田间露地和防虫网内,1感病的对照品种的植株高度只及健康的对照植株高度的30%和40%,突变体的则可达到70%和80%;2对照品种的植株感CMV的病情指数可达90%和50%,突变体的则只有30%和3%;3对照品种植株感TMV的病情指数可达60%和30%,突变体植株感TMV的病情指数只有30%和10%;4突变体植株群体中有症状回复现象,同时其育性不受任何影响.从而表明所筛选到的烟草突变体 Ea201主、Ea201侧、Aa201侧 对CMV、TMV的相对抗性较好,具有较高的抗病性.

基于SLAF-seq技术的烟草抗CMV主效QTL定位

烟草花叶病(CMV)是烟草主要病害之一,筛选与CMV抗病QTL紧密连锁的分子标记是烟草抗病分子育种的重要部分。本研究以抗病材料台烟8号和感病材料NC82为亲本,获得BC1群体,构建抗、感池。采用BSA和SLAF-seq技术开发CMV抗病相关SNP分子标记,共获得180 370个SLAF标签,经分析后获得6156个多态性SNP标记。利用SNP-index分析方法,发现两个与CMV抗病高度关联的区域。利用这些分子标记成功定位到了两个CMV抗病相关QTL,其中一个QTL定位于Chr01上的55.72～60.44 Mb区间内,区间大小为4.72 Mb;另一个则定位于烟草Chr18上的44.21～48.70 Mb区间内,区间大小为4.49 Mb。在关联到的QTL区间内设计分子标记可以用于烟草抗CMV育种的辅助选择。

抗CMV的重组牵牛花

日本三得利公司决定于11月30日在大阪召开的日本生物技术94’大阪展示会上展示用基因重组技术开发的牵牛花。在12月1日召开的展示会上展示重组和非重组的两种。广泛地公开基因重组植物这还是首次。 这种牵牛花被导入了黄瓜花叶病毒(CMV)的编码基因,产生了对CMV的耐性。现已完成了科学技术厅以及农林水产省所规定的重组植物安全性试验。这种牵牛花在野外栽培绝没问题。今年还完成了普通试验田的栽培,只期待着商品化。 但是,作为选择标记在此牵牛花上使用了卡那霉素耐性基因(这种基因涉及到专利问题)。因此,先商品化三得利公司从澳大利亚Florigene公司引进、最近在日本获得非封闭式温室实验认可的。

烟草抗CMV细胞突变系筛选系统的研究

在单倍体烟草6叶期接种CMV,接种前3d适当增施氮肥,接种后置28±2℃和自然光照条件下最适合CMV侵染和发病,发病后烟苗仅9或10位叶全部畸型褪绿,这是用绿岛法筛选抗CMV细胞突变系的临界选择压。用0.3％EMS(硫酸二乙酯)诱变烟苗心叶,接种CMV后置临界选择条件下从普通烟草良种Burley18的928个病株中选到每叶仅1～2个绿岛的畸型褪绿叶78片。截取绿岛进行组织培养得到146株无病试管苗,移栽盆钵后再接种CMV鉴定,选到抗CMV突变系R_2和R_8,其当代无性系在夏季网室条件下病情指数较亲本低40.1～45.3,并能通过有性过程传递。

烤烟CMV抗性的主基因+多基因混合遗传模型分析

以高抗CMV的烤烟品种台烟8号为母本(P1),以高感CMV的烤烟品种NC82为父本(P2),在2个不同的时间环境下构建P1、P2、F1和F24个世代群体,在植株不同生长时期进行CMV病害鉴定。运用植物数量性状"主基因+多基因"混合遗传模型分析方法对该世代群体的CMV抗性进行联合分析。结果表明,在温室环境中,苗期和成株期鉴定CMV抗性遗传都符合E1模型,即由2对加性-显性-上位性主基因+加性-显性多基因混合控制,主基因遗传率分别是37.11%、57.76%;在大田环境中,苗期抗性鉴定符合加性-显性-上位性多基因模型(C0),多基因遗传率为26.86%,而成株期鉴定属于2对主基因+多基因模型(E2),主基因遗传率为36.57%。研究表明,由于植物抗性基因的表达具有时空性,台烟8号对CMV的抗性遗传在不同的时间和环境具有一定的差异;但随着植株的生长,抗性遗传趋于稳定,在成株期时,2个不同的环境均表现为2对主基因+多基因控制,所以对烤烟CMV抗性品种选育和改良要以主基因为主,同时注重环境的影响。

烤烟不同黄瓜花叶病毒病(CMV)抗源的抗性遗传分析

为深入认识烤烟不同抗源对黄瓜花叶病毒病(Cucumber mosaic virus,CMV)的抗性遗传规律,以3份CMV高抗材料(抗88、台烟8号和FC8)为父本分别与感病材料C151杂交构建了3个F2群体,采用摩擦接种的方法进行了苗期抗病性鉴定。利用主基因+多基因混合遗传模型分析方法分别对3个组合4个世代的病情调查结果进行了分析。结果表明:抗88和台烟8号的最优模型是E1模型,即抗性受2对加性-显性-上位性主基因+加性-显性多基因控制,主基因的遗传率分别为91.91%和68.50%。FC8的抗性由2对加性-显性-上位性主基因控制(B1模型),主基因的遗传率为76.43%。3个抗源的抗性都主要由遗传因素控制,主基因遗传率较高,说明抗病性状可以在早期进行选择。抗88和台烟8号主基因间的上位性效应以及多基因的加性和显性效应都有助于提高抗性,在育种中可以加以利用;FC8的2个主基因显性效应明显,适合杂种优势利用。

辣椒抗黄瓜花叶病毒QTL分析

利用辣椒抗黄瓜花叶病毒材料perennial与园艺性状优良的感病材料茄门,及其F2群体146个单株、F3146个株系为试材,采用SRAP和SSR分子标记技术,利用JoinMap3.0软件构建了包含76个标记、13个连锁群,覆盖长度为830.4cM的辣椒分子遗传图谱。对F3株系(4380个单株)进行人工接种鉴定黄瓜花叶病毒,其病情指数呈正态分布。结合分子遗传图谱的结果,利用MapQTL4.0软件进行分析,将抗病基因的QTL定位在第1、4、7连锁群上,抗性贡献率分别为12.7%、38.8%、11.0%。

N-(1,4-二取代吡唑基)-1,2,3-噻二唑酰胺类化合物的抗植物病毒活性研究

[目的]吡唑和噻唑类化合物是一类具有广泛生物活性的化合物,为了寻找到高活性的杂环酰胺类化合物,对此类化合物做进一步研究。[方法]对已合成的16个N-(1,4-取代吡唑基)-1,2,3-噻二唑酰胺类化合物分别进了抗烟草花叶病毒(TMV)和黄瓜花叶病毒(CMV)生物活性测试。[结果]初步生物活性表明,部分目标化合物在500μg/mL浓度下对烟草花叶病毒(TMV)和黄瓜花叶病毒(CMV)有一定的治疗活性,其中化合物TM-1在浓度为500μg/mL时,对TMV和CMV的治疗抑制率分别为41.75%和41.25%;化合物TM-13在浓度为500μg/mL时,对CMV的治疗抑制率分别为45.72%,比对照药剂宁南霉素58.72%略低,具有进一步研究的价值。

快速选育抗黄瓜花叶病毒的转基因烟草纯合品系

以来源于烟草推广品种ＮＣ８９花药的单倍体苗为转化受体，同时导入了黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）的外壳蛋白（ＣＰ）基因和卫星ＲＮＡ（Ｓａｔ—ＲＮＡ）基因，在获得的共１１２株转化植株中，有３株在人工接种浓度高达２００μｇ／ｍｌ的ＣＭＶ时仍不发病。通过０．４％秋水仙素处理使之加倍并收获种子，而后连续两代在大田条件下鉴定其ＣＭＶ抗性及综合农艺性状，并与单独导入了ＣＭＶＣＰ基因或ＣＭＶＳａｔ—ＲＮＡ基因的转基因ＮＣ８９品系及未转化的对照ＮＣ８９进行了比较。结果表明，同时表达ＣＭＶ外壳蛋白和卫星ＲＮＡ的双单倍体转基因植株，在Ｒ—１代即表现出一致的可稳定遗传的ＣＭＶ抗性，抗性水平较单独表达ＣＰ或Ｓａｔ—ＲＮＡ的转基因ＮＣ８９提高１倍左右。

辣椒新品种华美105的选育

华美105是以自交系HA015为母本,以抗CMV的株系LR002为父本杂交育成的螺丝形羊角椒。早熟,从定植到始收45 d(天)左右,首花节位在第9~10节。植株健壮,生长势强,叶片小,节间短,耐低温弱光。连续坐果能力强,单株结果25~30个,单果质量80~120 g,产量稳定在8500 kg·(667 m^2)^-1以上。青熟果深渌色,老熟果红色,辣味中等,肉质脆嫩,市场接受度高。田间对CMV和疫病的抗性强于对照陇椒3号。适合北方早春、秋延后、越冬设施及南方露地栽培。

番茄新品种——园山一号

北京市农林科学院开发中心,经过几年的努力,利用抗CMV的转基因工程番茄与其它番茄品种杂交,选育出抗CMV的番茄新品种——“园山一号”(F1)。