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百日咳鲍特菌菌毛蛋白纯化方法的建立及免疫原性的初步评价
被引量:
1
1
作者
杨柏峰
田聪
+6 位作者
朱德武
潘聪
胡太平
施斌
王丽
周昉
杨晓明
《微生物学免疫学进展》
CAS
2021年第2期35-42,共8页
目的建立一种适合生产放大的百日咳鲍特菌菌毛蛋白(fimbriae, Fim)纯化新工艺,并对其免疫原性进行初步评价。方法百日咳黏附素(pertactin, PRN)流穿液经一步盐析和一步复合型阴离子Capto Adhere疏水层析流穿法进行纯化,以纯度和回收率...
目的建立一种适合生产放大的百日咳鲍特菌菌毛蛋白(fimbriae, Fim)纯化新工艺,并对其免疫原性进行初步评价。方法百日咳黏附素(pertactin, PRN)流穿液经一步盐析和一步复合型阴离子Capto Adhere疏水层析流穿法进行纯化,以纯度和回收率为检测指标,对硫酸铵盐析质量体积比和疏水离子层析条件进行优化,进行连续3批生产验证工艺稳定性。检验精纯Fim蛋白毒性,将合格Fim蛋白与百日咳其他组分配伍成五组分无细胞百日咳疫苗(acellular component pertussis vaccine, acPV),免疫小鼠,评价免疫原性。结果成功建立了从PRN流穿液中纯化Fim蛋白的方法。该工艺制备的3批Fim蛋白纯度(>95%)高,回收率均在60%以上,具有良好的重复性,且Fim蛋白符合特异性毒性试验要求。5μg Fim蛋白免疫小鼠后在7、28、35和42 d血清中的抗Fim抗体几何平均滴度(geometric mean titer, GMT)分别为10.6、97.7、102.9、192.6 IU/mL,与生理盐水组相比具有统计学差异(P<0.05)。结论利用QbD理念建立了适合生产放大的百日咳鲍特菌菌毛蛋白纯化新工艺,且蛋白具有良好的免疫原性,未来有望作为组分百日咳疫苗的候选抗原。
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关键词
百日咳
百日咳黏附素
菌毛蛋白
盐析
疏水层析
抗fim抗体
原文传递
题名
百日咳鲍特菌菌毛蛋白纯化方法的建立及免疫原性的初步评价
被引量:
1
1
作者
杨柏峰
田聪
朱德武
潘聪
胡太平
施斌
王丽
周昉
杨晓明
机构
武汉生物制品研究所有限责任公司细菌类疫苗研究室
中国生物技术股份有限公司
出处
《微生物学免疫学进展》
CAS
2021年第2期35-42,共8页
基金
国家“重大新药创制”科技重大专项资助项目(2018ZX09738003)。
文摘
目的建立一种适合生产放大的百日咳鲍特菌菌毛蛋白(fimbriae, Fim)纯化新工艺,并对其免疫原性进行初步评价。方法百日咳黏附素(pertactin, PRN)流穿液经一步盐析和一步复合型阴离子Capto Adhere疏水层析流穿法进行纯化,以纯度和回收率为检测指标,对硫酸铵盐析质量体积比和疏水离子层析条件进行优化,进行连续3批生产验证工艺稳定性。检验精纯Fim蛋白毒性,将合格Fim蛋白与百日咳其他组分配伍成五组分无细胞百日咳疫苗(acellular component pertussis vaccine, acPV),免疫小鼠,评价免疫原性。结果成功建立了从PRN流穿液中纯化Fim蛋白的方法。该工艺制备的3批Fim蛋白纯度(>95%)高,回收率均在60%以上,具有良好的重复性,且Fim蛋白符合特异性毒性试验要求。5μg Fim蛋白免疫小鼠后在7、28、35和42 d血清中的抗Fim抗体几何平均滴度(geometric mean titer, GMT)分别为10.6、97.7、102.9、192.6 IU/mL,与生理盐水组相比具有统计学差异(P<0.05)。结论利用QbD理念建立了适合生产放大的百日咳鲍特菌菌毛蛋白纯化新工艺,且蛋白具有良好的免疫原性,未来有望作为组分百日咳疫苗的候选抗原。
关键词
百日咳
百日咳黏附素
菌毛蛋白
盐析
疏水层析
抗fim抗体
Keywords
Bordetella pertussis
Pertactin
fim
briae(
fim
)
Salting-out
Hydrophobic chromatography
Anti-
fim
antibody
分类号
R516.6 [医药卫生—内科学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
百日咳鲍特菌菌毛蛋白纯化方法的建立及免疫原性的初步评价
杨柏峰
田聪
朱德武
潘聪
胡太平
施斌
王丽
周昉
杨晓明
《微生物学免疫学进展》
CAS
2021
1
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