抗Galectin-3抗体在皮肤血管炎中的表达

目的:检测系统性红斑狼疮、荨麻疹性血管炎(UV)、过敏性紫癜(HSP)和变应性皮肤血管炎(LCV)患者血清抗Galectin-3抗体的水平。方法:ELISA法检测15例伴发皮肤血管炎表现的SLE、13例UV、15例HSP和8例LCV患者血清及15例正常人血清(阴性对照)抗Galectin-3抗体水平。结果:SLE和UV患者血清中抗Galectin-3抗体吸光度值分别为:0.89±0.08、0.71±0.05,显著高于对照组的0.46±0.02(P<0.05);HSP和LCV患者中分别为0.60±0.05和0.60±0.04,与正常人相比无明显差异。结论:有皮损的荨麻疹性血管炎及系统性红斑狼疮皮肤血管炎可能与血清中抗Galectin-3抗体升高有关。

血清补体C3、C4及抗C1q抗体水平与系统性红斑狼疮患者病情的相关性

目的探讨血清补体C3、C4及抗C1q抗体水平与系统性红斑狼疮(SLE)患者病情的相关性。方法收集105例SLE患者纳入病例组,并选择65例健康人员作为对照组。检测并比较两组血清补体C3、C4和抗C1q抗体及肾功能指标;采用系统性红斑狼疮疾病活动指数(SLEDAI)评估患者的病情活动度,比较不同疾病活动度患者血清补体C3、C4和C1q抗体水平;分析血清补体C3、C4和抗C1q抗体与肾功能及病情活动度的相关性。采用Logistic多因素回归分析影响SLE患者病情变化的危险因素。结果病例组血清肌酐(Scr)(83.61±10.71)μmol/L、尿素氮(BUN)(6.45±1.47)mmol/L、β_(2)-微球蛋白(β_(2)-MG)(6.23±1.42)mg/L均明显高于对照组的(42.06±7.39)μmol/L、(3.02±1.25)mmol/L、(1.65±0.58)mg/L,肾小球滤过率(eGFR)(80.56±14.28)ml/min明显低于对照组的(118.19±15.34)ml/min,差异有统计学意义(P<0.05);病例组血清补体C3、C4水平分别为(0.56±0.17)、(0.16±0.04)g/L,均明显低于对照组的(1.23±0.31)、(0.30±0.12)g/L,抗C1q抗体水平(46.65±11.48)U/ml明显高于对照组的(2.44±0.63)U/ml,差异有统计学意义(P<0.05);轻度活动患者血清补体C3、C4水平分别为(0.89±0.23)、(0.25±0.07)g/L均明显高于中重度活动患者的(0.31±0.08)、(0.08±0.02)g/L,抗C1q抗体水平(31.47±6.28)U/ml明显低于中重度活动患者的(59.76±8.73)U/ml,差异有统计学意义(P<0.05);血清补体C3、C4与Scr、BUN、β_(2)-MG、SLEDAI积分呈负相关(P<0.05),与eGFR呈正相关(P<0.05);抗C1q抗体与Scr、BUN、β_(2)-MG、SLEDAI积分呈正相关(P<0.05),与eGFR呈负相关(P<0.05);Logistic多因素回归分析显示,补体C3、C4、抗C1q抗体是影响SLE病情的独立危险因素(OR=3.54、2.14、5.68,P<0.05)。结论SLE患者存在血清补体C3、C4明显下降,抗C1q抗体水平明显升高现象,多预示患者病情加重,应引起临床医生的重视,并制定有效的治疗方案。

抗CD3/CD20双特异性抗体生物学活性测定方法的建立

目的建立基于报告基因的抗CD3/CD20双特异性抗体生物学活性检测方法。方法以WIL2-S细胞系作为靶细胞,以Jurkat-NF-κB-Luc转基因细胞系作为效应细胞,对抗体的量效范围、孵育时间、诱导时间、效靶比及细胞接种密度进行优化,构建可用于测定抗CD3/CD20双特异性抗体生物学活性的报告基因法。依据ICHQ2的指导原则对方法进行全面验证,包括专属性、准确性、精密度、线性、稳定性。结果成功建立了具有量效关系的抗CD3/CD20双特异性抗体生物学活性检测方法,该方法的抗体起始浓度为500 ng/mL,稀释倍数为1∶4,共计8个浓度点(500,125,31.25,7.81,1.95,0.49,0.12,0.031 ng/mL),效靶比为4∶1,诱导时间为4 h。本方法具有良好的专属性;5个不同稀释组回收率样品经测定,相对效价分别为59.63%±4.57%,75.54%±4.05%,99.98%±9.63%,123.90%±5.54%和142.51%±12.82%;对应的回收率分别为93.17%±7.15%,94.42%±5.06%,99.98%±9.63%,99.12%±4.43%以及91.21%±8.21%,CV分别为7.67%,5.35%,9.63%,4.47%和9.00%,上述结果的变异系数CV值均<10%;实测效价与理论效价线性回归分析相关系数R^(2)=0.9823,线性良好;本研究建立的方法可以敏感检测出抗体结构变化对生物活性的影响,对双特异性抗体的稳定性检测有一定的指导意义。结论利用转基因细胞法成功建立了抗CD3/CD20双特异性抗体生物学活性检测方法,该方法专属性强、准确性高、重复性好,可用于评价抗CD3/CD20双特异性抗体生物学活性。

抗合成酶抗体综合征合并抗3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶还原酶蛋白抗体阳性坏死性肌病1例

目的总结抗合成酶抗体综合征(ASS)合并免疫介导坏死性肌病的疾病特点及治疗经验。方法回顾性分析2022年1月南京医科大学附属宿迁第一人民医院收治的1例ASS合并抗3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶还原酶蛋白(HMGCR)抗体阳性坏死性肌病病人,总结此类病人的临床特点。结果病人主诉咳嗽1周,查肌炎抗体谱:抗组氨酰tRNA合成酶(Jo-1)抗体(+++)、抗SSA/Ro52抗体(+++)、抗HMGCR抗体(+++),诊断:抗合成酶抗体综合征、抗HMGCR抗体阳性坏死性肌病、间质性肺病、低蛋白血症。该病人通过糖皮质激素、免疫抑制剂及丙种球蛋白等治疗后症状缓解。结论不同类型的特发性炎性肌病(IIM)临床表现差异较大,各亚型之间也存在重叠表现,其预后及治疗各不相同。如有两种及以上肌炎的合并,则进展快,预后差,需早期完善肌炎抗体谱检查,明确分型,精准治疗。

抗环瓜氨酸肽抗体与基质金属蛋白酶-3联合检测在类风湿关节炎患者中的诊断价值及与疾病活动度的相关性

目的研究抗环瓜氨酸肽(anti-CCP)抗体与基质金属蛋白酶-3(MMP-3)联合检测在类风湿关节炎(RA)患者中的诊断价值及与疾病活动度的相关性。方法回顾性选取2021年1月至2023年1月入淮南新华医疗集团新华医院的92例RA患者作为RA组。同时,选取同一时期入院的92例非RA自身免疫病患者与92名体检健康者分别作为非RA组、对照组。参考28个关节疾病活动度评分(DAS28)将RA组划分为4个亚组:高活动组(DAS28>5.1分,n=23)、中活动组(3.2<DAS28<5.1分,n=23)、低活动组(2.6<DAS28<3.2分,n=23)和稳定组(DAS28<2.6分,n=23)。比较RA组、非RA组、对照组研究对象的血清anti-CCP抗体、MMP-3水平和不同关节疾病活动度RA患者的血清anti-CCP抗体、MMP-3水平,通过受试者工作特征(ROC)曲线分析anti-CCP抗体联合MMP-3检测在RA中的诊断价值,并通过Spearman相关分析法分析血清anti-CCP抗体、MMP-3水平与RA患者疾病活动度的相关性。结果RA组、非RA组的血清anti-CCP抗体、MMP-3水平均明显高于对照组,RA组的血清anti-CCP抗体、MMP-3水平均明显高于非RA组,差异均有统计学意义(P<0.05)。高活动组患者的血清anti-CCP抗体、MMP-3水平明显高于稳定组、低活动度组、中活动度组,中活动度组患者的血清anti-CCP抗体、MMP-3水平均高于稳定组、低活动度组,低活动度组患者的血清anti-CCP抗体、MMP-3水平均高于稳定组,差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线显示,单一anti-CCP抗体诊断RA的ROC曲线下面积(AUC)、敏感度、特异度依次为0.780、0.499、0.945,单一MMP-3诊断RA的AUC、敏感度、特异度依次为0.769、0.749、0.949,anti-CCP抗体联合MMP-3诊断RA的AUC、敏感度、特异度依次为0.890、0.882、0.962。Spearman相关分析显示,血清anti-CCP抗体、MMP-3水平与RA患者疾病活动度呈正相关(r=0.836、0.688,P<0.05)。结论anti-CCP抗体与MMP-3联合检测在RA诊断中效果显著,可提升RA诊断精准性,且RA患者疾病活动度与anti-CCP抗体、MMP-3呈正相关性,可为临床药物使用提供参考。

血清抗环瓜氨酸肽抗体、类风湿因子、免疫球蛋白G、补体C3、补体C4检测在类风湿关节炎诊断中的应用价值

目的:探讨血清抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体、类风湿因子(RF)、免疫球蛋白G(IgG)、补体C3、补体C4检测在类风湿关节炎诊断中的应用价值。方法:选取2020年3月—2022年3月枝江市人民医院收治的类风湿关节炎患者126例作为观察组,另选取同期体检健康者126例作为对照组,根据类风湿关节炎疾病活动(DAS-28)评分将观察组分为缓解期组(n=72)与活动期组(n=54)。所有研究对象检测血清CCP抗体、RF、IgG、补体C3、补体C4水平。比较各组各项指标水平。结果:观察组血清CCP抗体、RF、IgG、补体C3、补体C4水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。活动期组血清CCP抗体、RF、IgG、补体C3、补体C4水平均高于缓解期组,差异有统计学意义(P<0.001)。结论:类风湿关节炎患者体内血清CCP抗体、RF、IgG、补体C3、补体C4均异常升高,并与类风湿关节炎病情活动度有关,可作为类风湿关节炎早期诊断及病情监测的重要指标。

血清SOCS-1、SOCS-3及抗BP-180抗体水平与大疱性类天疱疮病情的相关分析

目的探讨血清细胞因子信号转导抑制蛋白-1(SOCS-1)、SOCS-3及抗大疱性类天疱疮(BP)-180抗体水平与BP病情的相关分析。方法选取2018年5月—2022年5月本院诊治的82例BP患者作为研究对象,并将其设立为观察组,同期选取41例健康体检者作为对照组,并根据病情程度将82例BP患者分为轻度组(活动性皮损面积≤10%,n=28)、中度组(活动性皮损面积10%~30%,n=27)和重度组(活动性皮损面积>30%,n=27),展开回顾性研究,对比血清SOCS-1、SOCS-3、抗BP-180抗体水平及自身免疫性大疱性皮肤病严重程度评分(ABSIS);采用Pearson法分析SOCS-1、SOCS-3、抗BP-180抗体与ABSIS评分的相关性;并绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估SOCS-1、SOCS-3、抗BP-180抗体诊断BP的曲线下面积(AUC)、敏感度和特异度。结果观察组的男性、女性均可发病,性别分布上差异无统计学意义,其中40~69岁为高发的年龄段。观察组的SOCS-1、SOCS-3、抗BP-180抗体及ABSIS均高于对照组(P<0.05)。重度组的SOCS-1、SOCS-3、抗BP-180抗体及ABSIS均高于轻度组和中度组(P<0.05);中度组的SOCS-1、SOCS-3、抗BP-180抗体及ABSIS均高于轻度组(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,SOCS-1、SOCS-3、抗BP-180抗体与ABSIS呈正相关(r分别为0.441、0.580、0.723,P<0.001)。ROC曲线分析显示,SOCS-1、SOCS-3和抗BP-180抗体诊断BP的AUC值分别为0.696、0.765和0.965(P<0.05);敏感度分别为53.70%、41.50%和95.10%,特异度分别为87.80%、100.00%和85.40%。结论血清SOCS-1、SOCS-3及抗BP-180抗体水平与BP病情严重程度呈正相关,即其水平会随着病情程度变化而发生改变,临床可通过监测SOCS-1、SOCS-3及抗BP-180抗体水平变化为诊断BP及评估病情严重程度提供参考。

抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体的构建和表达

构建和表达抗CD3 抗Pgp微型双功能抗体 ,并测定该微型双功能抗体的生物学活性。采用PCR和overlapPCR方法构建抗CD3 抗Pgp微型双功能抗体 ,并用双脱氧终止法测定DNA序列 ;采用亲和层析法纯化该产物 ,并用Westernblot和分子排阻层析鉴定纯化产物 ;采用免疫荧光法、放射免疫分析法鉴定纯化产物与靶细胞的结合活性。DNA序列测定结果表明 :抗CD3 抗Pgp微型双功能抗体已构建成功 ,表达可溶性产物的产量达 2mg L以上 ,纯化产物中二聚体的比例达 90 % ,具有与Jurkat(CD3 + )和K5 62 A0 2细胞 (Pgp+ )结合的活性 ,与抗CD3ScFv及抗PgpScFv的亲合常数相当。成功地构建了抗CD3 抗Pgp微型双功能抗体 ,并获得高效表达 。

类风湿关节炎患者检测血清14-3-3η蛋白和自身抗体的临床意义

目的:探讨血清14-3-3η蛋白与自身抗体检测对类风湿关节炎(RA)诊断的临床价值。方法:收集134例RA患者、90例非RA关节病变患者及同期40例健康体检者血清样本,采用ELISA和速率比浊法分别检测14-3-3η蛋白、抗CCP抗体(anti-CCP)、抗RA33抗体(anti-RA33)、抗Sa抗体(anti-Sa)和类风湿因子(RF)含量,并分析其对RA的诊断价值。结果:(1)血清14-3-3η蛋白、anti-CCP、anti-RA33、anti-Sa、RF水平在RA组均显著高于非RA组和对照组,组间差异都具有统计学意义;(2)绘制各指标ROC曲线,14-3-3η蛋白、anti-CCP、anti-RA33、anti-Sa、RF曲线下面积(AUC)分别0.831、0.852、0.615、0.706和0.739,均P<0.01;其中14-3-3η蛋白和anti-CCP达到中等以上诊断价值,对应cutoff值分别为2.59 ng/ml和24.10 U/ml;(3)所有指标中anti-Sa特异度最强为97.69%,RF灵敏度最高为83.58%;14-3-3η诊断RA的特异度为91.54%仅稍次于anti-Sa和anti-RA33抗体,但其敏感度较anti-Sa和anti-RA33均高。结论:14-3-3η蛋白、anti-CCP、anti-RA33、anti-Sa和RF在RA中均显著升高,对RA的诊断都有一定的价值。同时,14-3-3η诊断RA的敏感度和特异度相比自身抗体更有一定优势,可以作为辅助诊断RA的指标。

系统性红斑狼疮患者抗磷脂抗体与低水平补体C3、C4的关系

目的补体活化和低补体血症常见于系统性红斑狼疮（SLE）患者,15%~40%SLE患者抗磷脂抗体（antiphospholipid,a PL）呈阳性。本文探讨SLE患者血清抗磷脂抗体与低水平补体的关系。方法选取我院2013年2月至2015年2月住院及门诊部诊治的SLE患者126例（SLE组）和健康体检者162例（健康对照组）,根据SLE疾病活动指数（systemic lupus erythematosusdisease activity index,SLEDAI）将SLE组又分为SLE轻度活动组、中度活动组和重度活动组（n分别为48、52、26）。所有样本行抗β2糖蛋白1（β2GP1）抗体、抗心磷脂抗体（a CL）、C-反应蛋白、抗ds DNA抗体、补体C3、C4检测。观察a PL抗体与补体C3、C4的相关性。结果与健康对照组相比,SLE组血清CRP水平,各种亚型a PL抗体滴度显著升高,差异均有统计学意义（P均〈0.05）,SLE轻度和中度活动组患者血清C3、C4水平差异均无统计学意义（P均〉0.05）,而SLE重度活动组患者血清补体C3、C4水平显著降低,差异均有统计学意义（P均〈0.05）;SLE轻度、中度、重度活动组三者相比,各类亚型a PL抗体均呈显著升高趋势,差异均有统计学意义（P均〈0.05）;SLE患者血清补体C3、C4水平与各类亚型a PL抗体滴度均呈显著负相关（r=-0.205、-0.213、-0.207、-0.19,P〈0.05;r=-0.935、-0.933、-0.914、-0.929,P〈0.01）;与a PL抗体阴性SLE组相比,a PL阳性SLE患者血清补体C3、C4水平显著降低,差异有统计学意义（P〈0.05）,抗ds DNA抗体阳性率显著高于阴性组（P〈0.05）。结论 a PL抗体与SLE患者疾病活动度相关,且与补体C3、C4水平呈显著负相关,a PL抗体可能激活补体C3、C4共同参与SLE患者的疾病活动。

抗CD28抗体协同刺激增强抗CD3抗体体外激活T淋巴细胞并降低TGF-β的表达

为了探讨体外激活T淋巴细胞的方法及活化后T淋巴细胞的免疫学特征,利用抗CD3、抗CD28抗体在体外刺激健康人外周血单个核细胞PBMNC,检测淋巴细胞转化,CD8+CD25+细胞比例和肿瘤生长因子β(TGF-β)表达等相关免疫学指标。结果表明,在抗CD28抗体的协同作用下,抗CD3抗体的刺激活性明显提高,CD8+CD25+细胞比例明显增加,TGF-β的表达下调。结论:抗CD28抗体协同刺激可以提供第二信号,使T淋巴细胞充分活化。

抗RA33、抗CCP抗体检测在RA诊断中的应用

目的 探讨抗RA33、抗CCP抗体对RA的诊断价值。方法 用ELISA方法分别检测 4 3例RA患者、2 3例非RA弥漫性结缔组织病患者、4 5例正常对照血清中抗RA33、抗CCP抗体水平。结果 抗RA33、抗CCP抗体对RA的诊断敏感性分别为 2 0 .9%、6 0 .5 % ,特异性分别为 88.2 %、97.1 %。结论 抗RA33抗体可作为RA的早期诊断指标 ,抗CCP抗体可以作为RA的特异性诊断指标。

副肿瘤性天疱疮抗Dsg1和抗Dsg3抗体滴度及亚型和细胞因子的表达

目的对不同病期的副肿瘤性天疱疮(PNP)患者血清中抗桥粒芯糖蛋白(Dsg)1和抗Dsg3抗体的滴度、亚型及其外周血单个核细胞(PBMC)中细胞因子IFN-γ和IL-4水平进行观察,探讨PNP的特殊发病机制。方法采用ELISA法检测6例PNP患者不同病期抗Dsg1和抗Dsg3抗体滴度及其IgG1和IgG4抗体亚型;采用流式细胞术(FCM)检测上述患者PBMC中T细胞的IFN-γ和IL-4水平,并与10例寻常型天疱疮(PV)患者、10例落叶型天疱疮(PF)患者及20例正常对照进行比较。结果 PNP患者组在急性期抗Dsg1和抗Dsg3抗体滴度均升高,稳定期均明显降低,抗Dsg1和抗Dsg3抗体亚型IgG1/IgG4均以IgG1为主,与PV组相比,差异均有统计学意义(P均<0.05),与PF组患者的抗Dsg1抗体亚型IgG1/IgG4比较,差异也有统计学意义(P<0.01);PNP组患者CD8+T细胞及CD4+T细胞内IFN-γ水平明显高于PV组患者和PF组患者(P=0.001),且稳定期CD8+T细胞及CD4+T细胞内IFN-γ水平较急性期明显降低(P<0.05)。PNP组急性期患者的CD4+T细胞内IL-4水平显著低于PV组患者(P<0.05)和PF组患者(P<0.01),但在稳定期时,其水平与急性期比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PNP患者在抗Dsg1和Dsg3抗体的亚型、细胞因子等方面与其他类型的天疱疮存在明显差异。

抗人卵巢癌/抗人CD3单链双特异性抗体介导的αβT细胞CDR3谱系漂移

目的探讨抗人卵巢癌/抗人CD3单链双特异性抗体(BHL-1)介导的αβT细胞CDR3谱系漂移,为双特异性抗体介导的T细胞免疫应答机制提供理论基础。方法采用免疫扫描谱型分析技术,分析6例正常献血员T细胞在人卵巢癌SKOV3细胞联合BHL-1刺激前后的TCR库多样性变化(CDR3谱型分布特征)及刺激后T细胞TCRα、β链CDR3优势利用情况,对克隆性增生T细胞的CDR3区进行序列分析。结果刺激前6例正常献血员TCR CDR3谱型均呈高斯分布,刺激后发生CDR3谱系漂移,部分TCR Vα、Vβ家族出现优势增生,明确了BHL-1介导下单克隆增生T细胞的α、β链CDR3序列。结论 SKOV3联合BHL-1诱导的T细胞CDR3谱系出现明显漂移,提示CDR3的选择性表达可能与BHL-1介导的特异性T细胞免疫反应有关,特异应答T细胞TCR CDR3序列的确定,将为卵巢癌的T细胞免疫治疗提供基础。

抗CD3基因工程嵌合抗体IgG在哺乳动物细胞中的表达和活性测定

利用基因工程方法将鼠源性抗CD3抗体HIT3a的可变区和人源抗体 (IgG)的完整的恒定区连接起来 ,构建全抗型抗CD3嵌合抗体 ,该型抗体具有较低的免疫源性可作为免疫抑制剂应用于器官移植 ,减少受体产生免疫排斥 ,提高移植器官的存活率。利用PCR方法从抗CD3ScFv重组噬菌体表达载体pCANTAB 5E上扩增抗CD3抗体的轻链和重链可变区 ,将轻链和重链可变区组装到含有人抗体 (IgG)恒定区的表达载体中 ,构建抗CD3嵌合抗体IgG的轻链和重链表达载体PKN10 0和PG1D10 5 ,并用脂质体法共转染CHO细胞。结果证明 ,抗CD3嵌合抗体的VL 和VH 与HIT3a抗体的VL 和VH 完全相符 ,ELISA和Westernblot检测结果证实转染细胞的培养上清中含有抗CD3嵌合抗体IgG的表达 ,表达产物能与Jurkat细胞结合 ,并能竞争性抑制HIT3a抗体和Jurkat细胞结合活性 ,3H TdR掺入实验表明 ,抗CD3嵌合抗体与亲代抗体HIT3a一样 ,具有促进外周血单核细胞增殖的作用。我室构建的全抗型抗CD3嵌合抗体分子表达载体可在CHO细胞中稳定表达 ,表达产物有较好生物活性 。

抗PR3抗体、抗MPO抗体检测的临床探究

[目的]探究抗蛋白酶3(PR3)抗体、抗髓过氧化物酶(MPO)抗体在系统性血管炎患者中检测的临床意义。[方法]应用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测抗PR3抗体和抗MPO抗体,应用IIF法检测ANCA总抗体。[结果]105例系统性血管炎患者中57例韦格纳肉芽肿患者,主要表现为抗PR3抗体和颗粒型抗中性粒细胞胞质抗体(cANCA),阳性例数均为41例,阳性率均为71.93%,13例显微镜下多血管炎(MPA)和9例坏死性新月体肾炎(ATH)主要表现为MPO和pANCA,阳性率分别为53.8%和61.5%,22.22%和33.33%;135例系统性红斑狼疮(SLE)患者,主要表现为抗MPO抗体和核周型抗中性粒细胞胞质抗体(pANCA),阳性例数分别为29例和32例,阳性率分别是21.5%和23.7%。[结论]抗PR3、抗MPO抗体作为系统性血管炎的一种敏感标记抗体,有利于该疾病的早期诊断及治疗。

抗人IL-6Rβ(gp130)单克隆抗体对IL-6信号分子调控浅析

目的:分析鼠抗人IL-6Rβ(gp130)单克隆抗体[anti-IL-6Rβ(gp130)mAb]的生物学特性及对IL-6信号分子的调节作用。方法:利用Western blot、竞争性ELISA实验、功能表位结合实验,检测anti-IL-6Rβ(gp130)mAb的亲和力、效价及与gp130抗原表位结合特异性。进而探讨anti-IL-6Rβ(gp130)mAb对U266细胞、RA患者外周血单个核细胞(PBMC)及滑膜液单个核细胞(SFMC)增殖和分化中的IL-6信号分子的调控机制。结果:Anti-IL-6Rβ(gp130)mAb对gp130具有高亲和性(如10A1细胞株的亲和力常数可达为2.62E-10),所获得的多株单抗还具有针对不同抗原结合表位的特性,可用于分析和研究IL-6信号通路及下游STAT3的磷酸化。结论:获得针对不同抗原结合表位的anti-IL-6Rβ(gp130)mAb,初步的实验结果表明此类单抗不仅具有调控IL-6信号分子和下游STAT3磷酸化的生物学功能,并为解析临床RA的发病与IL-6信号分子的关联性提供了初步的实验结果。

Fas、Caspase-3和抗核小体抗体在参与SLE患者淋巴细胞凋亡紊乱中的作用

目的探讨SLE患者免疫功能紊乱与淋巴细胞凋亡信号传导途径异常之间的关系。方法应用流式细胞术测定SLE患者淋巴细胞表面Fas、FasL及细胞质中活化caspase-3的表达率,并测定凋亡细胞百分率(AnnexinV+PI-)和坏死细胞百分率(AnnexinV+PI+)。应用ELISA方法测定血清中抗核小体抗体浓度。结果与健康对照组相比,稳定期和活动期SLE患者组淋巴细胞中凋亡细胞和坏死细胞百分率均显著增加(P<0.05),淋巴细胞表面Fas、FasL及细胞质中活化caspase-3的表达率也显著增加(P<0.05)。与稳定期SLE患者组相比,活动期SLE患者组淋巴细胞中坏死细胞百分率显著增加(P<0.05),凋亡细胞百分率略有增加但无统计学意义(P>0.05)。活动期患者组淋巴细胞表面Fas、FasL以及细胞质中活化caspase-3的表达率略有增加但无统计学意义(P>0.05)。活动期SLE患者组抗核小体抗体浓度显著高于健康对照组和稳定期患者组(P<0.05)。SLE患者凋亡细胞百分率和活化caspase-3的表达率与补体C3浓度水平呈负相关关系(P<0.05)。结论Fas信号传导通路在SLE患者淋巴细胞凋亡紊乱中发挥了重要作用。caspase-3的活化是早期提示淋巴细胞凋亡的重要信号。SLE患者淋巴细胞凋亡活化程度与疾病活动程度和免疫效应功能紊乱密切相关,而淋巴细胞凋亡异常程度与抗核小体抗体水平的高低密切相关。淋巴细胞凋亡加速在SLE患者免疫病理损伤加重和免疫细胞调控紊乱中扮演了重要角色。

调免3号对封闭抗体缺乏型反复自然流产免疫调节作用

目的探讨中药调免3号对母血封闭抗体缺乏型反复自然流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)免疫调节作用。方法将封闭抗体缺乏型RSA患者61例,采用抽签法随机分成2组,试验组31例服用中药调免3号治疗;对照组30例采用配偶淋巴细胞主动免疫治疗。治疗时间均为3个月,另选10名健康同龄女性为健康对照组。治疗前后检测封闭抗体效率(blocking antibodies,Ab1)、抗独特型抗体(anti-idiotypicantibodies,Ab2)、T细胞亚群(T-lymphocyte cell subsets,CD4,CD8)、IL-10、巨噬细胞集落刺激因子(macrophagecolony-stimulating factor,M-CSF)的水平。结果 (1)试验组治疗后Ab1和(或)Ab2阳转率达87.1%(27/31),对照组为86.7%(26/30),两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。(2)两组治疗后皆CD4下降,CD8提高,CD4/CD8比值处于人体正常值水平,与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05)。(3)两组治疗后IL-10、M-CSF升高,与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05)。(4)试验组1年受孕率58.1%(18/31),高于对照组的46.7%(14/30,P<0.05)。结论中药调免3号可促进母体封闭抗体阳转率,促进IL-10、M-CSF细胞因子的产生,从而加强了母体对胎儿的保护作用和对妊娠的正常维持,1年成功妊娠率明显升高。

抗CD3/CD45双特异抗体激活的效应细胞对白血病细胞的杀伤效应

目的探讨双特异性抗体用于白血病自体干细胞移植体外净化的可能性。方法以抗ＣＤ３／ＣＤ４５双特异性抗体激活外周血单个核细胞，以ＨＬ６０为靶，用ＬＤＨ方法测定杀伤效应。结果靶效比例不同时，抗ＣＤ３／ＣＤ４５激活的效应细胞对ＨＬ６０细胞都表现出杀伤效应。结论抗ＣＤ３／ＣＤ４５可能用于骨髓／造血干细胞移植的体外净化。