抗Galectin-3抗体在皮肤血管炎中的表达

目的:检测系统性红斑狼疮、荨麻疹性血管炎(UV)、过敏性紫癜(HSP)和变应性皮肤血管炎(LCV)患者血清抗Galectin-3抗体的水平。方法:ELISA法检测15例伴发皮肤血管炎表现的SLE、13例UV、15例HSP和8例LCV患者血清及15例正常人血清(阴性对照)抗Galectin-3抗体水平。结果:SLE和UV患者血清中抗Galectin-3抗体吸光度值分别为:0.89±0.08、0.71±0.05,显著高于对照组的0.46±0.02(P<0.05);HSP和LCV患者中分别为0.60±0.05和0.60±0.04,与正常人相比无明显差异。结论:有皮损的荨麻疹性血管炎及系统性红斑狼疮皮肤血管炎可能与血清中抗Galectin-3抗体升高有关。

血清补体C3、C4及抗C1q抗体水平与系统性红斑狼疮患者病情的相关性

目的探讨血清补体C3、C4及抗C1q抗体水平与系统性红斑狼疮(SLE)患者病情的相关性。方法收集105例SLE患者纳入病例组,并选择65例健康人员作为对照组。检测并比较两组血清补体C3、C4和抗C1q抗体及肾功能指标;采用系统性红斑狼疮疾病活动指数(SLEDAI)评估患者的病情活动度,比较不同疾病活动度患者血清补体C3、C4和C1q抗体水平;分析血清补体C3、C4和抗C1q抗体与肾功能及病情活动度的相关性。采用Logistic多因素回归分析影响SLE患者病情变化的危险因素。结果病例组血清肌酐(Scr)(83.61±10.71)μmol/L、尿素氮(BUN)(6.45±1.47)mmol/L、β_(2)-微球蛋白(β_(2)-MG)(6.23±1.42)mg/L均明显高于对照组的(42.06±7.39)μmol/L、(3.02±1.25)mmol/L、(1.65±0.58)mg/L,肾小球滤过率(eGFR)(80.56±14.28)ml/min明显低于对照组的(118.19±15.34)ml/min,差异有统计学意义(P<0.05);病例组血清补体C3、C4水平分别为(0.56±0.17)、(0.16±0.04)g/L,均明显低于对照组的(1.23±0.31)、(0.30±0.12)g/L,抗C1q抗体水平(46.65±11.48)U/ml明显高于对照组的(2.44±0.63)U/ml,差异有统计学意义(P<0.05);轻度活动患者血清补体C3、C4水平分别为(0.89±0.23)、(0.25±0.07)g/L均明显高于中重度活动患者的(0.31±0.08)、(0.08±0.02)g/L,抗C1q抗体水平(31.47±6.28)U/ml明显低于中重度活动患者的(59.76±8.73)U/ml,差异有统计学意义(P<0.05);血清补体C3、C4与Scr、BUN、β_(2)-MG、SLEDAI积分呈负相关(P<0.05),与eGFR呈正相关(P<0.05);抗C1q抗体与Scr、BUN、β_(2)-MG、SLEDAI积分呈正相关(P<0.05),与eGFR呈负相关(P<0.05);Logistic多因素回归分析显示,补体C3、C4、抗C1q抗体是影响SLE病情的独立危险因素(OR=3.54、2.14、5.68,P<0.05)。结论SLE患者存在血清补体C3、C4明显下降,抗C1q抗体水平明显升高现象,多预示患者病情加重,应引起临床医生的重视,并制定有效的治疗方案。

抗CD3/CD20双特异性抗体生物学活性测定方法的建立

目的建立基于报告基因的抗CD3/CD20双特异性抗体生物学活性检测方法。方法以WIL2-S细胞系作为靶细胞,以Jurkat-NF-κB-Luc转基因细胞系作为效应细胞,对抗体的量效范围、孵育时间、诱导时间、效靶比及细胞接种密度进行优化,构建可用于测定抗CD3/CD20双特异性抗体生物学活性的报告基因法。依据ICHQ2的指导原则对方法进行全面验证,包括专属性、准确性、精密度、线性、稳定性。结果成功建立了具有量效关系的抗CD3/CD20双特异性抗体生物学活性检测方法,该方法的抗体起始浓度为500 ng/mL,稀释倍数为1∶4,共计8个浓度点(500,125,31.25,7.81,1.95,0.49,0.12,0.031 ng/mL),效靶比为4∶1,诱导时间为4 h。本方法具有良好的专属性;5个不同稀释组回收率样品经测定,相对效价分别为59.63%±4.57%,75.54%±4.05%,99.98%±9.63%,123.90%±5.54%和142.51%±12.82%;对应的回收率分别为93.17%±7.15%,94.42%±5.06%,99.98%±9.63%,99.12%±4.43%以及91.21%±8.21%,CV分别为7.67%,5.35%,9.63%,4.47%和9.00%,上述结果的变异系数CV值均<10%;实测效价与理论效价线性回归分析相关系数R^(2)=0.9823,线性良好;本研究建立的方法可以敏感检测出抗体结构变化对生物活性的影响,对双特异性抗体的稳定性检测有一定的指导意义。结论利用转基因细胞法成功建立了抗CD3/CD20双特异性抗体生物学活性检测方法,该方法专属性强、准确性高、重复性好,可用于评价抗CD3/CD20双特异性抗体生物学活性。

抗环瓜氨酸肽抗体与基质金属蛋白酶-3联合检测在类风湿关节炎患者中的诊断价值及与疾病活动度的相关性

目的研究抗环瓜氨酸肽(anti-CCP)抗体与基质金属蛋白酶-3(MMP-3)联合检测在类风湿关节炎(RA)患者中的诊断价值及与疾病活动度的相关性。方法回顾性选取2021年1月至2023年1月入淮南新华医疗集团新华医院的92例RA患者作为RA组。同时,选取同一时期入院的92例非RA自身免疫病患者与92名体检健康者分别作为非RA组、对照组。参考28个关节疾病活动度评分(DAS28)将RA组划分为4个亚组:高活动组(DAS28>5.1分,n=23)、中活动组(3.2<DAS28<5.1分,n=23)、低活动组(2.6<DAS28<3.2分,n=23)和稳定组(DAS28<2.6分,n=23)。比较RA组、非RA组、对照组研究对象的血清anti-CCP抗体、MMP-3水平和不同关节疾病活动度RA患者的血清anti-CCP抗体、MMP-3水平,通过受试者工作特征(ROC)曲线分析anti-CCP抗体联合MMP-3检测在RA中的诊断价值,并通过Spearman相关分析法分析血清anti-CCP抗体、MMP-3水平与RA患者疾病活动度的相关性。结果RA组、非RA组的血清anti-CCP抗体、MMP-3水平均明显高于对照组,RA组的血清anti-CCP抗体、MMP-3水平均明显高于非RA组,差异均有统计学意义(P<0.05)。高活动组患者的血清anti-CCP抗体、MMP-3水平明显高于稳定组、低活动度组、中活动度组,中活动度组患者的血清anti-CCP抗体、MMP-3水平均高于稳定组、低活动度组,低活动度组患者的血清anti-CCP抗体、MMP-3水平均高于稳定组,差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线显示,单一anti-CCP抗体诊断RA的ROC曲线下面积(AUC)、敏感度、特异度依次为0.780、0.499、0.945,单一MMP-3诊断RA的AUC、敏感度、特异度依次为0.769、0.749、0.949,anti-CCP抗体联合MMP-3诊断RA的AUC、敏感度、特异度依次为0.890、0.882、0.962。Spearman相关分析显示,血清anti-CCP抗体、MMP-3水平与RA患者疾病活动度呈正相关(r=0.836、0.688,P<0.05)。结论anti-CCP抗体与MMP-3联合检测在RA诊断中效果显著,可提升RA诊断精准性,且RA患者疾病活动度与anti-CCP抗体、MMP-3呈正相关性,可为临床药物使用提供参考。

血清抗环瓜氨酸肽抗体、类风湿因子、免疫球蛋白G、补体C3、补体C4检测在类风湿关节炎诊断中的应用价值

目的:探讨血清抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体、类风湿因子(RF)、免疫球蛋白G(IgG)、补体C3、补体C4检测在类风湿关节炎诊断中的应用价值。方法:选取2020年3月—2022年3月枝江市人民医院收治的类风湿关节炎患者126例作为观察组,另选取同期体检健康者126例作为对照组,根据类风湿关节炎疾病活动(DAS-28)评分将观察组分为缓解期组(n=72)与活动期组(n=54)。所有研究对象检测血清CCP抗体、RF、IgG、补体C3、补体C4水平。比较各组各项指标水平。结果:观察组血清CCP抗体、RF、IgG、补体C3、补体C4水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。活动期组血清CCP抗体、RF、IgG、补体C3、补体C4水平均高于缓解期组,差异有统计学意义(P<0.001)。结论:类风湿关节炎患者体内血清CCP抗体、RF、IgG、补体C3、补体C4均异常升高,并与类风湿关节炎病情活动度有关,可作为类风湿关节炎早期诊断及病情监测的重要指标。

血清SOCS-1、SOCS-3及抗BP-180抗体水平与大疱性类天疱疮病情的相关分析

目的探讨血清细胞因子信号转导抑制蛋白-1(SOCS-1)、SOCS-3及抗大疱性类天疱疮(BP)-180抗体水平与BP病情的相关分析。方法选取2018年5月—2022年5月本院诊治的82例BP患者作为研究对象,并将其设立为观察组,同期选取41例健康体检者作为对照组,并根据病情程度将82例BP患者分为轻度组(活动性皮损面积≤10%,n=28)、中度组(活动性皮损面积10%~30%,n=27)和重度组(活动性皮损面积>30%,n=27),展开回顾性研究,对比血清SOCS-1、SOCS-3、抗BP-180抗体水平及自身免疫性大疱性皮肤病严重程度评分(ABSIS);采用Pearson法分析SOCS-1、SOCS-3、抗BP-180抗体与ABSIS评分的相关性;并绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估SOCS-1、SOCS-3、抗BP-180抗体诊断BP的曲线下面积(AUC)、敏感度和特异度。结果观察组的男性、女性均可发病,性别分布上差异无统计学意义,其中40~69岁为高发的年龄段。观察组的SOCS-1、SOCS-3、抗BP-180抗体及ABSIS均高于对照组(P<0.05)。重度组的SOCS-1、SOCS-3、抗BP-180抗体及ABSIS均高于轻度组和中度组(P<0.05);中度组的SOCS-1、SOCS-3、抗BP-180抗体及ABSIS均高于轻度组(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,SOCS-1、SOCS-3、抗BP-180抗体与ABSIS呈正相关(r分别为0.441、0.580、0.723,P<0.001)。ROC曲线分析显示,SOCS-1、SOCS-3和抗BP-180抗体诊断BP的AUC值分别为0.696、0.765和0.965(P<0.05);敏感度分别为53.70%、41.50%和95.10%,特异度分别为87.80%、100.00%和85.40%。结论血清SOCS-1、SOCS-3及抗BP-180抗体水平与BP病情严重程度呈正相关,即其水平会随着病情程度变化而发生改变,临床可通过监测SOCS-1、SOCS-3及抗BP-180抗体水平变化为诊断BP及评估病情严重程度提供参考。

青年脑卒中病人血清抗髓过氧化物酶抗体及补体C3、C4水平与神经功能缺损程度的相关性

目的:分析血清抗髓过氧化物酶抗体及补体C3、C4水平与青年脑卒中病人神经功能缺损程度的相关性。方法:选取2020年1月—2021年6月于我院住院治疗的青年脑卒中病人107例作为脑卒中组,采用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分评估病人神经功能缺损程度,将病人分为轻型组40例,中型组35例,重型组32例;选取同期本院健康体检者104名作为对照组。收集收缩压、舒张压等一般资料,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测血清抗髓过氧化物酶抗体水平,采用免疫透射比浊法检测补体C3、C4水平。采用Pearson法分析青年脑卒中病人血清抗髓过氧化物酶抗体及补体C3、C4水平与神经功能缺损程度的相关性。采用多因素Logistic回归分析法分析影响青年脑卒中病人神经功能缺损程度的因素。结果:脑卒中组血清抗髓过氧化物酶抗体阳性率、补体C3、补体C4、收缩压、舒张压水平及高血压比例高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。重型组血清抗髓过氧化物酶抗体阳性率及补体C3、C4水平高于中型组、轻型组,中型组血清抗髓过氧化物酶抗体阳性率及补体C3、C4水平高于轻型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。青年脑卒中病人血清抗髓过氧化物酶抗体及补体C3、补体C4水平与NIHSS评分均呈正相关(r值分别为0.523,0.509,0.547,P<0.05)。抗髓过氧化物酶抗体及补体C3、补体C4是青年脑卒中病人神经功能缺损的独立影响因素(P<0.05)。结论:抗髓过氧化物酶抗体、补体C3、补体C4在青年脑卒中病人血清中高表达,且均与神经功能缺损程度呈正相关。

缺血性脑卒中患者外周血抗磷脂抗体、miR-125a-3p的检测及临床意义

目的 探究缺血性脑卒中(CIS)患者外周血抗磷脂抗体(aPLs)、miR-125a-3p的检测及临床意义。方法 选取2018年1月至2021年12月该院297例CIS患者为观察组,再选取同期200例健康体检者为对照组。比较两组miR-125a-3p水平及aPLs阳性率,并比较不同神经功能缺损程度患者miR-125a-3p水平及aPLs阳性率,比较不同预后患者一般资料及miR-125a-3p水平、aPLs阳性率,分析预后不良的危险因素,以及miR-125a-3p、aPLs对CIS患者预后不良的预测价值。结果 观察组血清miR-125a-3p水平、aPLs阳性率较对照组高(P<0.05);随着神经功能缺损程度增加,miR-125a-3p水平、aPLs阳性率逐渐增加(P<0.05);预后不良患者总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、miR-125a-3p、aPLs阳性率较预后良好患者高(P<0.05);miR-125a-3p水平高和aPLs阳性均为预后不良的危险因素(P<0.05);受试者工作特征(ROC)曲线显示,miR-125a-3p、aPLs联合预测CIS患者预后不良的曲线下面积(AUC)为0.859,高于单独预测(P<0.05)。结论 CIS患者miR-125a-3p水平、aPLs阳性率明显升高,且与神经功能缺损程度密切相关,且miR-125a-3p、aPLs在预后评估方面具有较好价值。

ATG3 rs2638029、rs3732817基因多态性与广西地区抗中性粒细胞胞质抗体相关性小血管炎的相关性

目的探讨广西地区人群自噬相关基因(ATG)3 rs2638029、rs3732817位点多态性与原发抗中性粒细胞胞质抗体相关性小血管炎(AAV)的关联关系。方法采用多重PCR结合高通量测序技术检测194例AAV患者(AAV组)和195例健康成人(对照组)ATG3 rs2638029、ATG3 rs3732817位点的基因型,并收集受试者相关临床资料,分析其基因多态性与AAV易感性、临床症状的关系。结果ATG3 rs2638029、ATG3 rs3732817等位基因和基因型在AAV组和对照组分布差异无统计学意义(P>0.05),两位点存在连锁不平衡(D′=0.969,r^(2)=0.249),两位点可构建3个常见单体型,在AAV组和对照组中,各单体型分布差异无统计学意义(P>0.05)。ATG3 rs2638029及rs3732817不同基因型之间,水肿、血尿、蛋白尿症状发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。ATG3 rs2638029位点不同基因型IgG水平分布差异有统计学意义(P<0.05)。ATG3 rs3732817位点不同基因型白蛋白水平分布差异有统计学意义(P<0.05)。结论广西人群中的AAV患者ATG3基因多态性可能与IgG水平升高、低白蛋白血症相关联,但可能与AAV患者的遗传易感性无明显关联性。

抗中性粒细胞胞浆抗体核型分布及疾病特征分析

分析抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)检测的核型分布及疾病特征。方法 回顾性分析江苏省中医院2019年1月至2021年1月ANCA检测的患者8556例,采用间接免疫荧光法检测ANCA荧光核型,免疫印迹法检测抗髓过氧化物酶(MPO)抗体和抗蛋白酶3(PR3)抗体。结果 8556例患者中阳性患者共581例,阳性率6.79%。女性患者阳性率(8.26%)高于男性患者阳性率(5.29%),差异有统计学意义(χ2=29.734,P<0.05)。不同年龄组间ANCA阳性率比较,差异有统计学意义(χ2=15.920,P<0.05)。ANCA阳性患者中主要临床病变特征为炎症性肠炎(23.75%)、肾脏病变(18.93%)和肺部病变(16.01%)。溃疡性结肠炎、慢性肾病和间质性肺炎患者ANCA阳性率最高,分别为48.05%、20.57%和9.63%。结论 ANCA检测在临床中有重要的应用价值,在炎症性肠炎,慢性肾病、肾小球肾炎等肾脏病变,间质性肺炎、慢性阻塞性肺炎等肺部病变的诊断、监测及预后判断中有重要的临床意义。

抗3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶抗体阳性特发性炎性肌病的临床及病理分析

目的本研究旨在检测抗3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMG-CoA reductase,HMGCR)抗体在特发性炎性肌病(idiopathic inflammatory myopathies,IIM)患者中的阳性率,并分析抗体阳性者的临床特点。方法用酶联免疫法检测2012—2022年就诊于中日友好医院的1020例IIM患者的抗HMGCR抗体。回顾分析抗体阳性患者的临床资料、肌肉病理及治疗反应。结果43例(4.2%)携带抗HMGCR抗体,主要以女性为主(65%),25.6%的患者有他汀类药物暴露史,33例(76.7%)渐进性出现肌肉无力,约1/3出现吞咽困难,27.9%出现间质性肺疾病和皮疹。肌酸激酶平均水平(6220.2±4818.9)U/L。80%的患者肌肉MRI可见弥散性炎性渗出。他汀暴露患者与非暴露者平均发病年龄分别为60.6岁、40.3岁(P=0.001)。回顾分析32例患者的肌肉病理,25例(78.1%)表现为明显的肌细胞坏死,伴或不伴少量炎性细胞浸润。随访的35例患者,30例(85.7%)治疗后获得改善。结论抗HMGCR抗体阳性的IIM主要表现为肌无力,大部分患者肌肉病理符合免疫介导坏死性肌病。少数患者与应用他汀类药物有关。大多数对免疫抑制治疗有反应,预后良好。

鼻咽癌组织中Tim-3和Galectin-9蛋白表达及其对临床疗效和预后的影响

目的:探讨鼻咽癌组织中Tim-3和Galectin-9蛋白表达及其对临床疗效和预后的影响。方法:收集2016年10月至2019年10月本院收治的60例鼻咽癌患者,所有患者接受调强放射治疗方案。采用免疫组化SP法检测60例鼻咽癌患者癌组织及癌旁组织中Tim-3和Galectin-9蛋白的表达情况,分析蛋白表达与临床特征、放疗疗效及预后的关系。结果:鼻咽癌组织中Tim-3和Galectin-9蛋白阳性表达率均明显高于癌旁组织(58.33%vs 31.67%,71.67%vs 33.33%,均P<0.05);肿瘤组织中Tim-3和Galectin-9的表达与临床分期、是否远处转移相关(P<0.05),与患者性别、肿瘤大小、年龄和血清EB病毒无明显关联(P>0.05);Tim-3和Galectin-9蛋白阳性患者放疗敏感性均显著高于Tim-3和Galectin-9阴性患者(均P<0.05);Tim-3和Galectin-9蛋白阳性表达率与鼻咽癌复发率呈正相关关系(r=0.345,r=0.287,均P<0.05)。结论:Tim-3蛋白和Galectin-9蛋白在鼻咽癌中的侵袭与转移中发挥着重要作用,Tim-3蛋白和Galectin-9蛋白高表达患者预后较差,Tim-3和Galectin-9蛋白组阳性患者放射抗性较低,联合检测Tim-3蛋白和Galectin-9蛋白对鼻咽癌的治疗及预后有一定的指导意义。

抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体的构建和表达

构建和表达抗CD3 抗Pgp微型双功能抗体 ,并测定该微型双功能抗体的生物学活性。采用PCR和overlapPCR方法构建抗CD3 抗Pgp微型双功能抗体 ,并用双脱氧终止法测定DNA序列 ;采用亲和层析法纯化该产物 ,并用Westernblot和分子排阻层析鉴定纯化产物 ;采用免疫荧光法、放射免疫分析法鉴定纯化产物与靶细胞的结合活性。DNA序列测定结果表明 :抗CD3 抗Pgp微型双功能抗体已构建成功 ,表达可溶性产物的产量达 2mg L以上 ,纯化产物中二聚体的比例达 90 % ,具有与Jurkat(CD3 + )和K5 62 A0 2细胞 (Pgp+ )结合的活性 ,与抗CD3ScFv及抗PgpScFv的亲合常数相当。成功地构建了抗CD3 抗Pgp微型双功能抗体 ,并获得高效表达 。

类风湿关节炎患者检测血清14-3-3η蛋白和自身抗体的临床意义

目的:探讨血清14-3-3η蛋白与自身抗体检测对类风湿关节炎(RA)诊断的临床价值。方法:收集134例RA患者、90例非RA关节病变患者及同期40例健康体检者血清样本,采用ELISA和速率比浊法分别检测14-3-3η蛋白、抗CCP抗体(anti-CCP)、抗RA33抗体(anti-RA33)、抗Sa抗体(anti-Sa)和类风湿因子(RF)含量,并分析其对RA的诊断价值。结果:(1)血清14-3-3η蛋白、anti-CCP、anti-RA33、anti-Sa、RF水平在RA组均显著高于非RA组和对照组,组间差异都具有统计学意义;(2)绘制各指标ROC曲线,14-3-3η蛋白、anti-CCP、anti-RA33、anti-Sa、RF曲线下面积(AUC)分别0.831、0.852、0.615、0.706和0.739,均P<0.01;其中14-3-3η蛋白和anti-CCP达到中等以上诊断价值,对应cutoff值分别为2.59 ng/ml和24.10 U/ml;(3)所有指标中anti-Sa特异度最强为97.69%,RF灵敏度最高为83.58%;14-3-3η诊断RA的特异度为91.54%仅稍次于anti-Sa和anti-RA33抗体,但其敏感度较anti-Sa和anti-RA33均高。结论:14-3-3η蛋白、anti-CCP、anti-RA33、anti-Sa和RF在RA中均显著升高,对RA的诊断都有一定的价值。同时,14-3-3η诊断RA的敏感度和特异度相比自身抗体更有一定优势,可以作为辅助诊断RA的指标。

系统性红斑狼疮患者抗磷脂抗体与低水平补体C3、C4的关系

目的补体活化和低补体血症常见于系统性红斑狼疮（SLE）患者,15%~40%SLE患者抗磷脂抗体（antiphospholipid,a PL）呈阳性。本文探讨SLE患者血清抗磷脂抗体与低水平补体的关系。方法选取我院2013年2月至2015年2月住院及门诊部诊治的SLE患者126例（SLE组）和健康体检者162例（健康对照组）,根据SLE疾病活动指数（systemic lupus erythematosusdisease activity index,SLEDAI）将SLE组又分为SLE轻度活动组、中度活动组和重度活动组（n分别为48、52、26）。所有样本行抗β2糖蛋白1（β2GP1）抗体、抗心磷脂抗体（a CL）、C-反应蛋白、抗ds DNA抗体、补体C3、C4检测。观察a PL抗体与补体C3、C4的相关性。结果与健康对照组相比,SLE组血清CRP水平,各种亚型a PL抗体滴度显著升高,差异均有统计学意义（P均〈0.05）,SLE轻度和中度活动组患者血清C3、C4水平差异均无统计学意义（P均〉0.05）,而SLE重度活动组患者血清补体C3、C4水平显著降低,差异均有统计学意义（P均〈0.05）;SLE轻度、中度、重度活动组三者相比,各类亚型a PL抗体均呈显著升高趋势,差异均有统计学意义（P均〈0.05）;SLE患者血清补体C3、C4水平与各类亚型a PL抗体滴度均呈显著负相关（r=-0.205、-0.213、-0.207、-0.19,P〈0.05;r=-0.935、-0.933、-0.914、-0.929,P〈0.01）;与a PL抗体阴性SLE组相比,a PL阳性SLE患者血清补体C3、C4水平显著降低,差异有统计学意义（P〈0.05）,抗ds DNA抗体阳性率显著高于阴性组（P〈0.05）。结论 a PL抗体与SLE患者疾病活动度相关,且与补体C3、C4水平呈显著负相关,a PL抗体可能激活补体C3、C4共同参与SLE患者的疾病活动。

抗CD28抗体协同刺激增强抗CD3抗体体外激活T淋巴细胞并降低TGF-β的表达

为了探讨体外激活T淋巴细胞的方法及活化后T淋巴细胞的免疫学特征,利用抗CD3、抗CD28抗体在体外刺激健康人外周血单个核细胞PBMNC,检测淋巴细胞转化,CD8+CD25+细胞比例和肿瘤生长因子β(TGF-β)表达等相关免疫学指标。结果表明,在抗CD28抗体的协同作用下,抗CD3抗体的刺激活性明显提高,CD8+CD25+细胞比例明显增加,TGF-β的表达下调。结论:抗CD28抗体协同刺激可以提供第二信号,使T淋巴细胞充分活化。

抗RA33、抗CCP抗体检测在RA诊断中的应用

目的 探讨抗RA33、抗CCP抗体对RA的诊断价值。方法 用ELISA方法分别检测 4 3例RA患者、2 3例非RA弥漫性结缔组织病患者、4 5例正常对照血清中抗RA33、抗CCP抗体水平。结果 抗RA33、抗CCP抗体对RA的诊断敏感性分别为 2 0 .9%、6 0 .5 % ,特异性分别为 88.2 %、97.1 %。结论 抗RA33抗体可作为RA的早期诊断指标 ,抗CCP抗体可以作为RA的特异性诊断指标。

副肿瘤性天疱疮抗Dsg1和抗Dsg3抗体滴度及亚型和细胞因子的表达

目的对不同病期的副肿瘤性天疱疮(PNP)患者血清中抗桥粒芯糖蛋白(Dsg)1和抗Dsg3抗体的滴度、亚型及其外周血单个核细胞(PBMC)中细胞因子IFN-γ和IL-4水平进行观察,探讨PNP的特殊发病机制。方法采用ELISA法检测6例PNP患者不同病期抗Dsg1和抗Dsg3抗体滴度及其IgG1和IgG4抗体亚型;采用流式细胞术(FCM)检测上述患者PBMC中T细胞的IFN-γ和IL-4水平,并与10例寻常型天疱疮(PV)患者、10例落叶型天疱疮(PF)患者及20例正常对照进行比较。结果 PNP患者组在急性期抗Dsg1和抗Dsg3抗体滴度均升高,稳定期均明显降低,抗Dsg1和抗Dsg3抗体亚型IgG1/IgG4均以IgG1为主,与PV组相比,差异均有统计学意义(P均<0.05),与PF组患者的抗Dsg1抗体亚型IgG1/IgG4比较,差异也有统计学意义(P<0.01);PNP组患者CD8+T细胞及CD4+T细胞内IFN-γ水平明显高于PV组患者和PF组患者(P=0.001),且稳定期CD8+T细胞及CD4+T细胞内IFN-γ水平较急性期明显降低(P<0.05)。PNP组急性期患者的CD4+T细胞内IL-4水平显著低于PV组患者(P<0.05)和PF组患者(P<0.01),但在稳定期时,其水平与急性期比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PNP患者在抗Dsg1和Dsg3抗体的亚型、细胞因子等方面与其他类型的天疱疮存在明显差异。

抗人卵巢癌/抗人CD3单链双特异性抗体介导的αβT细胞CDR3谱系漂移

目的探讨抗人卵巢癌/抗人CD3单链双特异性抗体(BHL-1)介导的αβT细胞CDR3谱系漂移,为双特异性抗体介导的T细胞免疫应答机制提供理论基础。方法采用免疫扫描谱型分析技术,分析6例正常献血员T细胞在人卵巢癌SKOV3细胞联合BHL-1刺激前后的TCR库多样性变化(CDR3谱型分布特征)及刺激后T细胞TCRα、β链CDR3优势利用情况,对克隆性增生T细胞的CDR3区进行序列分析。结果刺激前6例正常献血员TCR CDR3谱型均呈高斯分布,刺激后发生CDR3谱系漂移,部分TCR Vα、Vβ家族出现优势增生,明确了BHL-1介导下单克隆增生T细胞的α、β链CDR3序列。结论 SKOV3联合BHL-1诱导的T细胞CDR3谱系出现明显漂移,提示CDR3的选择性表达可能与BHL-1介导的特异性T细胞免疫反应有关,特异应答T细胞TCR CDR3序列的确定,将为卵巢癌的T细胞免疫治疗提供基础。

抗CD3基因工程嵌合抗体IgG在哺乳动物细胞中的表达和活性测定

利用基因工程方法将鼠源性抗CD3抗体HIT3a的可变区和人源抗体 (IgG)的完整的恒定区连接起来 ,构建全抗型抗CD3嵌合抗体 ,该型抗体具有较低的免疫源性可作为免疫抑制剂应用于器官移植 ,减少受体产生免疫排斥 ,提高移植器官的存活率。利用PCR方法从抗CD3ScFv重组噬菌体表达载体pCANTAB 5E上扩增抗CD3抗体的轻链和重链可变区 ,将轻链和重链可变区组装到含有人抗体 (IgG)恒定区的表达载体中 ,构建抗CD3嵌合抗体IgG的轻链和重链表达载体PKN10 0和PG1D10 5 ,并用脂质体法共转染CHO细胞。结果证明 ,抗CD3嵌合抗体的VL 和VH 与HIT3a抗体的VL 和VH 完全相符 ,ELISA和Westernblot检测结果证实转染细胞的培养上清中含有抗CD3嵌合抗体IgG的表达 ,表达产物能与Jurkat细胞结合 ,并能竞争性抑制HIT3a抗体和Jurkat细胞结合活性 ,3H TdR掺入实验表明 ,抗CD3嵌合抗体与亲代抗体HIT3a一样 ,具有促进外周血单核细胞增殖的作用。我室构建的全抗型抗CD3嵌合抗体分子表达载体可在CHO细胞中稳定表达 ,表达产物有较好生物活性 。