抗HLA-B27单克隆抗体的制备鉴定及初步应用

目的 制备HLA -B2 7单克隆抗体。方法 用HLA -B2 7抗原免疫小鼠 ,取脾细胞与骨髓瘤细胞融合制备杂交瘤细胞 ,用ELISA法筛选分泌该单抗的细胞株。结果 建立了分泌该单抗的细胞系 3B3和 4F2 ,抗体均为IgG2b ,3B3细胞分泌的单抗只与B2 7反应 ,而 4F2细胞分泌的单抗与B7有交叉反应。 结论 建立了高特异性分泌抗B2 7单抗的细胞株 。

强直性脊柱炎患者HLA-B27、B7、B13、B40抗原表达及免疫学指标的分析

目的探讨强直性脊柱炎患者HLA-B 27、B 7、B 13、B 40的抗原表达,发现抗原相互杂合与交叉反应,以及强直性脊柱炎患者的免疫学指标的变化。方法采用N IH微量淋巴细胞毒法对HLA-B 27等抗原进行检测,抗核抗体采用间接免疫荧光法,免疫球蛋白及补体均采用免疫速率散射法测定。结果126例初诊患者中HLA-B 27阳性率为34.1%,HLA-B 7、B 13、B 40的阳性率分别为6.3%,13.5%,11.1%。HLA-B 27阳性组中HLA-B 13阳性率为27.9%,HLA-B 40阳性率为23.3%,分别高于HLA-B 27阴性组(6.0%,4.8%),而HLA-B 7的阳性率两组无显著性差异。HLA-B 27阳性组的免疫球蛋白、补体、抗核抗体指标均显著高于HLA-B 27阴性组(P均<0.05)。结论检测强直性脊柱炎患者HLA-B 27及相关B抗原有助于疾病诊断和抗原交叉反应的分析,体液免疫异常及自身抗体的出现与HLA-B 27密切相关。

人工合成HLA-B_(27)多肽抗原的单克隆抗体研究

本文报道用人工合成HLA-B_(27)抗原决定基的多肽为免疫原来制备McAb的研究.根据计算机对B_(27)分子一级结构的B细胞识别序列的分析结果,用固相法合成了B_(27)分子多态区抗原决定基上P_(62-24)与P_(69-84)两个肽段,分别与KLH和BSA载体偶联,免疫RALB/c小鼠.当按常规方法免疫动物进行5次融合,所得17株抗小肽McAb均可与载体分子有较强的交叉反应.当在融合前的末次加强免疫改为仅用不接载体的小肽来进行,三次融合就获得了9株不与载体分子发生交叉反应的特异性抗肽McAb,为今后鉴定出可和天然B_(27)分子起反应的McAb提供了基础.文中对这二种免疫方案还作了比较和讨论。

HLA-B27异常表达在免疫相关性血细胞减少疾病中的临床意义及相关机制研究

目的观察免疫相关性血细胞减少(immunorelated hematocytopenia,IRH)和免疫相关性全血细胞减少(immunorelated pancytopenia,IRP)患者HLA-B27群体表达情况,分析HLA-B27检测分型对该类疾病诊疗的临床意义。方法①ELISA方法检测患者血清HLA-B27抗原、IL-12、IL-17和IFN-γ水平。②细胞免疫化学(immunochemistry,IC)染色观察骨髓中抗原递呈细胞(APC)HLA-DR表达情况。③原位免疫荧光(immunofluorescence,IF)染色,观察患者骨髓造血细胞表面抗人球蛋白IgG、FcγⅡR、甘露糖受体(MR)、IL-12和IL-17A表达情况。④根据HLA-B27和血沉等检测指标对IRH/IRP分型选择治疗方案。结果①106例IRH/IRP中45例(42.45%)血清HLA-B27显著升高(70.03±8.21)pmol/L,对照组仅2例(6.0%),P<0.01。②HLA-B27+组血清IL-17和IFN-γ血清质量浓度分别为(50.26±3.67)pg/ml和(42.95±3.64)pg/ml,显著高于HLA-B27-组(36.11±2.17)pg/ml和(28.875±5.81)pg/ml,P值均<0.05。③IRH/IRP患者骨髓中树突状细胞(DC)和巨噬细胞(Mφ)捕获和吞噬血细胞现象活跃,活化的DC与Mφ高表达HLA-DR抗原,HLA-B27+组骨髓中可见到淋巴细胞攻击造血细胞现象;粒细胞减少的患者骨髓中嗜酸性粒细胞攻击粒细胞现象多见。④IRH/IRP患者骨髓中部分造血细胞表面表达抗人IgG,DC和Mφ表达MR、IL-12和IL-17A,并介导对病变造血细胞的捕获和吞噬和炎性损伤。⑤在伴有IgG和ESR升高的患者骨髓中活化的Mφ高表达FcγRⅡ受体,发挥ADCC效应介导对病变造血细胞的损伤。结论 IRH/IRP是一类涉及细胞免疫和体液免疫多个环节,主要累及骨髓造血细胞且具有基因易感性的免疫相关性血细胞减少性疾病。部分患者发病与HLA-B27基因活化状态有一定关联,HLA-B27+伴体液免疫指标活化者病情更重。HLA-B27检测对疾病的评估、治疗和预后有着重要的临床意义。