抗HPV16E_6与抗HPV18E_6核酶的设计、表达与活性鉴定

获得特异性抗人乳头瘤病毒（Ｈｕｍ ａｎ ｐａｐｉｌｌｏｍ ａｖｉｒｕｓ，ＨＰＶ）１６ 型和１８ 型Ｅ６ 基因的核酶（Ｒｉｂｏｚｙｍ ｅ），用以在基因调控水平防治ＨＰＶ相关性肿瘤。采用计算机软件针对ＨＰＶ １６Ｅ６ 基因和ＨＰＶ １８Ｅ６ 基因，设计相应的ｒｉｂｏｚｙｍ ｅ；体外合成核酶基因后，克隆于原核表达质粒中。将ＨＰＶ１６Ｅ６ 、ＨＰＶ１８ Ｅ６ 基因片段也克隆入原核表达质粒中，体外转录而得到核酶和病毒ｍ ＲＮＡ，进行体外切割实验以鉴定核酶的活性。抗ＨＰＶ１６Ｅ６核酶与抗ＨＢＶ１８Ｅ６ 核酶（抗１６ＨＲｚ和抗１８ＨＲｚ）被装入ｐＲＧ５２３载体中，体外转录后能将核酶独立地释放出来。体外切割实验证明抗１６ＨＲｚ和抗１８ＨＲｚ分别能准确、有效地识别和切割靶ＲＮＡ片段。所获得的抗１６ＨＲｚ和抗１８ＨＲｚ核酶能特异性切割靶ｍ ＲＮＡ。