抗KDR3单克隆抗体的制备和生物活性的鉴定

目的:制备抗KDR3单克隆抗体,研究其阻断VEGF受体的作用。方法:将抗KDR3单克隆抗体腹水,采用ELISA酶免疫分析方法,测定其效价,提取ECV304细胞膜蛋白用Westernblot方法进行识别抗原的鉴定,并测定抗KDR3单克隆抗体的活性。结果:获得一株稳定分泌抗KDR3的杂交瘤细胞株,所产生抗体可阻断VEGF对人脐静脉内皮细胞系ECV304的刺激增生作用。结论:抗KDR中和抗体IMC-ICI和抗KDR3单克隆抗体同样对ECV304细胞都表现出对外源性VEGF有明显抑制作用,而且对内源性VEGF也有明显抑制作用。抗KDR3单克隆抗体在肿瘤治疗的过程中将起一定的作用。

基础理论

041874 整合常规技术探索肿瘤差异表达基因/李守新…∥肿瘤.-2004,24(3).-230～232 从骨髓细胞株U266中分离出CD45^+和CD45^-细胞,结合应用减法杂交、抑制性PCR、T/A克隆技术,寻找CD45^+和CD45^-细胞间的差异表达基因。结果:减法杂交可缩减约20倍的高丰度表达基因,意即低丰度表达基因富聚约20倍。用正向或负向减法探针,分别和来源于CD45^+细胞克隆的质粒DNA杂交,筛选500个表达克隆,发现几个差异表达基因,并经RT-PCR证实。